Metformiinin metaboliset vasteet ja SLC22A1-geenin geneettiset polymorfismit PCOS:ssä

Tutkimuksen tavoitteet Yleistavoite Metformiinin metabolisten vasteiden ja SLC22A1-geenipolymorfismien (rs628031 ja rs2282143) välisen yhteyden määrittäminen naisilla, joilla on PCOS Erityiset tavoitteet

• Nähdä aineenvaihduntaprofiilin muutokset (painoindeksi, vyötärön ympärysmitta, verenpaine, glykeeminen tila, insuliiniresistenssi, c-peptidi ja lipidit) 24 viikon metformiinihoidon aikana PCOS-potilailla
• SLC22A1-geenipolymorfismien (rs628031 ja rs2282143) esiintymistiheyden määrittäminen naisilla, joilla on PCOS
• PCOS-potilaiden luokittelu SLC22A1-geenipolymorfismien (rs628031 ja rs2282143) mukaan villi- ja varianttiryhmiin
• 24 viikon metformiinihoidon metabolisten muutosten vertailu SLC22A1-geenipolymorfismien villi- ja varianttiryhmän (rs628031 ja rs2282143) välillä PCOS-potilailla

Muut:

• Metformiinin lyhytaikaisten sivuvaikutusten määrittäminen naisilla, joilla on PCOS
• Metformiinin sivuvaikutusten vertailu naisilla, joilla on PCOS SLC22A1-geenipolymorfismin kanssa tai ilman niitä (rs628031 ja rs2282143)

Materiaalit ja menetelmät:

Opintotyyppi:

Prospektiivinen kliininen tutkimus

Opiskelupaikka:

Endokrinologian laitos, BSMMU

Opiskelujakso:

Lokakuusta 2022 syyskuuhun 2024

Tutkimuspopulaatio:

Lisääntymisikäiset (18–35-vuotiaat) PCOS:n naiset

Näytteenottomenetelmä:

Jatkuva tarkoituksellinen/kätevä näytteenotto

Otoskoko:

Otoskoko lasketaan seuraavasta kaavasta:

n= {(Zα + Zβ)^2 × (σ1^2 + σ2^2)} ÷ (μ1 - μ2)^2 Aiemmasta samanlaisesta tutkimuksesta 2 tunnin OGTT-glukoosi/insuliinisuhde (GIR) ennen ja jälkeen 24 metformiinihoidon viikot olivat 2,3±2,5 ja 3,2±3,2 genotyypissä ja 2,0±1,9 ja 3,9±2,9 vastaavasti SLC22A1 rs628031:n villissä genotyypissä. Variantin ja villin genotyypin keskimääräiset erot olivat 0,9±0,7 ja 1,9±1,0 vastaavasti.

Tässä Zα = 1,96 95 %:n luottamustasolla, Zβ = 1,28 90 % teholla, μ1 = keskimääräiset GIR:n muutokset metformiinin jälkeen rs628031:n varianttigenotyypissä (AG/GG) = 0,9, μ2 = GIR:n keskiarvo metformiinin jälkeen villissä genotyypissä of rs628031(AA) = 1,9, Olettaen keskihajonta (SD) = 1,5 (σ1=σ2) molemmissa ryhmissä

Tutkittavien näytteiden vähimmäismäärä kussakin ryhmässä, n= {(1,96 + 1,28)^2 × (1,52 + 1,52)} ÷ (0,9 - 1,9)^2

• {(3,24)^2 × (2,25 + 2,25)} ÷ (1,0)^2
• {10,50 × 4,50} ÷ 1 = 47,25 ÷ 1 = 47,25 Tähän tutkimukseen tarvitaan vähintään 94 PCOS-potilasta. Kun otetaan huomioon keskeyttäminen, tutkimukseen otetaan kuitenkin vähintään 100 PCOS-potilasta. Näytteen kokoa voidaan tarvittaessa suurentaa.

Tutkimusmenettely Vähintään 100 äskettäin diagnosoitua lisääntymisiässä olevaa naista (18-35 vuotta) PCOS-potilaita rekrytoidaan peräkkäin BSMMU:n endokrinologian osastolta. Potilailta otetaan tietoinen kirjallinen suostumus ja pyydetään tulemaan paastotilaan tiettynä päivänä, kellonaikaan ja paikkaan kahdesti viikossa. Asiaan liittyvä historia (lisääntymis-, henkilö- ja sukuhistoria) otetaan ja fyysinen tutkimus (pituus, paino, vyötärön ympärysmitta, lantion ympärysmitta, akne, hirsutismi, acanthosis nigricans) tehdään ja kaikki tiedot dokumentoidaan esitestatulla puolistrukturoidulla kyselylomakkeella. .

Verinäytteen otto lähtötilanteessa:

Jokaiselta osallistujalta otetaan noin 10 ml laskimoverta 8-12 tunnin paaston jälkeen. Sitten tehdään 75 g:n oraalinen glukoositoleranssitesti (OGTT) ja kahden tunnin kuluttua otetaan vielä viisi ml verta. Noin kaksi ml paaston aikana ja kaksi tuntia OGTT:n jälkeen kerättyä verta säilytetään fluoratussa putkessa verensokerin mittausta varten samana keräyspäivänä. Lisäksi kaksi ml kokoverta säilytetään -70 celsiusasteessa endokrinologian osastolla polymeraasiketjureaktion rajoitusfragmentin pituuden polymorfismin (PCR-RFLP) varalta, kun kaikki biokemialliset analyysit on suoritettu vinoutumisen välttämiseksi. Jäljellä olevat kuusi ml paaston aikana kerättyä verta ja kolme ml OGTT:n jälkeen kerättyä verta pidetään seisomassa 15 minuuttia hyytymisen mahdollistamiseksi. Sentrifugoinnin jälkeen seerumi erotetaan ja säilytetään eppendorfissa. Asianmukaisen merkinnän jälkeen ne säilyvät -700C jääkaapissa. Seerumin biokemiallinen analyysi (glukoosi- ja lipidiprofiili) tehdään samana päivänä ja insuliini ja c-peptidi seitsemän päivän sisällä keräämisestä.

