Une étude du MVA85A chez des enfants et des nourrissons en bonne santé

M.tb est un organisme intracellulaire et l'immunité protectrice dépend d'un système immunitaire cellulaire intact. Les lymphocytes T CD4+ restreints de classe II et les lymphocytes T CD8+ restreints de classe I sont importants pour la protection. Les cellules gamma delta et les cellules T à restriction non classique telles que les cellules T à restriction CD1 peuvent également jouer un rôle protecteur, mais les connaissances sur la manière de les induire à des niveaux protecteurs par la vaccination sont très limitées. Bien que plusieurs systèmes d'administration de vaccins soient capables d'induire des lymphocytes T, par ex. combinaisons protéine/adjuvant, vaccins à ADN et vecteurs viraux recombinants, lorsqu'ils sont utilisés seuls, ces systèmes de délivrance n'induisent que des réponses de faible niveau. Les stratégies d'immunisation prime-boost hétérologues consistent à immuniser avec 2 deux vaccins différents, chacun exprimant le même antigène, à plusieurs semaines d'intervalle. Ces stratégies induisent des niveaux plus élevés de lymphocytes T CD4+ et CD8+ que le rappel homologue dans les modèles animaux du paludisme, du VIH et de la tuberculose.

Virus de la vaccine modifié recombinant Ankara exprimant l'antigène 85A (MVA85A). Lorsqu'ils sont utilisés dans des stratégies d'amorçage-rappel hétérologues, certains vecteurs viraux sont très efficaces pour stimuler les réponses des cellules T préalablement amorcées, en particulier les constructions adénovirales recombinantes et les virus pox recombinants. Le virus de la vaccine modifié Ankara (MVA) est une souche atténuée du virus de la vaccine qui a été passée plus de 500 fois dans des fibroblastes d'embryons de poulet et, par conséquent, a perdu à la fois les gènes de la gamme d'hôtes et les gènes des récepteurs de cytokines. Le MVA a un excellent bilan de sécurité, car il a été utilisé pour vacciner plus de 120 000 personnes à la fin de la campagne d'éradication de la variole, sans aucun événement indésirable grave. Chez l'homme, plusieurs centaines de volontaires séronégatifs pour le VIH ont maintenant été immunisés avec des MVA recombinants exprimant un certain nombre d'antigènes différents, sans événements indésirables graves. Il a été démontré qu'un MVA recombinant exprimant un antigène de Plasmodium falciparum stimule les lymphocytes T CD4+ et CD8+ chez l'homme. Les MVA recombinants font actuellement l'objet d'essais cliniques pour plusieurs maladies infectieuses, notamment le VIH, l'hépatite B et le paludisme. Fait important, pour un nouveau vaccin contre la tuberculose, l'innocuité du MVA en tant que vecteur viral a maintenant été démontrée chez les patients séropositifs.

L'inclusion du BCG dans de tels régimes de prime-boost hétérologues permet de conserver les effets bénéfiques du BCG. Nous avons développé une stratégie d'immunisation utilisant le BCG comme immunisation d'amorçage et un MVA recombinant (rMVA) comme rappel. L'antigène sélectionné pour être inclus dans le rMVA doit être présent dans toutes les souches de BCG. Nous avons sélectionné l'antigène 85A, qui fait partie du complexe immunodominant de l'antigène 85. Bien qu'il existe de nombreux antigènes candidats à utiliser dans un vaccin contre la tuberculose, l'antigène 85A a longtemps été considéré comme un choix de premier plan. C'est un antigène cible majeur reconnu par les cellules T des individus infectés et il est protecteur en tant que vaccin à ADN chez les petits animaux. Surtout, pour une utilisation dans les régimes de rappel BCG prime-MVA, il est hautement conservé parmi toutes les espèces mycobactériennes et est présent dans toutes les souches de BCG. Chez les petits animaux, c'est une cible majeure des réponses immunitaires induites par le BCG et chez l'homme, des cellules T CD8 restreintes par HLA-A2 ont été trouvées chez une forte proportion d'individus immunisés par le BCG. L'antigène 85A est une enzyme, la mycolyl transférase, impliquée dans la biosynthèse de la paroi cellulaire.

