Cristalización patológica del colesterol en la aterosclerosis

Los tejidos ateroscleróticos humanos se obtendrán del Departamento de Cirugía Vascular, Centro Médico Sheba. Se tomarán tejidos de donantes sometidos a procedimientos de endarterectomía de rutina. Elegimos la arteria carótida como fuente de los ateromas, debido a su alta prevalencia y su tamaño considerable. Todos los especímenes se estudiarán en criomicroscopía electrónica de barrido (Crio-SEM). Los tejidos se observarán en estado vitrificado hidratado, después de la congelación a alta presión (HPF) y la fractura por congelación, como bien se establece en el grupo WIS. Las muestras se observarán a -120°C. Cathode-Luminescence (CL) detecta una señal de luminiscencia inducida por electrones en cristales de colesterol y estados condensados ​​de CE. Se implementará aquí en condiciones criogénicas. La preparación de la muestra es como para crio-SEM. Las imágenes en serie de la cara del bloque Cryo-FIB-SEM permiten la adquisición de imágenes en serie en grandes volúmenes (decenas de micrómetros cúbicos), con una resolución de imagen relativamente alta (hasta un tamaño de vóxel de 5 nm3). Se tomarán imágenes de volúmenes de hasta 40x40x40 ml con una resolución de hasta 10 nm. Los datos se procesarán y alinearán mínimamente con FIJI, se reconstruirán y segmentarán manualmente con el software Avizo Lite 9.2.0.