Toimenpiteet Elämäntapojen muutokset Potilaita neuvotaan diagnoosin yhteydessä ja heille toimitetaan kirjallinen asiakirja.

Ruokavalio

• Tarjolla on ravitsemusterapeutin laatima yksilöllinen ruokavaliotaulukko
• Ylipaino/lihavuus: Energiavaje 500 Kcal/päivä ruokavaliosta painonhallintaruokavaliosta
• Muut: Painonhallintaruokavalio Fyysinen aktiivisuus
• Vähintään 150 minuuttia/viikko kohtalaisen intensiivistä fyysistä aktiivisuutta (reipasta kävelyä nopeudella 6 km/h) ja lihaksia vahvistavia aktiviteetteja kahtena ei peräkkäisenä päivänä/viikko
• liikunta on suoritettava vähintään 10 minuutin jaksoissa tai noin 1000 askelessa, tavoitteena saavuttaa vähintään 30 minuuttia päivittäin vähintään 5 päivänä viikossa

Metformiiniresepti Jokaisen metformiinitabletin ainesosat Jokainen metformiinitabletti sisältää metformiinia 500 mg HCl, BP sekä inaktiivisia povidonia, mikrokiteistä selluloosaa, kroskarmelloosinatriumia ja magnesiumstearaattia. Lisäksi tablettien päällyste sisältää polyetyleeniglykolia, polyvinyylialkoholia, titaanidioksidia, talkkia, akaasiakumia, maltodekstriiniä, propyleeniglykolia ja luonnollisia aromeja.

Inventointi Tutkija jakaa säännöllisesti kaikki metformiinitabletit tutkimuksen osallistujille lähtötilanteessa ja ensimmäisellä käynnillä (viikon 1 jälkeen) ja toisella seurantakäynnillä 12 viikon metformiiniylläpitohoidon (1500 mg/vrk) jälkeen. Metformiinitabletit säilytetään valmistajan ohjeiden mukaisesti. Lääkkeiden viimeinen käyttöpäivä ja laatu tarkistetaan säännöllisesti.

Aloitusvaihe Metformiinia määrätään 500 mg kerran vuorokaudessa päivällisen jälkeen, ja se nostetaan 1500 mg:aan päivässä jaettuna kolmeen annokseen pääaterioiden jälkeen kahden viikon kuluessa aloittamisesta. Potilaita pyydetään toimittamaan kaavio lääkemyöntymisestä ja sivuvaikutuksista viikon kuluttua metformiinin 1500 mg/vrk-annoksen aloittamisesta. Potilaat, jotka eivät siedä annosta 1500 mg/vrk, suljetaan pois tutkimuksesta metabolisten vasteiden analysoimiseksi.

Ylläpitoannos: 1500 mg/vrk kolmeen annokseen jaettuna 24 viikon ajan. Seuranta: Potilaita pyydetään tulemaan kolmelle seurantakäynnille 1, 12 ja 24 viikon metformiinihoidon ylläpitohoidon jälkeen, ja ikkunajakso on kaksi viikkoa molempiin suuntiin. Ensimmäisen seurantakäynnin aikana (1 viikon kuluttua) seurataan potilaiden lääkemyöntymistä ja sivuvaikutuksia; kliininen tila sekä elämäntapa ja lääkemyöntyvyys ja haittavaikutukset dokumentoidaan 12 viikon kuluttua (2. seurantakäynti). 24 viikon kuluttua (3. käynti) myös potilaan biokemialliset aineenvaihduntaprofiilit tehdään edellä mainituilla kliinisillä tiedoilla.

Verinäytteen otto 24 viikon jälkeen Noin kahdeksan ml laskimoverta otetaan 24 viikon metformiinihoidon jälkeen 8–12 tunnin paaston jälkeen FBG-, HbA1C-, insuliini-, c-peptidi- ja lipidiprofiilin sekä 75 g:n OGTT:n ja sen jälkeen viiden mittauksen mittaamiseksi. ml verta kerätään glukoosin ja insuliinin mittausta varten.

Lääkkeiden noudattaminen:

Sitä seurataan puhelimitse viikoittain ensimmäiset kaksi viikkoa ja sen jälkeen jokaisella käynnillä tutkijan luona. Potilaita pyydetään tuomaan mukanaan tyhjiä metformiiniläpipainopakkauksia. Arkistointikirjaa ylläpidetään noudattamisen valvomiseksi asianmukaisesti. Potilaat, joiden lääkemyöntyvyys on alle 95 % milloin tahansa tutkimuksen aikana, suljetaan pois metabolisten vasteiden analyysistä.

Haittatapahtumien seuranta:

Jokaisella käynnillä potilaille annetaan haittatapahtumien (AE) päiväkirja, johon merkitään ennalta määritellyt maha-suolikanavan (GI) tapahtumat. Heiltä kysytään myös vakavia haittavaikutuksia (SAE) tai muita haittavaikutuksia GI-tapahtumaa lukuun ottamatta. Kaikki AE ja SAE kirjataan tietyssä AE-muodossa ja säilytetään potilaiden tiedostoissa. Potilaita neuvotaan käyttämään tiukasti esteehkäisyä. Seerumin ALAT- ja kreatiniiniarvot mitataan myös 24 viikon metformiinihoidon jälkeen.