Susceptibilidad de la membrana eritrocitaria aislada al estrés fotooxidativo en la enfermedad de Alzheimer

La hipótesis del estudio es que la elevada peroxidación lipídica y la disminución de las defensas antioxidantes caracterizan la historia natural de la enfermedad de Alzheimer.

Se evaluará la liberación de malondialdehído (MDA) a partir de fantasmas de eritrocitos fotooxidados ex-vivo, a través de un procedimiento de laboratorio muy fácil y conveniente para la preparación de muestras de membranas de eritrocitos.

Las membranas de glóbulos rojos aisladas y purificadas se expondrán in vitro al estrés oxidativo por radiación UV-B. La extensión del daño de la membrana celular se cuantificará mediante la determinación fluorométrica de MDA.

La inducción del estrés oxidativo a través de los rayos ultravioleta, a diferencia del obtenido por los agentes oxidantes químicos, es totalmente controlable, ya que produce efectos únicamente durante la irradiación. Además, el uso de membranas de eritrocitos aisladas permite una mayor especificidad en la evaluación de la MDA producida y reduce la cantidad de sangre necesaria para el ensayo.

Una porción de la muestra de sangre (500 µL) se enviará al laboratorio de Lipinutragen (spin-off del CNR- Centro Nacional de Investigación de Bolonia, Italia) donde se realizará un análisis lipidómico de la membrana de eritrocitos para la caracterización de los fosfolípidos de membrana, con el fin de determinar los diferentes componentes lipídicos (ácidos grasos saturados, monoinsaturados y poliinsaturados, ácidos grasos trans), cada uno caracterizado por una reactividad oxidativa diferente.

Artículos publicados recientemente mostraron una sorprendente asociación entre la excreción urinaria de cortisol y el aumento de algunos marcadores de daño oxidativo de ADN y ARN (en humanos). Este hallazgo proporciona un mayor apoyo a la idea de que el estrés psicológico crónico, asociado a la hipercortisolemia, puede conducir a una aceleración del proceso de envejecimiento.

El cerebro es un objetivo principal de los efectos de los glucocorticoides (CCS). Las consecuencias nocivas del cortisol sobre el hipocampo (una de las primeras áreas del cerebro afectadas por la enfermedad de Alzheimer) son bien conocidas. Algunos estudios mostraron correlaciones inversas entre los niveles de cortisol y el rendimiento neuropsicológico en pacientes con depresión, demencia así como en personas tratadas crónicamente con CCS.

La enfermedad de Alzheimer se asocia con estados de hipercortisolismo. No obstante, hasta el momento no se ha estudiado su correlación con el nivel de estrés oxidativo. Investigaremos la relación entre la excreción de 24h de cortisol urinario y el nivel de malondialdehído, producido por membranas de glóbulos rojos aislados y purificados, expuestos in vitro al estrés oxidativo por radiación UV-B.