Esta página se tradujo automáticamente y no se garantiza la precisión de la traducción. por favor refiérase a versión inglesa para un texto fuente.

Perfil proteómico del trombo coronario en el infarto agudo de miocardio

16 de abril de 2019 actualizado por: Marco Zimarino, G. d'Annunzio University

Perfiles proteómicos y lipidómicos del trombo coronario en el infarto agudo de miocardio

El infarto de miocardio con elevación del segmento ST (IAMCEST) es causado principalmente por la ruptura o la erosión de una placa aterosclerótica vulnerable, que se inicia con una trombosis intraluminal y da como resultado la oclusión total de la arteria coronaria. La formación de trombos es un proceso complejo y dinámico que involucra el flujo, las células sanguíneas y varias proteínas plasmáticas, y no se ha dilucidado claramente. Definir -a través de un enfoque proteómico- la composición del trombo oclusivo y sus cambios en el tiempo en pacientes con IAMCEST, tratando de identificar nuevos biomarcadores de trombosis coronaria.

Descripción general del estudio

Descripción detallada

La cardiopatía isquémica es el principal contribuyente a la carga mundial de morbilidad, según se evalúa sobre la base de los años de vida ajustados por discapacidad.

El infarto de miocardio con elevación del ST (IAMCEST) se asocia con una trombosis coronaria oclusiva en el 90 % de los pacientes, el infarto de miocardio sin elevación del ST (IAMSEST) solo en el 26 % de los casos. A este respecto, se presta cada vez más atención a la composición del trombo coronario. En el IAMCEST agudo, el contenido de plaquetas y fibrina en el trombo oclusivo depende en gran medida del tiempo de isquemia, por lo que se puede inferir que esto puede tener un impacto sustancial en la eficacia de los fármacos o dispositivos utilizados para la reperfusión coronaria.

Entre varios tipos de células circulantes (plaquetas, eritrocitos, monocitos y neutrófilos), así como moléculas plasmáticas que modulan el proceso de trombosis, las plaquetas constituyen el principal componente celular del trombo y su activación es esencial para su formación. Aunque el papel de las plaquetas en la trombosis ha sido profundamente caracterizado, los mecanismos moleculares que subyacen a la activación plaquetaria y la adhesión focal dentro de los trombos coronarios humanos, la composición, los cambios en el tiempo del trombo que ocluye y su interacción con las otras células no han sido claramente dilucidados, principalmente debido a a la difícil accesibilidad al material trombótico. La aspiración de trombos, aunque tiene un papel controvertido como estrategia adyuvante en la intervención coronaria percutánea (ICP) primaria para STEMI y NSTEMI, se basa en la extracción de trombos oclusivos mediante un catéter de aspiración, avanzado en el árbol arterial coronario y constituye una oportunidad única para obtener trombos coronarios de pacientes con IAM.

La definición de vías moleculares variables responsables de la formación de trombos según el lapso de tiempo y la fisiopatología puede allanar el camino hacia nuevas estrategias terapéuticas.

Hipótesis del estudio El trombo coronario sufre modificaciones significativas según la fisiopatología de su formación (erosión, rotura de placa o exposición de struts metálicos) y el tiempo transcurrido desde el inicio de los síntomas.

La definición exacta de la composición molecular del trombo coronario y de sus patrones proteómicos y metabolómicos puede identificar el objetivo de nuevas estrategias terapéuticas.

Los objetivos del estudio son: dilucidar la composición molecular del trombo coronario en el IAM, comprender, a nivel molecular, la alteración fenotípica relacionada con la formación del trombo, resaltar nuevos factores potenciales involucrados en el inicio de la enfermedad o relacionados con el tiempo de formación del trombo.

Una serie consecutiva de pacientes ingresados ​​por un SCA, ya sea con STEMI y arteria relacionada con el infarto ocluida o NSTEMI y trombo visible en la arteria culpable, se considerará adecuada para la aspiración de trombo. La PCI se realizará con un procedimiento estándar, ya sea con acceso femoral o radial. Todos los pacientes recibirán ácido acetilsalicílico (100 mg diarios) y un inhibidor de P2Y12: clopidogrel (600 mg, luego 75 mg diarios), prasugrel (60 mg, luego 10 mg diarios) o ticagrelor (180 mg diarios). Después de la inserción de la vaina arterial, cada paciente recibirá 70 UI/kg de heparina.

