La influencia de la terapia de reducción de urato en la calidad del esperma de pacientes masculinos con gota: un estudio de cohorte prospectivo (INITIAL)

1. Investigación de drogas. En este estudio se evaluarán tres tipos de medicamentos para reducir el ácido úrico, alopurinol, febuxostat y benzbromarona.
2. Diseño del estudio y cálculo del tamaño de la muestra. Este estudio fue diseñado como un estudio de cohorte prospectivo de un solo centro. Se seleccionaron como grupo de control donantes de esperma de la misma edad del banco de esperma humano del Tercer Hospital de la Universidad de Pekín. Después de una búsqueda cuidadosa de la literatura relevante, no hay informes de estudios similares, por lo que es imposible estimar con precisión el tamaño de la muestra. Por lo tanto, este estudio planeó inscribir a 20 pacientes con gota que estaban usando alopurinol, febuxostat y benzbromarona para reducir el ácido úrico, respectivamente. Y 60 donantes masculinos normales fueron reclutados como control. Está previsto reclutar 5 pacientes con gota y 5 hombres de control cada mes. Por lo tanto, todo el estudio debe durar al menos 12 meses después del inicio.
3. Proceso de investigación. El proceso de este estudio no afecta los procedimientos de diagnóstico y tratamiento de rutina de los pacientes con gota. Nuestro equipo de investigación está formado por médicos especialistas en reumatología y andrología. Por lo tanto, podemos hacer un diagnóstico y tratamiento clínico de rutina de acuerdo con las condiciones específicas de los pacientes con gota.

1) Período de selección. Tardará aproximadamente 2 semanas, incluidos los siguientes formularios:

1. Los pacientes con gota están en ataque agudo. Según las guías para el diagnóstico y tratamiento de la gota, primero debemos darles un tratamiento antiinflamatorio y analgésico. Se pueden seleccionar fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE) no selectivos con ciclooxigenasa (COX) o colchicina para controlar los síntomas agudos. Luego realizamos el análisis de semen después de que la hinchazón y el dolor en las articulaciones mejoraron por completo. Si el paciente cumple con nuestros criterios de ingreso, se debe iniciar tratamiento hipouricemiante de acuerdo a la práctica clínica. Y consideramos este tiempo como la semana 0. Los AINE o la colchicina se pueden usar de forma profiláctica durante al menos 2 semanas combinados con un tratamiento reductor de uratos en caso de brote de gota.

2. Pacientes con gota en remisión. Para este tipo de pacientes, realizamos directamente análisis de semen. Si los resultados cumplen con nuestros criterios de admisión, se debe iniciar la terapia hipouricemiante de acuerdo con la práctica clínica. También consideramos este tiempo como la semana 0. Y el uso preventivo de AINE o colchicina es el mismo que el anterior.

   2) Etapa de seguimiento. El ciclo de seguimiento se calculó después del inicio de la terapia de reducción de urato. Detectaremos la rutina de sangre, la rutina de orina, la función hepática y renal y el ácido úrico sérico en el momento del cribado y las visitas de la semana 2, semana 4, semana 8 y semana 12. Los pacientes recibirán el análisis de esperma repetido en la semana 4 y la semana 12, respectivamente. Al mismo tiempo, recopilaremos todos los datos correspondientes en el formulario de informe de casos.

   4、Retiro del paciente. Los pacientes pueden abandonar el ensayo en cualquier momento. Los investigadores también pueden persuadir a los pacientes para que se retiren por una variedad de razones, incluida la evaluación inicial de la calidad del esperma por debajo de los estándares de la Organización Mundial de la Salud (OMS), eventos adversos, problemas de seguridad o el incumplimiento del régimen del ensayo por parte de los pacientes.

   5、Casos eliminados. Por alguna razón, aquellos que no se completan según lo planeado y cuyos registros de observación están incompletos son casos eliminados. Aquellos que sean interrumpidos por reacciones adversas graves deberán ser considerados como casos de reacciones adversas y no serán incluidos en las estadísticas de análisis comparativo de semen.

   6, Régimen de tratamiento. Cribado basal: si el paciente cumple los criterios de selección y no se encuentra en periodo de ataque de gota, podemos considerar el inicio directo de tratamiento farmacológico hipouricemiante. La elección de medicamentos para reducir el ácido úrico debe basarse en los tabúes de uso de medicamentos del paciente para la elección en el mundo real. Si el paciente está en la etapa de ataque de la artritis aguda, debemos controlar los síntomas agudos y podemos considerar el uso de AINE no selectivos de la COX y luego comenzar el tratamiento con ácido úrico después de que los síntomas de las articulaciones hayan mejorado por completo.

Terapia reductora del ácido úrico: el inicio de la terapia reductora del ácido úrico debe combinarse con AINE no selectivos de la COX o colchicina para prevenir la gota.

