Besiedlungs- und Persistenzkapazität eines Multistamm-Probiotikums bei pädiatrischer Nahrungsmittelallergie gegen Milch oder Ei.

Diese Studie bewertet die Kolonisationskapazität von drei Probiotika (Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve und Bifidobacterium infantis) bei Kindern mit Milch- und/oder Eierallergie.

Es wird die Rekrutierung von etwa 20 Patienten mit Ei- und/oder Milchallergie im Alter zwischen 10 und 14 Monaten erwartet, die durch einen doppelblinden oralen Toleranztest gegen Placebo bestätigt werden (Gruppe 1).

Darüber hinaus werden etwa 10 Patienten rekrutiert, die für Milch oder Ei empfindlich sind, aber nicht durch einen doppelblinden oralen Toleranztest gegen Placebo bestätigt wurden (Gruppe 2), und etwa 10 gesunde Personen (Gruppe 3).

Für alle 40 Patienten:

1. Das Vorhandensein von Bifidobacterium longum BB536, Bifidobacterium breve M-16V und Bifidobacterium infantis M-63 zu Studienbeginn wird bewertet;

   Nur für Kinder der Gruppe 1 wird zusätzlich gewertet:

2. Das Vorhandensein derselben Stämme während 30 Tagen nach Verabreichung von Probiotika mit mehreren Stämmen, die 3,5 x 109 UFC von Bifidobacterium longum BB536, Bifidobacterium breve M-16V und Bifidobacterium infantis M-63 enthalten, und nach 60 Tagen nach Unterbrechung der Verabreichung.

Quantifizierung von B. breve, B. longum subsp. longum und B. longum subsp. infantis in Stuhlproben wurde mittels qRT-PCR unter Verwendung der Light Cycler 480-Plattform (Roche Diagnostics, Mannheim, Deutschland) durchgeführt. Die Assays wurden mit einer 20-µl-PCR-Amplifikationsmischung durchgeführt, die Folgendes enthielt: 10 µl LightCycler 480 Sonden-Master-Mix (Roche Diagnostics), 2 µl Primer und Sonden (optimierte Konzentrationen, 0,5 µM bzw. 0,1 µM), 3 µl H2O in molekularer Qualität und 5 ul DNA-Matrize. Jede Probe wurde doppelt getestet, um die Reproduzierbarkeit der Daten sicherzustellen. Das RT-PCR-Temperaturprofil bestand aus einer anfänglichen Denaturierung bei 95°C für 10 min, 45 Amplifikationszyklen bei 95°C für 10 s, 60°C für 30 s und 72°C für 1 s, gefolgt von einem abschließenden Kühlschritt bei 40°C für 30 Sek. Die absolute Quantifizierung erfolgte nach der „Second Derivative Maximum Method“

Statistische Analysen: Der Wilcoxon-Vorzeichen-Rang-Test wurde verwendet, um die Konzentrationen probiotischer Arten während des Zeitverlaufs zu vergleichen.