Después de colocar la guía a través de la lesión, se hará avanzar el sistema de aspiración de trombos con succión suave y se realizarán varios pasajes a través de la lesión culpable.

El trombo liofilizado de cada paciente inscrito se someterá a una extensa caracterización molecular en términos de proteínas, metabolitos (aminoácidos y acilcarnitinas) y lípidos polares.

Los metabolitos polares y los lípidos del trombo se extraerán y analizarán siguiendo una metodología validada: se agregarán 5 mg de trombo húmedo a 330 μL de solución de metanol que contiene estándares internos deuterados de aminoácidos y carnitinas y lisoesfingomielina 100 μg/ml como interno. estándar para la lipidómica. Estas soluciones se incubarán a 45 °C durante 50 min y finalmente se dividirán en dos alícuotas. El primero se utilizará para analizar aminoácidos y acil-carnitinas siguiendo nuestro método LC-MS/MS ya utilizado en el análisis de LCR como se informó anteriormente. La segunda alícuota se empleará para seleccionar fosfolípidos mediante LC-MS/MS. Los datos obtenidos se cuantificarán con el software MarkerLynx y NeoLynx, y se investigarán estadísticamente con el software GraphPad Prism, Simca P+ y MetaboAnalyst.

El trombo liofilizado se digerirá mediante el protocolo de preparación de muestras asistido por filtro (FASP). Luego, se adquirirán triplicados instrumentales para cada muestra mediante una plataforma nanoLC-ESI-QTOF-MS/MS que realiza experimentos de proteómica de escopeta sin etiquetas para identificar y, simultáneamente, cuantificar las proteínas expresadas como ya se informó. El resultado de este estudio será una lista de proteínas expresadas durante la trombosis coronaria en el infarto agudo de miocardio, que podrá ser utilizada para análisis bioinformáticos.

Los datos serán procesados ​​por un software dedicado (Profile Analysis, Bruker, Markerlynx). Los metabolitos/proteínas destacados se identificarán mediante la base de datos y el análisis de fragmentación.

Específicamente para la metabolómica y la lipidómica, los datos se procesarán para obtener la desconvolución y alineación de picos, la eliminación de ruido y la normalización del recuento total de iones para generar una tabla de pares de masas con intensidades relativas asociadas para todos los picos detectados para cada muestra analizada. Luego, la matriz de datos se usará para el análisis multivariante (PCA; PLS-DA) usando SIMCA-P + 11.0 (Umetrics AB, Umeå, Suecia).

Mediante investigaciones multiómicas y procesamiento de datos, se dispondrá de un panel de moléculas interesantes como marco para cada grupo clínico estudiado. Estos compuestos biológicos se someterán luego a un análisis in-silico para reconstruir sus implicaciones funcionales en la fisiología y la homeostasis molecular del trombo coronario en el infarto agudo de miocardio. Para realizar dicho metanálisis de los datos, utilizaremos principalmente Ingenuity Pathways Analysis (IPA), (Ingenuity Systems, Mountain View, CA). A través del análisis de Pathways y la Ontología de Genes será posible identificar las rutas metabólicas y los genes/proteínas secundarios inhibidos y/o estimulados para un fenotipo específico y consecuentemente clasificar potenciales moléculas efectoras y/o diana farmacológica.

Tipo de estudio

De observación

Inscripción (Anticipado)

50

Contactos y Ubicaciones

Esta sección proporciona los datos de contacto de quienes realizan el estudio e información sobre dónde se lleva a cabo este estudio.

Estudio Contacto

  • Nombre: Marco Zimarino, MD, PhD
  • Número de teléfono: +39 3476045261
  • Correo electrónico: m.zimarino@unich.it

Copia de seguridad de contactos de estudio

Ubicaciones de estudio

      • Chieti, Italia
        • Reclutamiento
        • Santissima Annunziata Hospital
        • Contacto:
          • Marco Zimarino, MD, PhD
          • Número de teléfono: +39 3476045261
          • Correo electrónico: m.zimarino@unich.it

Criterios de participación

Los investigadores buscan personas que se ajusten a una determinada descripción, denominada criterio de elegibilidad. Algunos ejemplos de estos criterios son el estado de salud general de una persona o tratamientos previos.

