Exenatida (Byetta ®) Regulación de la producción de partículas de lipoproteínas intestinales y hepáticas en humanos

Los sujetos recibirán una infusión de acetato enriquecido con isótopos estables, leucina y un bolo de glicerol para medir las tasas de síntesis de ácidos grasos, apolipoproteína y triglicéridos, respectivamente. Esta metodología de enriquecimiento de isótopos estables in vivo ha sido ampliamente establecida y utilizada por investigadores de todo el mundo durante más de 30 años para examinar el metabolismo de varios metabolitos en humanos.

Después de un ayuno nocturno, aproximadamente a las 9 am del día 1 del estudio, el sujeto será ingresado en el hospital y se le extraerá una muestra de sangre en ayunas de 30 ml para el análisis de glucosa plasmática, colesterol plasmático total, colesterol LDL, colesterol HDL, triglicéridos (TG ), ácidos grasos libres (FFA), insulina, GLP-1, hormona de crecimiento, glucagón, enriquecimiento de isótopos estables y un análisis más detallado de la composición de lipoproteínas ricas en triglicéridos (TRL) (contenido de lípidos y apolipoproteínas). Se insertará una sonda de alimentación de polivinilo radiopaca (Entriflex NG Tube 55'' [140cm] 10fr Item # 8884721055, Kendall Products, Tyco Healthcare, Toronto, ON) a través de la nariz hasta el estómago, con suficiente longitud para la migración del punta en el duodeno. Al sujeto se le administrarán 10 mg de metoclopramida por vía oral para facilitar el transporte de la punta del tubo al duodeno. Al sujeto se le permitirá comer comidas regulares durante el día, pero ayunará durante la noche después de las 7:00 p. m. y permanecerá en ayunas durante la duración del estudio. Se permitirá el agua ad lib. Aproximadamente a las 3:00 p. m. del día 1, una radiografía abdominal confirmará la posición del tubo en el duodeno. A las 4:00 p. m., se insertarán 2 vías intravenosas en una vena superficial de cada antebrazo, una para infusión y otra para muestreo. Una infusión de acetato 1-13C (15 g en una bolsa de solución salina ½ N a 32 ml/h) comenzará después de que se hayan insertado las vías intravenosas y se infundirá durante el resto del estudio, que es de 27 horas.

A partir de las 4 a. m., se infundirá una emulsión de triglicéridos sintéticos, Intralipid (solución al 20 %, Baxter Canada), a través de la sonda de alimentación en el duodeno a una velocidad de 40 ml/h durante la duración del experimento (es decir, hasta las 7 p. m. de esa noche). Esto proporcionará un estado de alimentación estable para la posterior evaluación de la cinética de recambio de lipoproteínas.

Los sujetos recibirán, en orden aleatorio, 10 mg de exenatida o un volumen equivalente de solución salina por vía subcutánea a las 7 a. m. del día 2 de la hospitalización (es decir, a las -2 h) durante el primero de los dos estudios. El pinzamiento pancreático comenzará a las 7 a. m. (-2 h), inmediatamente después de la administración de exenatida o solución salina y continuará durante las siguientes 12 horas (hasta las 7 p. m.). . Durante el pinzamiento pancreático, los sujetos recibirán una infusión iv de glucagón (0,65 ng/kg/min), hormona del crecimiento (Humatrope, 3,0 ng/kg/min), somatostatina (sandostatin, 25 µg/h) e insulina (Novolin R, 0,05 mU/kg/min).

A las 9 am (nos referiremos a este punto de tiempo como 0hr del estudio de renovación de lipoproteínas), comenzará el estudio de renovación de lipoproteínas. Se administrará un bolo intravenoso de glicerol deuterado (d5-glicerol, 75 mmol/kg), seguido de una infusión constante cebada de leucina deuterada; d3-leucina, (bolo de 10 mmol/kg seguido de 10 mmol/kg/h durante 10 horas). Las muestras de sangre se recogerán antes ya intervalos de tiempo regulares durante 10 horas después del bolo iv de d3-glicerol y el comienzo de la infusión constante de d3-leucina (para evaluar la cinética de las lipoproteínas). Las muestras de sangre se recolectarán antes de (30 ml a -2 h, 10 ml a -1 h y 30 ml a las 0 h) y 5 min y 15 min (10 ml cada uno) y luego 30 ml cada uno a los 30 min, 1 h, 2 h, 3 h, 4 h, 5 h, 6 h (solo 10 ml), 7 h, 8 h, 9 h y 10 h después de la administración de d5-glicerol y el inicio de la infusión de d3-leucina.