ARNm de E6/E7 del VPH versus ADN del VPH como clasificación para la detección del cáncer de cuello uterino (PODBT)

OBJETIVO: Desarrollar y estandarizar una metodología o algoritmo rentable para el ARNm E6/E7 para los genotipos 16, 18, 31, 33 y 45 del VPH en comparación con los ensayos disponibles comercialmente que se pueden incorporar para clasificar el exceso de falsos positivos de la detección primaria de cánceres de cuello uterino .

Objetivos:

1. Desarrollo y estandarización de metodología/algoritmo para la prueba de ARNm E6/E7 para los genotipos de VPH 16, 18, 31, 33 y 45 mediante RT-PCR en tiempo real, en muestras de cuello uterino.
2. Comparar el rendimiento de la prueba de este ensayo de ARNm de E6/E7 del VPH con el ADN del VPH mediante HC 2 como prueba de detección secundaria, con el estándar de referencia de colposcopia con biopsia, para clasificar a las mujeres que dieron positivo en la detección primaria mediante IVAA, en una detección basada en la población para cáncer de cuello uterino.
3. Determinar el número de falsos positivos en la prueba de detección primaria después de probar los positivos de IVAA con una prueba de detección secundaria conocida de alta especificidad (HPV-DNA HC II) en comparación con la prueba de ARNm de E6/E7 de VPH.

Población de estudio: Las mujeres en el grupo de edad de 30 a 65 años, que den positivo en la prueba de detección cervical primaria VIA, se inscribirán para las pruebas de diagnóstico propuestas junto con el estándar de referencia de colposcopia con biopsia guiada.

Sitio del estudio: Las mujeres que dieron positivo en la prueba de detección primaria VIA con referencias para más pruebas de diagnóstico en TMH se inscribirán en el estudio para las pruebas de diagnóstico propuestas junto con la prueba de referencia en el centro de atención terciaria, Departamento de Oncología Preventiva, Tata Memorial Hospital en Mumbai.

Tamaño de la muestra Para detectar diferencias estadísticamente significativas en las características de la prueba con límites de confianza del 95 %, potencia estadística del 80 % y alfa = 0,05, necesitamos tener alrededor de 180 casos de neolplasia intraepitelial cervical en el estudio.

Con una prevalencia demostrada de alrededor del 2 % para la detección de lesiones CIN de alto grado en nuestros programas de detección de cáncer de cuello uterino basados ​​en la comunidad urbana y rural, necesitamos inscribir a unas 9000 mujeres en la detección de cáncer de cuello uterino basada en la población, para obtener 180 casos de neolplasia intraepitelial cervical.

Metodología:

Se reclutarán en el estudio mujeres en el grupo de edad de 30 a 65 años que se sometan a exámenes de detección de cáncer de cuello uterino de rutina a través del hospital (clínica de detección de oncología preventiva) y programas de detección basados ​​​​en la comunidad con resultados anormales utilizando la prueba primaria de detección de cáncer de cuello uterino VIA. La prueba de detección primaria VIA se administrará mediante la aplicación de ácido acético al 5 % en el cuello uterino y la visualización del cuello uterino con la ayuda de una lámpara de foco halógeno. La IVAA se considerará positiva si se visualizan lesiones acetoblancas definidas cerca de la unión escamocolumnar.

Los criterios para una prueba de IVAA positiva se presentan a continuación:

Prueba IVAA positiva:

1. Lesiones acetoblancas opacas, densas, sin brillo, definidas, bien definidas, que tocan la unión escamocolumnar o cerca del orificio externo.
2. Áreas acetoblancas sorprendentemente densas en el epitelio cilíndrico.
3. Condiloma y leucoplasia que ocurren más cerca de la unión escamocolumnar y se tornan intensamente blancas después de la aplicación de ácido acético.
4. Crecimiento en el cuello uterino que se vuelve acetoblanco.

Las mujeres evaluadas que obtengan un resultado positivo en la prueba de detección primaria VIA serán elegibles para el reclutamiento en el estudio. Las mujeres con resultados positivos de los programas comunitarios de detección serán remitidas a TMH (clínica de detección de oncología preventiva) para una verificación de diagnóstico adicional.

Reclutamiento de participantes

Los participantes del estudio serán reclutados del hospital (clínica de detección de oncología preventiva) y programas de detección basados ​​​​en la comunidad en Mumbai. Los trabajadores sociales médicos explicarán los detalles y el propósito del estudio a los participantes que asistan a la clínica de detección. Las mujeres aparentemente saludables en el grupo de edad de 30 a 65 años con un útero intacto y sin antecedentes de neoplasia cervical serán elegibles para participar en el programa. Si cumplen con los criterios de inclusión indicados anteriormente, se obtendrá un consentimiento informado por escrito en el idioma vernáculo (ya sea hindi o marathi) de la participante y se asignará un número único de identificación de participante a las mujeres elegibles. Luego se recopilará información sobre variables sociodemográficas y reproductivas mediante un cuestionario detallado.

Los datos demográficos, reproductivos y de historial sexual se registrarán en la selección después del consentimiento informado.

A las mujeres con resultados positivos se les realizarán pruebas para detectar la presencia de tipos de VPH oncogénicos mediante captura híbrida-II (HC-II) y pruebas de ARNm de VPH E6/E7 como prueba de diagnóstico. Además de las dos pruebas anteriores, todas las mujeres con resultados positivos también recibirán colposcopia con biopsia cervical guiada, la prueba estándar de oro de referencia.

La colposcopia será realizada por médicos capacitados y se anotará la impresión de la colposcopia junto con una biopsia con sacabocados del área acetoblanca del cuello uterino detectada por la prueba de detección primaria VIA. Las muestras de biopsia se fijarán en formalina al 10 % y el laboratorio de patología del Tata Memorial Centre las procesará y notificará.

El estándar de referencia para el estado final de la enfermedad será la histología.

Asesoramiento posterior a la prueba:

Al final de todos los procedimientos de prueba, el médico y el trabajador social médico brindarán asesoramiento posterior a la prueba para explicar la importancia y los resultados de los procedimientos de prueba realizados. Se explicará a las mujeres la importancia de la visita de seguimiento para comprender los resultados del VPH/ARNm E6/E7 y la biopsia de cuello uterino.

Seguimiento y Tratamiento:

Se proporcionará tratamiento para infecciones oportunistas y del tracto reproductivo (ITR). Se recomendará a las mujeres con lesiones de alto grado (precánceres de cuello uterino) HSIL que busquen tratamiento con crioterapia o LEEP (procedimiento de escisión electroquirúrgica con asa) o conización con bisturí frío en el Tata Memorial Center Mumbai.

Período total del proyecto: tres años:

Presentación de propuestas, capacitación, reclutamiento de participantes, recopilación y análisis de datos, incluido el seguimiento de casos al final del período de inscripción