Búsqueda de biomarcadores relacionados con el cáncer de hígado

Líneas celulares Las líneas celulares Hep3B y Huh7 HCC se cultivarán en (medio Eagle modificado de Dulbecco) DMEM que contiene suero de ternera fetal al 10 % y se incubarán a 37 °C en un incubador con CO2 al 5 %. La razón de utilizar una línea celular de CHC en lugar de muestras clínicas de CHC es que los tejidos de CHC son heterogéneos y pueden contener algunas células que no son CHC. La célula se recolectará cuando las células alcancen el 95 % de confluencia.

Recolección de sueros 20 ml de sangre venosa Se recogieron 20 ml de sangre venosa de 20 pacientes con CHC relacionado con el VHB y 20 con CHC relacionado con el VHC antes del tratamiento. La sangre venosa se dejó coagular, se centrifugó a 800 g durante 5 min y el suero se dividió en alícuotas y se almacenó a -80 ºC. Se obtuvieron sueros de control de 20 portadores de HBV sin CHC, 20 pacientes con hepatitis C crónica sin CHC y 10 sujetos normales sin enfermedades hepáticas.

Se realizará electroforesis en gel bidimensional utilizando sueros de pacientes para inmunotransferencia. Los puntos de interés se identificarán mediante ionización por desorción láser asistida por matriz de extracción retardada.