Durch Polymerase-Kettenreaktion (PCR) diagnostizierte Malaria-Infektion als Mittel zur Bewertung von präerythrozytären Malaria-Impfstoffkandidaten

Zielsetzung

Das Hauptziel der Studie bestand darin festzustellen, ob die sehr empfindliche PCR-Technik, die in der Lage ist, Malariaparasiten in geringer Dichte nachzuweisen, als wirtschaftliche Methode zur Durchführung einer vorläufigen Feldbewertung von präerythrozytären Malariaimpfstoffen eingesetzt werden kann. Ein sekundäres Ziel bestand darin festzustellen, ob die intensive Blutentnahme, die diese Methode erfordert, akzeptabel wäre.

Studienbereich

Diese Studie wurde von Juni bis Oktober 2004 durchgeführt, wenn die Inzidenz von Malaria in Gambia am höchsten ist. Freiwillige wurden aus 9 Dörfern östlich von Farafenni rekrutiert, einer Stadt, die 200 km östlich der Hauptstadt Banjul liegt. Malaria ist in diesem Gebiet mit einer entomologischen Inokulationsrate zwischen 10 und 50 infektiösen Stichen pro Jahr stark saisonbedingt.

Studienpopulation

Gesunde Freiwillige im Alter zwischen 15 und 45 Jahren wurden in zwei Zentren auf ihre Eignung zur Teilnahme an der Studie untersucht. Das Screening umfasste eine gründliche körperliche Untersuchung sowie Blutentnahmetests für hämatologische (großes Blutbild, gepacktes Zellvolumen [PCV]), renale (Plasma-Kreatininspiegel) und hepatische (Alaninaminotransferase) Tests und für HIV 1- und 2-Tests durch ELISA . Aufgrund des Risikos, das mit der Verabreichung der Studienmedikamente Primaquine und Lapdap an Freiwillige mit G6PD-Mangel verbunden ist, wurde ein Glukose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G6PD)-Mangeltest durchgeführt. Zu den Ausschlusskriterien gehörten ein PCV < 30 %, erhöhte Plasma-Kreatinin- (> 130 Mikromol/Liter) oder ALT-Spiegel (> 42 IE/Liter), G6PD-Mangel, gleichzeitige Teilnahme an einer anderen klinischen Studie, Bluttransfusion im Monat vor der Impfung, vorherige experimentelle Malaria-Impfung, Verabreichung eines anderen Impfstoffs innerhalb von 2 Wochen nach der Impfung, Allergie gegen eine frühere Impfung oder gegen Sulfadoxin/Pyrimethamin, Splenektomie in der Anamnese und Behandlung mit immunsuppressiven Medikamenten.

Studienablauf

Geeignete Freiwillige wurden in die Studie aufgenommen, nachdem eine schriftliche Einwilligung nach Aufklärung eingeholt worden war. Alle berechtigten Freiwilligen erhielten eine eindeutige Nummer und einen Lichtbildausweis. Die Freiwilligen wurden nach dem Zufallsprinzip in drei Gruppen eingeteilt, die entweder zwei 5 x 10^7 pfu-Dosen von FP9 ME-TRAP gefolgt von einer Einzeldosis von 1 x 10^8 pfu MVA ME-TRAP (Malaria-Impfstoff-Gruppe) oder 3 Dosen Tollwutimpfstoff ( Fansidar und Tollwutgruppen). Alle Impfstoffe wurden im Abstand von 4 Wochen verabreicht und wurden intradermal verabreicht. Nach der Impfung wurden alle Freiwilligen 1 Stunde lang beobachtet und erhielten bei Bedarf eine antipyretische Behandlung (Paracetamol). Zusätzlich wurden an den Tagen 1, 2, 7 und 28 nach jeder Impfung Hausbesuche von Außendienstmitarbeitern durchgeführt, um unerwünschte Ereignisse unter Verwendung einer Standard-Tagebuchkarte aufzuzeichnen. Alle Freiwilligen erhielten 7 Tage vor der letzten Impfdosis eine Einzeldosis Primaquine (30 mg) als Radikalheilung für Gametozyten und eine 3-tägige Kur mit den kurz wirkenden Anti-Malaria-Medikamenten Lapdap und Artesunat in Kombination, beginnend am Tag der letzten Impfung Impfung, um alle asexuellen Formen des Parasiten vor der Nachbeobachtungszeit zu beseitigen. Darüber hinaus erhielten die Freiwilligen in der Fansidar-Gruppe das lang wirkende Anti-Malaria-Medikament und es wurde erwartet, dass sie während des gesamten Nachbeobachtungszeitraums PCR-negativ bleiben. Freiwillige wurden 28 Tage lang intensiv nachbeobachtet, beginnend 7 Tage nach der letzten Impfung. Der Zeitraum der Nachbeobachtung wurde zeitlich so festgelegt, dass er dem Zeitraum hoher Malariaübertragung entsprach. Die Nachsorge erfolgte durch tägliche Stiche in den Finger, um 0,5 ml Blut in einem Microtainer für die PCR-Analyse und einen doppelten Blutausstrich zur Bestimmung von Malariaparasiten zu erhalten. Laborpersonal, das Immunoassays und PCR-Analysen durchführte, war bis zur Genehmigung des Analyseplans durch das Data Safety Monitoring Board (DSMB) gegenüber der Gruppenzuteilung der Freiwilligen blind.

Stichprobengröße

Basierend auf praktischen und statistischen Erwägungen schlugen die Forscher vor, 40 Freiwillige pro Gruppe (insgesamt 120) einzuschreiben. Unter Berücksichtigung einer stetigen Abbruchrate während der Nachbeobachtung von insgesamt 20 % der Probanden bis zum Ende der Studie hat die Studie eine Aussagekraft von mindestens 80 %, um einen Unterschied in der Zeit bis zur Infektion zwischen der Malaria-Impfstoff- und der Tollwut-Gruppe zu erkennen , wenn die Wirksamkeit des Impfstoffs mindestens 60 % beträgt und mindestens 70 % der Freiwilligen der Kontrollgruppe während des Versuchs eine nachgewiesene Parasitämie entwickeln.

Data Safety Monitoring Board (DSMB)

Ein DSMB wurde eingerichtet, um die Durchführung der Studie zu überwachen und den Analyseplan zu genehmigen, bevor das Laborpersonal entblindet wurde. Die Studie wurde gemäß den ICH-Richtlinien für gute klinische Praxis durchgeführt und richtete sich nach den Vorschriften des Medical Research Council für die Durchführung klinischer Studien.