• Alopurinol, la dosis inicial de 125 mg una vez al día. Si el ácido úrico sérico no es inferior a 360 µm/L después de 2 semanas, la dosis puede aumentarse a 250 mg una vez al día y la dosis más alta no supera los 500 mg todos los días.

  • Febuxostat, la dosis inicial de 20 mg una vez al día. Si el ácido úrico sérico no es inferior a 360 µm/L después de 2 semanas, la dosis puede aumentarse a 40 mg una vez al día y la dosis más alta no supera los 80 mg todos los días.

    • Benzbromarona, la dosis inicial de 25 mg una vez al día. Si el ácido úrico sérico no es inferior a 360 µm/L después de 2 semanas, la dosis puede aumentarse a 50 mg una vez al día y la dosis más alta no supera los 100 mg todos los días.

      7, Evaluación. Usaremos tres métodos para evaluar la fertilidad masculina: análisis básico de semen, análisis de integridad del ADN espermático y medición del daño espermático a través del estrés oxidativo.

      1. El análisis básico de semen y la fragmentación del ADN espermático se realizaron en el Centro de Medicina Reproductiva del Tercer Hospital de la Universidad de Pekín utilizando procedimientos de laboratorio estándar, según las directrices de la OMS (2010, 5.ª edición). Esta es una evaluación microscópica de semen fresco que evalúa la concentración, viabilidad, motilidad y morfología de los espermatozoides. Un laboratorio clínico central especializado en medicina molecular evaluó especímenes de semen congelado para detectar daño por estrés oxidativo.

      2. Pruebas de esperma para fragmentación de ADN y daño oxidativo:

         El ensayo de fragmentación del ADN espermático se utilizó para evaluar la integridad del ADN espermático según el informe de la literatura (Cytometry 1985; 6(3): 238-53) en el que el ADN espermático se tiñe con naranja de acridina y se analiza mediante citometría de flujo. Luego se producen dos mediciones : %DFI (índice de fragmentación del ADN) que indica el nivel de roturas del ADN del esperma y %HDS (alta capacidad de tinción del ADN) que se correlaciona con los niveles de espermatozoides inmaduros y células somáticas como los glóbulos blancos. El daño espermático por estrés oxidativo (OS) se midió usando la prueba Oxidative Stress AdductsTM (ReproSource, Inc. Woburn, MA) que mide por espectrofotometría los niveles de moléculas (aductos) formados covalentemente por reacción de aldehídos lipídicos presentes en las membranas espermáticas en condiciones de OS con estructuras celulares como el ADN basándose en el método previamente descrito por Gomez et al (Gut 1987; 28(8): 1008-12).

      3. Las muestras de suero para el análisis de ácido úrico sérico se recogieron en el momento de la selección, semana 2, semana 4, semana 8 y semana 12, o terminación anticipada.

         8、Colección, conservación y destrucción de muestras

      una. Las muestras de semen se recolectaron por masturbación después de un período instruido de 2 a 3 días sin eyaculación en la sala de recolección de semen del tercer Hospital de la Universidad de Pekín después de firmar el consentimiento informado de acuerdo con el esquema del ensayo. Después de la licuefacción del semen (30 minutos a 1 hora), se usó una alícuota para el análisis del semen y una segunda alícuota de semen crudo se congeló dentro de las 2 horas posteriores a la recolección a -80 °C.

      b. Las muestras de semen se conservan uniformemente hasta que se destruyen después del final de este ensayo. Se espera que el tiempo de prueba sea de 2-3 años.

      C. Al final del ensayo, las muestras de semen fueron destruidas uniformemente. El semen congelado se recalentó a temperatura ambiente y se empapó completamente en desinfectante de hipoclorito de sodio al 0,5%. Finalmente, la solución desinfectante que contenía semen fue tratada como desecho médico.

      9, control de calidad.

      una. Realizar publicidad y educación a los sujetos para reducir la tasa de pérdida de seguimiento; b. El sistema de análisis de calidad del semen se utilizó para detectar índices de calidad del semen, como la densidad del esperma, la motilidad, la relación de motilidad hacia adelante, etc. Se realizó un control de calidad de las muestras estándar por cada 10 muestras analizadas.

      10、Análisis estadístico. Utilizaremos el software SPSS 20.0 para el análisis estadístico. Todas las pruebas estadísticas son pruebas bilaterales, el valor de P menor o igual a 0,05 se considerará estadísticamente significativo. Al comparar la diferencia del efecto curativo entre los parámetros antes y después del tratamiento de la gota, se usó la prueba t pareada si los datos de medición estaban de acuerdo con la distribución normal. Se utilizó la prueba t de muestra independiente para la comparación entre diferentes grupos de intervención. La prueba no paramétrica se usa si los datos de medición no se ajustan a la distribución normal. Se utilizó la prueba de chi-cuadrado para comparar los datos de conteo entre grupos.