Fäkale Mikrobiota-Transplantation als therapeutische Strategie für HIV-infizierte Patienten

Studiendesign: Prospektive kontrollierte Studie experimentell vergleichend Studiendauer: 1 Jahr Anzahl der aufzunehmenden Patienten: 20 Patienten. Nach der Randomisierung werden ausgewählte Patienten, die die Ein- und Ausschlusskriterien erfüllen, 1:1 in zwei Gruppen eingeteilt. Eine Gruppe beginnt die Behandlung mit FMT durch gefrorene Kapseln und gleichzeitig mit ART; und eine andere Gruppe wird Placebo-Kapseln und ART hervorheben.

Die gefrorenen Kapseln werden 7 Tage vor Beginn der ART und in den Wochen 0, 4, 8 und 12 nach Beginn der ART in einer Häufigkeit von 15 Kapseln alle 12 Stunden für vier Dosen oral eingenommen. Jede Kapsel muss über einen Zeitraum von nicht mehr als 1 Stunde der vorderen Kapsel eingenommen werden.

Anschließend erfolgt eine Blutentnahme durch periphere Venenpunktion mit Entnahme von 10 ml venösem Blut zur Überwachung des Immunstatus mit CD4-T-Lymphozyten und HIV-Viruslast. In den Wochen 4, 8, 12 und 24 nach ART-Beginn werden insgesamt 4 Blutproben entnommen.

Ärztliche Konsultationen werden alle 4 Wochen an den Tagen -7 Tage vor ART-Beginn, Tag 1, 30, 60, 90 und 120 durchgeführt, bei denen Vitalzeichen, Symptome oder Anzeichen von Organsystemen, Bestimmung von Gewicht, BMI, Nebenwirkungen und Ausschlusskriterien erhoben werden wird bewertet.

Darüber hinaus werden Kotproben von jedem Patienten während der ärztlichen Konsultation in Woche 0, 8 und 24 nach Beginn der ART entnommen, um die Veränderung des Darmmikrobioms nach dem Eingriff bei beiden Gruppen zu bewerten.

Während des Studienzeitraums können die Probanden eine kostenlose Diät, einen moderaten Alkoholkonsum und ihre täglichen Aktivitäten durchführen, da sie frei von einem der Ausschlusskriterien sind.

Die Studie dauert 1 Jahr und die entnommenen Proben werden eingefroren und in der Abteilung für Infektionskrankheiten des Krankenhauses gelagert.

Auswahl von fäkalen Mikrobiota-Spendern:

Die Auswahl der fäkalen Mikrobiota-Spender basiert auf:

• Krankengeschichte, Körpergewicht, keine Medikamenteneinnahmen wie Antibiotika und Protonenpumpenhemmer, keine Reisen und kein Durchfall 6 Monate vor der Spende.
• Das Fehlen chronischer Infektionen wie Hepatitis B, Hepatitis C und HIV, bestimmt durch Immunoassay.
• Negativer Rose-Bengal-Test und V.D.R.L
• Normales vollständiges Blutbild und Leberfunktionstests.

Kotprobenanalyse:

1. Frische mikroskopische Analyse zum Nachweis von Leukozyten und Parasiten (einschließlich Protozoen und Helminthen)
2. Stuhlkultur zum Ausschluss von Enteropathogenen, einschließlich Salmonella spp., Shigella spp., Aeromonas spp., Plesiomonas spp., Vibrio spp. und Clostridioden diffcile.

3. Gastrointestinal-Panel durch multiple Polymerase-Kettenreaktion (PCR) unter Verwendung von BioFire Filmarray, das den Nachweis von:

   Bakterien: Campylobacter (C. jejuni, C. coi, C. upsaliensis), Clostridiodes difficile (Toxine A/B), Plesiomonas shigelloides, Salmonella spp., Yersinia enterocolitica, Vibrio (V. parahaemolytic , V. vulnificus und V. cholerae), Escherichia coli O157: H7, enteroaggregative E. coli (EAEC), enteropathogene E. coli (EPEC), enterotoxigene E. coli (ETEC), Shigatoxin produzierende E. coli (STEC) stx1/stx2, Shigella sp. enteroinvasive E. coli (EIEC).

   Virus: Adenovirus F 40/41, Astrovirus, Norovirus GI/GII, Rotavirus A, Sapovirus (I, II, IV und V) Parasiten: Cryptosporidium sp., Cyclospora cayetanensis, Entamoeba histolytica und Giardia lamblia.

4. Nachweis von Genen, die mit Arzneimittelresistenz assoziiert sind, durch Endpunkt-PCR; einschließlich Gene, die Beta-Laktamasen mit erweitertem Spektrum (TEM, CTX; SHV, CMY) und Carbapenemasen (VIM, NDM, IMP, KPC, OXA-48) codieren.

Sobald alle Phasen der Bewertung abgeschlossen sind, werden nur Personen als Spender ausgewählt, bei denen alle Tests negativ ausgefallen sind und bei denen keine Anzeichen einer Infektion vorliegen. Die Kontroll- und Labortests gelten für die folgenden 4 Wochen als gültig, sodass bei einer erneuten Stuhlspende der Vorgang erneut durchgeführt wird.

Probenvorbereitung fäkale Mikrobiota Alle Proben werden mit 10 % Glycerin gemischt und bei -70 °C in einem Zeitraum von nicht mehr als 60 Minuten nach der Entnahme eingefroren. Sie werden gemischt und dann in Kochsalzlösung 0,9 % suspendiert. Die endgültige Mischung wird filtriert, um Partikel mit einer Größe von mehr als 330 Mikron zu entfernen, und schließlich wird Glycerin als Kryoschutzmittel hinzugefügt. Diese Mischung wird unter Verwendung von sterilen Kapseln zur enteralen Freisetzung in zwei Größen zum Verkapselungsprozess transportiert. Die erste Kapsel wird mit einer Kotmischung gefüllt und mit ihrem Gegenstück versiegelt, und dann wird die versiegelte Kapsel in einer zweiten Kapsel eingekapselt. Das Endprodukt wird bis 60 Minuten vor der Verwendung gefroren gelagert. Die Verwaltung erfolgt ausschließlich mündlich.