Bluttest auf Eierstockkrebs-assoziierte Autoantikörper

Da Mutationen einer normalen Zelle, die zu einer bösartigen Erkrankung führen, Veränderungen in der Struktur und Funktion der Zellen mit sich bringen, könnte man davon ausgehen, dass das Immunsystem einige dieser Veränderungen als antigene Determinanten erkannt hat, gegen die reagiert werden sollte. Viele Jahre lang versuchten Forscher, anhand des Unterschieds in der Konzentration spezifischer Autoantikörper zwischen Krebspatienten und einer gesunden Bevölkerung zu unterscheiden. In der gesunden Bevölkerung wurde ein Ausgangswert für die Menge an Autoantikörpern bestimmt, und die Patientenpopulation musste einen statistisch signifikant höheren Wert an Autoantikörpern aufweisen. Das Vorhandensein von Autoantikörpern in unterschiedlichen Konzentrationen in der gesamten Bevölkerung machte es sehr schwierig, diese spezifisch unterscheidenden Antikörper zu finden. Bisher gibt es keinen spezifischen Autoantikörper, der ausschließlich zwischen gesunden Patienten und Krebspatienten unterscheidet (im Gegensatz zu Autoimmunerkrankungen, bei denen spezifische Autoantikörper nur bei Patienten in sehr hohen Konzentrationen vorkommen).

Unsere Arbeit geht davon aus, dass das Expressionsniveau spezifischer Autoantikörper bei Krebs verändert sein sollte und diese Veränderungen daher auf das Vorhandensein/Nichtvorhandensein von Krebs hinweisen können.

In diesem Versuchsprotokoll prüfen wir, ob sich die Expressionsniveaus spezifischer Autoantikörper von Frauen mit Eierstockpathologie im Vergleich zu Frauen ohne Krebs verändern.

Der CAAA-Test besteht aus einem Schritt der Blutentnahme und -verarbeitung, gefolgt vom Nachweis spezifischer Autoantikörper mit einem ELISA-basierten Test und einer mathematischen Verarbeitung, mit anschließender Klassifizierung der Ergebnisse als „positiv“ oder „negativ“ für Eierstockkrebs.

Die Studienpopulation umfasst Frauen, bei denen vor einer Krebsbehandlung eine pathologische oder zytologische Bestätigung entweder durch einen chirurgischen Eingriff (Laparoskopie/Laparotomie) oder irgendeine Art von Biopsie oder Zytologie vorgesehen ist, sowie altersentsprechende Kontrollpersonen. Der klinische Verdacht umfasst eine der folgenden Ursachen: Raumforderung/Zyste im Beckenbereich (durch Untersuchung des Beckens und/oder bildgebende Verfahren) und/oder hohe CA-125-Werte und/oder Aszites und/oder aufgrund des zufälligen Befunds einer Fernmetastasierung. Die endgültige Überprüfung („richtig positiv“ oder „richtig negativ“) erfolgt nur in Bezug auf die Pathologie-/Zytologieergebnisse oder bei gesunden Frauen in Bezug auf die klinische Vorgeschichte.

Probandenauswahl: Frauen mit Verdacht auf Eierstockkrebs (Patientinnen und Frauen ohne Krebs) – Einschlusskriterien – alle folgenden Punkte

• 18 Jahre oder älter.
• Patienten mit Verdacht auf Eierstockpathologie. Der klinische Verdacht umfasst einen der folgenden Punkte: Raumforderung/Zyste im Becken (durch Beckenuntersuchung und/oder andere bildgebende Verfahren) und/oder hohe CA-125-Werte und/oder Aszites und/oder aufgrund des zufälligen Befunds einer Fernmetastasierung . Die endgültige Analyse erfolgt ausschließlich in Bezug auf die Ergebnisse der Pathologie/Zytologie.
• Der Patient plante eine Laparotomie/Laparoskopie/Operation, idealerweise vor einer der oben genannten Maßnahmen.

Frauen mit Verdacht auf Eierstockkrebs (Patienten und Frauen ohne Krebs) – Ausschlusskriterien: eines der folgenden

• Unter 18 Jahre alt
• Hämatologische Malignome
• Bei Patienten wurden Autoimmunerkrankungen diagnostiziert.
• Frühere oder aktuelle Tumoren
• Patienten unter aktiver Chemotherapie

Patienten mit Verdacht auf Eierstockkrebs – endgültige Klassifizierung

• Die „richtig positive“ Gruppe besteht aus allen aufeinanderfolgenden Patientinnen, die die Einschlusskriterien erfüllen und aufgrund der pathologischen Ergebnisse positiv für Eierstockkrebs sind. Die „richtig negative“ Gruppe besteht aus aufeinanderfolgenden Patientinnen, die die Einschlusskriterien erfüllen und aufgrund der pathologischen Ergebnisse negativ für Eierstockkrebs sind.

Diese Studie wird auf der Teilnahme mehrerer Zentren basieren. Die Mindestanzahl der Standorte für die Studie beträgt 2.

Bei der aktuellen Studie handelt es sich um eine prospektive Einzelblind-Validierungsstudie, an der alle aufeinanderfolgenden Frauen mit Verdacht auf eine Ovarialpathologie beteiligt sind, bei denen während der Studiendauer eine Biopsie/Operation eingeplant ist, die Pathologie/Zytologie von Eierstockkrebs haben (echt positiv) und XXX Frauen mit negativer Ovarialpathologie/Zytologie Ergebnisse (richtig negativ) und gesunde Frauen. Der Zweck der Studie besteht darin, die Wirksamkeit des CAAA-Tests zu bewerten.