Criterio de elegibilidad

Edades elegibles para estudiar

18 años y mayores (Adulto, Adulto Mayor)

Acepta Voluntarios Saludables

No

Géneros elegibles para el estudio

Todos

Método de muestreo

Muestra de probabilidad

Población de estudio

Una serie consecutiva de pacientes ingresados ​​por un SCA, ya sea con STEMI y arteria relacionada con el infarto ocluida o NSTEMI y trombo visible en la arteria culpable, se considerará adecuada para la aspiración de trombo. La PCI se realizará con un procedimiento estándar, ya sea con acceso femoral o radial.

Descripción

Criterios de inclusión:

  • pacientes con STEMI y arteria relacionada con infarto ocluida o NSTEMI y trombo visible considerados aptos para la aspiración de trombo

Criterio de exclusión:

  • aspiración de trombo no realizada o fallida

Plan de estudios

Esta sección proporciona detalles del plan de estudio, incluido cómo está diseñado el estudio y qué mide el estudio.

¿Cómo está diseñado el estudio?

Detalles de diseño

Cohortes e Intervenciones

Grupo / Cohorte
Intervención / Tratamiento
Tiempo transcurrido desde el inicio del dolor hasta la ICP < 3 horas
Pacientes con IAM sometidos a intervención coronaria percutánea (ICP) antes de las 3 horas desde el inicio de los síntomas
Los pacientes se dividirán en dos grupos según el tiempo transcurrido desde el inicio de los síntomas hasta la ICP
Tiempo transcurrido desde el inicio del dolor hasta la ICP > 3 horas
Pacientes con IAM sometidos a intervención coronaria percutánea (ICP) después de al menos 3 horas desde el inicio de los síntomas
Los pacientes se dividirán en dos grupos según el tiempo transcurrido desde el inicio de los síntomas hasta la ICP

¿Qué mide el estudio?

Medidas de resultado primarias

Medida de resultado
Medida Descripción
Periodo de tiempo
Cambio a través del tiempo en la composición proteómica del trombo
Periodo de tiempo: en 24 horas
Comparar concentraciones de diferentes tipos de proteínas en el sobrenadante de trombos de pacientes con STEMI <3hs vs <3hs, a través de enfoques proteómicos
en 24 horas

Colaboradores e Investigadores

Aquí es donde encontrará personas y organizaciones involucradas en este estudio.

Investigadores

  • Investigador principal: Marco Zimarino, MD, PhD, G. D'Annunzio University. Institute of Cardiology
  • Silla de estudio: Damiana Pieragostino, Department of Medical, Oral and Biotechnological Sciences, G. d'Annunzio University - Chieti

Publicaciones y enlaces útiles

La persona responsable de ingresar información sobre el estudio proporciona voluntariamente estas publicaciones. Estos pueden ser sobre cualquier cosa relacionada con el estudio.

Fechas de registro del estudio

Estas fechas rastrean el progreso del registro del estudio y los envíos de resultados resumidos a ClinicalTrials.gov. Los registros del estudio y los resultados informados son revisados ​​por la Biblioteca Nacional de Medicina (NLM) para asegurarse de que cumplan con los estándares de control de calidad específicos antes de publicarlos en el sitio web público.

Fechas importantes del estudio

Inicio del estudio (Actual)

1 de enero de 2017

Finalización primaria (Anticipado)

31 de diciembre de 2019

Finalización del estudio (Anticipado)

31 de diciembre de 2019

Fechas de registro del estudio

Enviado por primera vez

3 de noviembre de 2018

Primero enviado que cumplió con los criterios de control de calidad

3 de noviembre de 2018

Publicado por primera vez (Actual)

6 de noviembre de 2018

Actualizaciones de registros de estudio

Última actualización publicada (Actual)

18 de abril de 2019

Última actualización enviada que cumplió con los criterios de control de calidad

16 de abril de 2019

Última verificación

1 de abril de 2019

Más información

Términos relacionados con este estudio

Plan de datos de participantes individuales (IPD)

¿Planea compartir datos de participantes individuales (IPD)?

NO

Información sobre medicamentos y dispositivos, documentos del estudio

Estudia un producto farmacéutico regulado por la FDA de EE. UU.

No

Estudia un producto de dispositivo regulado por la FDA de EE. UU.

No

Esta información se obtuvo directamente del sitio web clinicaltrials.gov sin cambios. Si tiene alguna solicitud para cambiar, eliminar o actualizar los detalles de su estudio, comuníquese con register@clinicaltrials.gov. Tan pronto como se implemente un cambio en clinicaltrials.gov, también se actualizará automáticamente en nuestro sitio web. .

3
Suscribir