Die Wirkung von Curcumin auf den Leberfettgehalt bei fettleibigen Probanden

Die Prävalenz von Adipositas nimmt weltweit zu. Adipositas und die damit verbundenen Komplikationen stellen eine enorme Belastung für adipöse Personen, ihre Familien, Gesundheitssysteme und Gesellschaften dar. Die nichtalkoholische Fettlebererkrankung (NAFLD) hat sich als häufige und schwerwiegende Komplikation der Fettleibigkeit herausgestellt. Steatose, die gutartige und potenziell reversible Form der NAFLD, kann sich zu einer schwereren Form entwickeln, der nichtalkoholischen Steatohepatitis (NASH), die zu einer Fibrose und schließlich zu einer Leberzirrhose und selten zu einem hepatozellulären Karzinom führen kann. Die Mehrheit der Fettleibigen hat NAFLD. Derzeit sind keine pharmakologischen Wirkstoffe zur Vorbeugung oder Behandlung von NAFLD zugelassen, und die Gewichtsabnahme, die notorisch schwer zu erreichen (und vor allem aufrechtzuerhalten) ist, bleibt die einzige Behandlungsoption. Interessanterweise hat Curcumin, eine aus der Kurkumawurzel extrahierte Phenolverbindung, in In-vitro- und Tierstudien vielversprechende Wirkungen bei der Vorbeugung und Behandlung von NAFLD gezeigt, und die spärlichen verfügbaren Humandaten weisen in die gleiche Richtung; aber solide menschliche Daten fehlen. Diese Studie soll die Auswirkungen von Curcumin auf die Behandlung von NAFLD beim Menschen untersuchen, indem sie die Auswirkungen der Einnahme von Curcumin über 6 Wochen bei übergewichtigen Probanden mit NAFLD auf den Lipid-, Glukose- und Proteinstoffwechsel untersucht.

In dieser randomisierten, doppelblinden, placebokontrollierten Studie werden berechtigte Teilnehmer Ausgangsbewertungen unterzogen, bevor sie randomisiert werden, um zwei Kapseln Placebo zweimal täglich oder zwei Kapseln Curcumin (entsprechend 200 mg) zweimal täglich für 6 Wochen zu erhalten. Am Ende der 6-wöchigen Interventionsperioden werden Studienende-Bewertungen (ähnlich wie Baseline-Bewertungen) durchgeführt.

Informationsveranstaltung:

Vor allen protokollbezogenen Verfahren wird ein Informationstreffen im Zentrum für klinische Stoffwechselforschung des Gentofte-Krankenhauses arrangiert, und die Probanden werden über die Möglichkeit informiert, eine Person ihrer Wahl zu dem Besuch mitzubringen. Bei diesem Treffen wird ein Mitglied der Forschungsgruppe in ungestörter und vertraulicher Umgebung Zweck, Ablauf und mögliche Risiken der Studie erläutern. Der Proband wird darüber informiert, dass, wenn zusätzliche Zeit zur Bewertung der Teilnahme erforderlich ist, mindestens 24 Stunden von der mündlichen Information bis zur Zustimmung und Unterzeichnung der Einwilligungserklärung akzeptabel sind. Nach Erhalt der Einwilligungserklärung wird der Zeitpunkt des Screenings geplant. Der Proband wird darüber informiert, dass es möglich ist, die schriftliche Einwilligung jederzeit vor oder während der Studie zu widerrufen.