Die Wirksamkeit der Studie wird als Spezifität des CAAA-Tests bei einer vordefinierten Sensitivität von 95 % definiert.

Die Studie wird die Sensitivität des CAAA-Tests bewerten, um zu zeigen, dass sie nicht unter dem angegebenen Wert von 95 % liegt.

Nach aktuellen medizinischen Veröffentlichungen gehen wir davon aus, dass die Studienpopulation etwa 10–20 % tatsächlich positive Krebsfälle umfassen wird.

Bis heute wurde ein großer Teil der verdächtigen Patienten nur durch die endgültige Pathologie der Laparoskopie/Operation diagnostiziert. In dieser Studie werden die wirklich positiven und wirklich negativen Fälle (wie durch die Pathologie bestätigt) mit den CAAA-Testergebnissen verglichen.

Studienablauf: Klinische Informationen der Probanden, die aus der Krankenakte der Patientin stammen, einschließlich Alter, Krankengeschichte und Ergebnisse durchgeführter Tests, die zur diagnostischen Beurteilung von Eierstockkrebs führen, werden auf den entsprechenden, mit Strichcode versehenen Fallberichtsformularen vor der Studie aufgezeichnet. Die Berichte erfolgt elektronisch über eine spezielle und gesicherte Internetseite, alle Änderungen in der Datenbank werden aufgezeichnet und sind nachvollziehbar. Die Studie ist anonym und die Abteilung behält den Namen des Patienten, ohne ihn den Prüfärzten und dem Studiensponsor preiszugeben.

Der Arzt/die Krankenschwester/der Phlebotomiker nimmt ein Heparin-Vakuum-/Serologieröhrchen (ca. 8 ml) und beschriftet es (Strichcode). Das Blutverarbeitungslabor sammelt Serum/Plasma und das Serum wird bei -80 °C eingefroren.

ELISA-basierte Tests zum Nachweis der relativen Expressionsverhältnisse von Autoantikörpern werden für jede Probe gemäß dem Laborprotokoll durchgeführt. Die Proben werden auf ihre Reaktion auf die Antigene getestet, die in einem vorherigen Trainingssatz identifiziert wurden. Alle Daten werden dauerhaft direkt in einem speziellen Computer aufgezeichnet. Für jede Probe werden alle Antikörperergebnisse in die kodierte Patientenakte eingetragen. Ein mathematischer Algorithmus bestimmt, ob die Probe positiv oder negativ ist.

Die endgültige Pathologie wird mit den CAAA-Testergebnissen verglichen. Die Ergebnisse werden von einem Statistiker mit Erfahrung in Krebspopulationsstudien analysiert.

Bei der aktuellen Studie handelt es sich um eine blinde prospektive Validierungsstudie, an der alle aufeinanderfolgenden Probanden mit Verdacht auf Eierstockpathologie beteiligt sind, bei denen während der Studiendauer eine Biopsie/Operation/Zytologie geplant ist. Der Zweck der Studie besteht darin, die Sensitivität und Spezifität des CAAA-Tests zur Erkennung von Eierstockkrebs bei Frauen zu bewerten, bei denen eine Biopsie/Operation/Zytologie geplant ist.

Die Probanden werden gemäß den Einschluss- und Ausschlusskriterien auf eine mögliche Teilnahme an der Studie überprüft.

Die Daten umfassen Parameter des klinischen und pathologischen/zytologischen Zustands der Probanden sowie Ergebnisse des CAAA ELISA.

Es gibt zwei Ziele der Studie. Um zu testen, ob die Empfindlichkeit von CAAA nicht unter dem vordefinierten Wert liegt. Zur Bewertung der Spezifität des CAAA-Tests. Statistische Hypothese Die Hauptbedingung für die Bestimmung der Stichprobengröße ist die Validierung, dass die Sensitivität des Tests nicht unter dem vordefinierten Wert liegt. Die Klassifizierungsregel wurde so festgelegt, dass die Sensitivität in der Lehrstichprobe 100 % betrug. Wir gehen davon aus, dass die tatsächliche Empfindlichkeit nicht unter 99 % liegt.

Nullhypothese: Die Sensitivität des Tests liegt nicht über 95 %. Es muss ein Datenbankverwaltungssystem entworfen und gepflegt werden, einschließlich Bildschirmvorbereitung und Bearbeitungsprüfungsprogrammierung. In jedem Dateneingabezentrum wird eine Qualitätskontrolle der klinischen Daten vor und nach der Eingabe durchgeführt. Alle ELISA-Testergebnisse werden über eine internetbasierte Schnittstelle in die Datenbank hochgeladen und für weitere Änderungen gesperrt. Um ELISA-Testergebnisse zu ändern, ist zum Entsperren der Datenbank die Zustimmung des örtlichen CRO, des Sponsors und des Arztes vor Ort erforderlich. Die Freischaltung erfolgt ausschließlich durch den Webmaster und wird in der Komponente des Rückverfolgungssystems sowie in einer gedruckten Kopie aufgezeichnet, die sowohl vom Sponsor als auch vom CRO auf der Website aufbewahrt wird.