Hydroksiklorokiini ja aineenvaihduntatulokset potilailla, joille tehdään TPAIT

On olemassa vakuuttavaa näyttöä synnynnäisen immuniteetin aiheuttaman tulehduksen vaikutuksista funktionaalisen beetasolumassan vähenemiseen autologisessa siirrossa. Tutkijat olettavat, että HCQ:n antaminen siirtovaiheen aikana säilyttää saarekemassan ja parantaa saarekesolujen toimintaa TPAITissa vähentämällä tulehdusta. Tutkijat pyrkivät erityisesti osoittamaan korkeamman stimuloidun C-peptidin tason sekä paremman glukoosin hallinnan vasteena seka-ateriatoleranssitestaukseen (MMTT) 6 ja 12 kuukautta TPAIT:n jälkeen potilailla, joita hoidettiin HCQ:lla lumelääkkeeseen verrattuna. Parempi vaste HCQ-haarassa viittaa parempaan saarekkeiden eloonjäämiseen ja aineenvaihduntaan, mikä mahdollisesti helpottaa insuliiniriippumattomuuden lisääntymistä.

HCQ:n hallinta:

Käsivarsi 1 (n = 5): Koehenkilöt saavat ennen siirtoa 200 mg:n HCQ:n päivittäisen annoksen 30 päivää ennen TPAITia, jonka jälkeen HCQ:ta käytetään vielä 3 kuukauden ajan leikkauksen jälkeen.

Ryhmän 2 (n=5) koehenkilöt saavat lumelääkettä saman aikataulun mukaisesti kuin ryhmässä 1.

Tutkivat mekanistiset tutkimukset:

Kaikille koehenkilöille tehdään MMTT saarekesolujen toiminnan arvioimiseksi 6 ja 12 kuukauden kuluttua TPAITista (vakiohoitona suoritetun MMTT-esileikkauksen lisäksi, jonka tuloksia käytetään esisatunnaistuksessa tässä pilotissa). Liian aikaisin leikkauksen jälkeen saadut aineenvaihduntatestit eivät välttämättä viittaa saarekkeen toimintaan, koska insuliinia tukeva hoito on annettu useita viikkoja elinsiirron jälkeen. Myös vakuuttavat tiedot osoittavat, että saarekkeen toiminnan stabiloituminen voi vaatia jopa vuoden. Veren glukoosi- ja C-peptidi-seerumitasot mitataan ääreisverinäytteistä välittömästi ennen MMTT:tä ja sen jälkeen. Tutkimuskoordinaattori ottaa koehenkilöihin yhteyttä 3, 6 ja 12 kuukauden iässä haastattelua varten seurannan kulusta ja auttaa MMTT:n 6 ja 12 kuukauden ajan sovittaessa.

Mitokondrioiden toiminta ja aineenvaihduntatulokset TPAITissa:

Mitokondrioiden tehokkuus on tärkeä TPAIT-tilanteessa, jossa on todettu lisääntyneen aineenvaihdunnan tarve ja vähentynyt hapettuminen. Tutkijat arvioivat mitokondrioiden tehokkuutta mittaamalla mitokondrioiden hengitys- ja glykolyysinopeudet. Nämä toimenpiteet toteutetaan luovuttamista varten hankituilla luodoilla ja saarekkeiden eristämisen jälkeen. Pieniä määriä saarekeeristyksen jälkeen jäänyttä sulatetta, joka normaalisti hylätään, käytetään tässä tutkimuksen osassa. Digestistä peräisin olevat saarekkeet kerätään ja niille suoritetaan solunulkoinen ulosvirtausanalyysi Seahorse XF -analysaattorilla mitokondrioiden toiminnan arvioimiseksi. Kontrollina käytetään kaupallisesti saatavilla olevia normaaleja ihmisen saarekesoluja kokeita varten. Kontrollit verrataan samanaikaisesti tutkimuskohteista eristettyihin saarekkeisiin.

Genominlaajuinen geeniekspressio TPAIT-potilailla:

Genomitasolla useita geneettisiä reittejä on liitetty saarekesolujen toimintaan ja eloonjäämiseen. TPAIT-hoitoa saavien CP-potilaiden saarekesolujen geneettisiä profiileja ei ole vielä arvioitu. Tutkijat pyrkivät rakentamaan RNA-geenisekvenssitietokannan CP-potilaiden saarekesoluille, joille tehdään TPAIT, erityisesti geeneihin, jotka on aiemmin tunnistettu saareketoiminnan avaintekijöiksi. Saaristogeenin ilmentymisen arviointiin käytetään myös pieniä määriä saarekkeiden eristämiseen käytetystä menettelystä peräisin olevaa digestiota ja sitä, mikä jää piiriin eristysprosessin päätyttyä, joka normaalisti hylätään.