Screening-Besuch:

Wenn eine Person nach dem Informationstreffen der Teilnahme an der Studie zustimmt und eine mündliche und schriftliche Einwilligung nach Aufklärung eingeholt wurde, wird ein Screening-Besuch geplant. Das Subjekt wird vor dem Screening in eine 10-stündige Fastennacht über Nacht eingewiesen (einschließlich Medizin, aber Wasser kann bis 2 Stunden vor dem Screening konsumiert werden). Nach diesem Fasten treffen sich die Probanden morgens in der Abteilung. Größe und Körpergewicht werden gemessen, Medikation und Anamnese werden aufgezeichnet, Blut wird zur Beurteilung der Plasma-/Serumkonzentrationen von Thyreoidea-stimulierendem Hormon, Kreatinin, Elektrolyten, Aspartat-Aminotransferase (ASAT), Alanin-Aminotransferase (ALAT), Laktat entnommen Dehydrogenase, alkalische Phosphatase, Albumin, Bilirubin, Gamma-Glutamyltransferase, virale Hepatitis-Marker, Thrombozytenzahl, Ferritin und Hämoglobin sowie das Albumin-Kreatinin-Verhältnis im Urin werden gemessen. Es wird ein Fibro-Scan durchgeführt. Eine körperliche Untersuchung wird durchgeführt, einschließlich der Bewertung von Blutdruck und Pulsfrequenz. Die Alkoholgewohnheiten werden auf der Grundlage des Fragebogens „Alcohol Use Disorder Identification Test“ (AUDIT)76,77 und der Quantifizierung der wöchentlichen Alkoholmenge bewertet. Eine Magnetresonanz (MR)-Sicherheitscheckliste wird ausgefüllt und ein MR-Informationsblatt wird ausgehändigt. Wenn alle Einschlusskriterien und keines der Ausschlusskriterien erfüllt sind, werden die Termine für die Ausgangsbewertung und den Randomisierungsbesuch innerhalb von 6 Wochen nach dem Screening-Besuch geplant. Der Proband wird angewiesen, vom Screening bis zum Ende der Studie täglich keine Curcumin-haltigen Lebensmittel zu sich zu nehmen.

Baseline-Bewertungen und Randomisierungsbesuch:

Eingeschlossene Probanden werden einer MRS unterzogen, die so nah wie möglich am Beginn der Intervention geplant wird. Das Subjekt wird in der Abteilung für Radiologie des Herlev-Krankenhauses zusammenkommen und während des Scans in eine horizontale Position gebracht. Während der MRS wird eine Spektroskopie der Leber beurteilt und eine Schätzung des viszeralen Fettgewebes und des subkutanen Fettgewebes durchgeführt. Der Proband wird während des Scans in eine horizontale Position gebracht (Dauer: ca. 30 Minuten).

Ernährungs- und Bewegungstagebuch und standardisierte Nahrungsaufnahmezeit: Vor Beginn der Intervention und während der Woche vor dem Ende des Studienbesuchs füllt jeder Proband ein dreitägiges Ernährungs- und Bewegungstagebuch aus. Das Ernährungs- und Bewegungstagebuch wird von den Teilnehmern mithilfe eines Fragebogens manuell erfasst. An den beiden letzten Tagen vor den Testtagen werden die Teilnehmer aufgefordert, eine standardisierte Nahrungsaufnahme mit hohem Kohlenhydratgehalt einzunehmen, um die aussagekräftigste Antwort auf den oralen Glukosetoleranztest (OGTT) zu erhalten, und der Proband wird darin gründlich eingewiesen.

In der letzten Woche vor der Randomisierung wird der Proband gebeten, eine Stuhlprobe zur Bestimmung der Darmbakterienzahl und des Subtyps zu entnehmen. Der Teilnehmer erhält Probenkits bestehend aus Kühltasche, Gefrierbeutel und Stuhlprobenröhrchen. Stuhlproben werden vom Teilnehmer zu Hause gesammelt: Vor dem Stuhlgang wird ein Einwegsammler in die Toilette gestellt, von wo aus der Stuhl in ein Röhrchen umgefüllt wird, das sofort in einen Transportbehälter überführt und bei -20 °C im Patientenzimmer platziert wird Gefrierschrank. Vor dem Transport zum Krankenhaus Gentofte wird der Transportbehälter in die Kühltasche überführt und bei der Ankunft im Krankenhaus Gentofte wird der Transportbehälter (mit dem Probenröhrchen) sofort bei -80 °C für die spätere Analyse gelagert. Dies beinhaltet DNA-Extraktion, Bibliotheksvorbereitung, MiSeq 16S rRNA-Sequenzierung und Mikrobiota-Analyse (relative Häufigkeit, Alpha-/Beta-Diversität, Link zum interessierenden Phänotyp).

