Infección por paludismo diagnosticada mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) como medio para evaluar las vacunas candidatas contra el paludismo preeritrocíticas

Objetivo

El objetivo principal del estudio fue determinar si la técnica de PCR muy sensible, capaz de detectar parásitos de la malaria a bajas densidades, podría usarse como un método económico para realizar una evaluación preliminar de campo de las vacunas contra la malaria preeritrocítica. Un objetivo secundario fue determinar si el muestreo intensivo de sangre que requiere este método sería aceptable.

Área de estudio

Este estudio se realizó entre junio y octubre de 2004, cuando la incidencia de paludismo en Gambia es más alta. Se reclutaron voluntarios de 9 aldeas al este de Farafenni, una ciudad que se encuentra a 200 km al este de la capital, Banjul. La malaria es altamente estacional en esta zona con una tasa de inoculación entomológica de entre 10 y 50 picaduras infecciosas por año.

Población de estudio

Voluntarios sanos de entre 15 y 45 años fueron evaluados en dos centros para determinar su elegibilidad para participar en el estudio. El cribado implicó un examen físico completo, así como análisis de muestras de sangre para pruebas hematológicas (hemograma completo, volumen de células empaquetadas [PCV]), renales (nivel de creatinina plasmática) y hepáticas (alanina aminotransferasa) y para pruebas de VIH 1 y 2 por ELISA. . Se llevó a cabo una prueba de deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PD) debido al riesgo que implica la administración de los fármacos del estudio Primaquina y Lapdap a voluntarios con deficiencia de G6PD. Los criterios de exclusión incluyeron PCV < 30%, creatinina plasmática elevada (> 130 micromoles/litro) o niveles de ALT (> 42 UI/litro), deficiencia de G6PD, participación simultánea en otro ensayo clínico, transfusión de sangre en el mes anterior a la vacunación, vacunación experimental contra la malaria, administración de otra vacuna dentro de las 2 semanas posteriores a la vacunación, alergia a cualquier vacunación previa o a la sulfadoxina/pirimetamina, antecedentes de esplenectomía y cualquier tratamiento con fármacos inmunosupresores.

Procedimiento de estudio

Los voluntarios elegibles se inscribieron en el estudio después de obtener el consentimiento informado por escrito. Todos los voluntarios elegibles recibieron un número único y una tarjeta de identificación con fotografía. Los voluntarios fueron asignados al azar en tres grupos para recibir dos dosis de 5 x 10 ^ 7 ufp de FP9 ME-TRAP seguidas de una dosis única de 1 x 10 ^ 8 ufp MVA ME-TRAP (grupo de vacuna contra la malaria) o 3 dosis de vacuna contra la rabia ( Fansidar y grupos de rabia). Todas las vacunas se administraron con 4 semanas de diferencia y se administraron por vía intradérmica. Después de la vacunación, se observó a todos los voluntarios durante 1 hora y se les administró un ciclo de antipiréticos (paracetamol) para tomar si era necesario. Además, los trabajadores de campo realizaron visitas domiciliarias los días 1, 2, 7 y 28 después de cada vacunación para registrar los eventos adversos utilizando una tarjeta de diario estándar. Todos los voluntarios recibieron una dosis única de primaquina (30 mg) 7 días antes de la dosis final de vacunación como cura radical para los gametocitos y un ciclo de 3 días de los medicamentos antipalúdicos de acción corta, Lapdap y Artesunato en combinación a partir del día de la vacunación final. vacunación para eliminar cualquier forma asexual del parásito antes del período de seguimiento. Además, los voluntarios del grupo Fansidar recibieron el fármaco antipalúdico de acción prolongada y se esperaba que siguieran siendo PCR negativos durante todo el período de seguimiento. Los voluntarios fueron seguidos intensivamente durante 28 días comenzando 7 días después de la última vacunación. El período de seguimiento se programó para que se correspondiera con el período de alta transmisión de malaria. El seguimiento se realizó mediante pinchazos diarios en los dedos para obtener 0,5 ml de sangre en un microtainer para el análisis de PCR y un frotis de sangre duplicado para la estimación de los parásitos de la malaria. El personal de laboratorio que realizó inmunoensayos y análisis de PCR desconocía la asignación de grupos de voluntarios hasta después de la aprobación del plan de análisis por parte de la Junta de Monitoreo de Seguridad de Datos (DSMB).

Tamaño de la muestra

Sobre la base de consideraciones prácticas y estadísticas, los investigadores propusieron inscribir a 40 voluntarios por grupo (un total de 120). Teniendo en cuenta una tasa constante de abandono durante el seguimiento que asciende a un total del 20 % de los sujetos al final del ensayo, el ensayo tiene al menos un 80 % de potencia para detectar una diferencia en el tiempo hasta la infección entre los grupos de la vacuna contra la malaria y la rabia , si la eficacia de la vacuna es al menos del 60 %, y al menos el 70 % de los voluntarios del grupo de control desarrollan parasitemia detectada durante el ensayo.

Tablero de monitoreo de seguridad de datos (DSMB)

Se creó un DSMB para supervisar la realización del ensayo y aprobar el plan analítico antes de desenmascarar al personal del laboratorio. El ensayo se llevó a cabo de acuerdo con las directrices de Buenas Prácticas Clínicas de la ICH y se guió por las normas del Consejo de Investigación Médica para la realización de ensayos clínicos.