Base molecular de las interacciones de fagocitos humanos con patógenos bacterianos

Las células fagocíticas humanas, como los leucocitos polimorfonucleares (PMN), se movilizan fácilmente a los sitios de infección e ingieren microorganismos mediante un proceso conocido como fagocitosis. Los efectos combinados de las especies reactivas de oxígeno (ROS) y los péptidos proteolíticos y las enzimas liberadas para formar fagosomas bacterianos matan a la mayoría de las bacterias ingeridas. Sin embargo, muchos patógenos bacterianos humanos han ideado medios para subvertir las respuestas fagocitarias normales y la respuesta inmunitaria innata y causar enfermedades graves.

El objetivo general de este estudio es dilucidar las características específicas de las interacciones patógeno-fagocito que subyacen a la evasión de la respuesta inmunitaria innata o que contribuyen a la fisiopatología de enfermedades o trastornos inflamatorios. Por lo tanto, los proyectos específicos:

1. Identificar y caracterizar los mecanismos específicos utilizados por los microorganismos patógenos para evadir o subvertir las respuestas normales de los fagocitos y, por lo tanto, causar enfermedades.
2. Investigar los mecanismos de respuesta de los fagocitos a microorganismos patógenos específicos.
3. Identificar estructuras bacterianas específicas y/o productos (génicos) que dictan diferencias en las respuestas de los fagocitos entre una variedad de patógenos para que se puedan hacer declaraciones generalizadas sobre la fisiopatología de los estados de enfermedad.

Los estudios se realizarán utilizando múltiples técnicas que incluyen equipos de última generación para estrategias genómicas y proteómicas para identificar genes/proteínas bacterianas diana de interés o aquellas reguladas al alza en los fagocitos. Las interacciones entre fagocitos y patógenos se examinarán utilizando ensayos en tiempo real basados ​​en fluorescencia y microscopía de video, microscopía confocal y electrónica en combinación con ensayos enzimáticos para la producción de ROS, bioquímica de rutina, inmunología y biología celular.

La implementación de estos estudios requerirá el aislamiento de leucocitos fagocíticos de la sangre venosa de voluntarios humanos sanos. La población del estudio será exhaustiva, excepto en ciertos casos en los que los individuos posean defectos genéticos que afecten la función fagocitaria (p. ej., deficiencia de mieloperoxidasa) o tengan una función fagocitaria alterada debido a influencias externas, como una infección viral o bacteriana reciente.

Es probable que los estudios propuestos proporcionen nueva información pertinente para comprender las interacciones entre la célula huésped y el patógeno y la fisiopatología de las afecciones inflamatorias....