Beim Randomisierungsbesuch trifft sich der Proband gegen 8 Uhr morgens nach 10 Stunden Fasten (einschließlich Medikamente) und Verzicht auf Tabak- oder Nikotinpräparate im Labor. Das Subjekt darf bis 8 Stunden vor dem Treffen in der Abteilung Wasser trinken. Darüber hinaus wird der Proband aufgefordert, zwei Tage vor dem Besuch starken Alkoholkonsum und anstrengende körperliche Betätigung zu vermeiden, und wird angewiesen, nicht anstrengende Transportmittel zur Forschungseinrichtung zu verwenden. Folgende Verfahren werden durchgeführt:

1. Es wird eine Nüchternurinprobe entnommen und der Teilnehmer wird gebeten, die Blase vollständig zu entleeren. Das Urinvolumen wird gemessen.
2. Messung der Bioimpedanz.
3. Nüchternblutproben werden entnommen (genetische Marker für NASH, Biomarker für NASH und Fibrose, Fibroblasten-Wachstumsfaktoren, Triglyceride, Cholesterin, Leberparameter, Hämoglobin A1c, Entzündungsmarker, Adipokine, Hämoglobin, Kreatinin) in Höhe von 22 ml.
4. FibroScan: Der Proband liegt etwa 10 Minuten lang in Rückenlage, währenddessen eine Sonde mit Scherwellen und Ultraschall auf der rechten Körperseite unterhalb der Rippen angebracht wird
5. Messung von Blutdruck, Pulsfrequenz, Körpergewicht sowie Hüft- und Taillenumfang
6. Eine Kanüle wird zur Entnahme von Blutproben in die Kubitalvene eingeführt; der blutabnehmende Unterarm wird während des Versuchs in eine Heizdecke (42°C) eingewickelt (zur Arterialisierung des venösen Blutes)
7. Blutproben werden gemäß Tabelle 1 unten entnommen (Gesamtaminosäuren, Darmhormone, Glucose, Glucagon, Insulin, C-Peptid, Harnstoff, freie Fettsäuren)
8. Zum Zeitpunkt 0 min nimmt das Subjekt 75 g wasserfreie Glucose, gelöst in 300 ml Wasser, über einen Zeitraum von 5 min ein
9. Zu den Zeitpunkten 0, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210 und 240 min werden Hunger, Sättigung, Völlegefühl und voraussichtliche Nahrungsaufnahme durch visuelle Analogskalen (VASs) gemessen. (siehe Anlage 5 „VAS“).
10. Während der letzten Stunde (~180 min - ~240 min) wird der Ruheenergieumsatz (REE) in Rückenlage durch indirekte Kalorimetrie gemessen, um den Sauerstoffverbrauch (V02) und die Kohlendioxidproduktion (VC02) zu bestimmen. Es wird ein Flow-Through-Canopy-Gasanalysator verwendet.
11. Zum Zeitpunkt ~240 min wird die Testperson gebeten, eine neue Urinprobe zur Messung der Harnstoffkonzentration bereitzustellen. Der Teilnehmer wird gebeten, die Blase vollständig zu entleeren. Das Urinvolumen wird gemessen.
12. Zum Zeitpunkt 250 min nimmt die Testperson eine standardisierte Mahlzeit ad libitum zu sich, die aus Hackfleisch, Nudeln, Mais, Karotten, Paprika, Sahne, Salz und Pfeffer besteht (50 Energie (E) % Kohlenhydrate, 37 E % Fett, 13 E % Protein ); das Subjekt wird angewiesen, so viel wie möglich zu essen, bis es sich angenehm gesättigt fühlt; Die Mahlzeit sollte innerhalb von maximal 30 Minuten verzehrt werden, und am Ende der Mahlzeit werden die mit dem Essen verbrachte Zeit, das Gewicht der Mahlzeit und die verbrauchte Gesamtenergiemenge notiert. Zusätzlich bewerteten die Teilnehmer das Aussehen, den Geruch, den Geschmack, den Beigeschmack und den Gesamteindruck der ad libitum-Mahlzeit auf VAS-Scores während der ad libitum-Mahlzeit. 10 Minuten nach Beendigung der Mahlzeitenaufnahme wird der letzte Fragebogen zu Hunger, Sättigung, Völlegefühl und voraussichtlicher Nahrungsaufnahme mittels visueller Analogskalen gemessen.

Die Interventionsperiode:

Die Intervention beginnt kurz nach dem Randomisierungsbesuch und der ersten MRS. Während des gesamten Interventionszeitraums füllt jeder Proband ein Tagebuch aus, um neue Begleitmedikationen, Compliance und mögliche Nebenwirkungen zu verfolgen. Jeder Proband nimmt 42 Tage lang (±3 Tage) jeden Morgen und jeden Abend entweder zwei Kapseln Meriva® oder zwei Placebo-Kapseln mit einem kleinen Glas Wasser ein, vorzugsweise in Verbindung mit einer Mahlzeit. Sollte der Proband vergessen/verpassen, eine Dosis einzunehmen, kann diese bis 6 Stunden vor der nächsten geplanten Dosis eingenommen werden. Wenn der Proband eine Dosis vergisst/vergisst und die nächste geplante Dosis innerhalb der nächsten 6 Stunden erfolgt, sollte die Dosis weitergegeben werden, und der Proband muss den Vorfall im Tagebuch vermerken. Die Probanden werden freundlich gebeten, die Alkohol- und Rauchgewohnheiten beizubehalten, die sie möglicherweise vor dem Screening hatten, und daher nicht mehr als 21 Einheiten Alkohol pro Woche zu konsumieren. Darüber hinaus ist es nicht erlaubt, mehr als 5 Einheiten in einer Nacht zu konsumieren oder bis zum Ende der Studie täglich Curcumin-haltige Lebensmittel zu sich zu nehmen. In der Mitte des Interventionszeitraums erhält der Proband einen Telefonanruf vom Prüfarzt oder einem anderen delegierten Standortpersonal, um unerwünschte Ereignisse, begleitende Medikation und Compliance zu überprüfen und alle Fragen des Probanden zu beantworten.

In der letzten Interventionswoche werden die Teilnehmer erneut gebeten, Fragebögen zu Nahrungsaufnahme und körperlicher Aktivität auszufüllen. Beginnend zwei Tage vor dem Besuch am Ende der Studie muss die Testperson noch einmal zwei Tage lang eine standardisierte Nahrungsaufnahme einhalten.

Prüfungen am Ende der Studie und Besuch:

Der Besuch am Ende der Studie wird 42 ± 3 Tage nach Beginn der Intervention geplant. Innerhalb einer Woche vor dem Besuch am Ende der Studie wird die Entnahme von Stuhlproben geplant und durchgeführt, wie oben unter „Ausgangsbeurteilungen und Randomisierungsbesuch“ beschrieben, und die MRS wird so nah wie möglich am Ende des Studienbesuchs bewertet. Die Verfahren während des Besuchs am Ende der Studie ähneln denen, die oben unter „Ausgangsbeurteilungen und Randomisierungsbesuch“ beschrieben wurden. Außerdem wird an diesem Tag eine körperliche Untersuchung durch einen Arzt des Forschungsteams durchgeführt, um die Auswirkungen der Curcumin-Intervention zu überprüfen, und es werden zusätzliche Blutproben (identisch mit den Proben beim Screening-Besuch, mit Ausnahme von viralen Hepatitis-Markern) entnommen ( was weitere 5 ml Blutproben im Vergleich zum Randomisierungsbesuch hinzufügt) und das Albumin-Kreatinin-Verhältnis im Urin werden gemessen.