Données précliniques L'utilisation de ce rappel BCG prime-MVA85A chez les souris BALB/c induit des niveaux plus élevés de cellules CD4 T et CD8+ sécrétant de l'interféron gamma spécifique de l'antigène (IFN-γ) et des niveaux de protection plus élevés qu'après le BCG seul. Ce régime a maintenant fait l'objet d'une évaluation plus approfondie dans le modèle de provocation par aérosol de cobaye plus sensible avec des résultats très encourageants. Les cobayes vaccinés avec le BCG, puis avec le MVA85A, puis avec un second vecteur viral recombinant, la variole aviaire, exprimant l'antigène 85A (FP85A) ont montré une protection significativement plus élevée contre l'épreuve que les cobayes vaccinés avec le BCG seul. Ce régime est également immunogène et protecteur chez les macaques rhésus

Études cliniques L'innocuité et l'immunogénicité de cette stratégie de vaccination de rappel BCG prime-MVA85A ont maintenant été évaluées dans une série d'études de phase I à petite échelle au Royaume-Uni. Le MVA85A a été le premier vaccin candidat contre la tuberculose à faire l'objet d'essais cliniques partout dans le monde en septembre 2002, et est actuellement le seul à faire l'objet d'essais cliniques en Afrique . La principale lecture immunologique utilisée dans ces essais cliniques est le test ex-vivo IFN-γ Elispot, qui est utilisé pour évaluer les réponses spécifiques des lymphocytes T à la tuberculine PPD, au complexe de l'antigène 85 et aux pools de peptides qui se chevauchent sur toute la longueur de l'antigène 85A. Le meilleur corrélat immunologique de protection dans la tuberculose murine et humaine est la sécrétion d'IFN-γ par les lymphocytes T sensibilisés.

Au Royaume-Uni, 14 volontaires sains naïfs aux mycobactéries et au BCG ont été vaccinés avec 5 x 10^7pfu MVA85A, administrés par voie intradermique. Nous constatons que le MVA85A est sûr et bien toléré. Une seule vaccination avec MVA85A induit des niveaux remarquablement élevés de réponses spécifiques des lymphocytes T effecteurs (réponse médiane IFN-γ Elispot aux pools de peptides additionnés de l'antigène 85A 1153 points par million de PBMC). De plus, l'innocuité du MVA85A chez des volontaires précédemment vaccinés par le BCG a maintenant été démontrée chez 17 volontaires. Ces 17 volontaires présentent des pics encore plus élevés de lymphocytes T spécifiques de l'antigène (réponse médiane 2455 points par million de PBMC) 1 semaine après la vaccination que ceux immunisés avec le MVA85A seul. Peut-être plus important encore pour l'induction de la mémoire des cellules T, les volontaires qui ont déjà été vaccinés par le BCG maintiennent des niveaux plus élevés de cellules T spécifiques de l'antigène après MVA85A jusqu'à 24 semaines après la vaccination, par rapport aux volontaires vaccinés avec MVA85A seul. Contrairement à ce rappel de vecteur viral, l'ampleur des réponses des lymphocytes T observées après la vaccination avec un vaccin protéique/adjuvant de premier plan (contre le paludisme), RTS,S/AS02, est d'environ 200 points par million de PBMC.

Cette série d'études de phase I a également été reproduite en Gambie, et les résultats de la Gambie sont tout aussi prometteurs. Dans les études britanniques et gambiennes, le MVA85A induit des réponses immunitaires 5 à 10 fois plus élevées que tout autre MVA recombinant dans les essais cliniques. L'explication la plus probable à cela est que les volontaires ont une faible immunité anti-mycobactérienne préexistante induite par l'exposition à des mycobactéries environnementales, et cette immunité anti-mycobactérienne spécifique est renforcée par le MVA85A. Nous avons des données préliminaires pour étayer cette hypothèse, et d'autres groupes ont également découvert une immunité préexistante contre les mycobactéries environnementales chez des adultes britanniques en bonne santé. Les vaccins capables de stimuler les réponses des cellules T préalablement amorcées, tels que le MVA85A, sont potentiellement de bons candidats pour un vaccin post-exposition conçu pour stimuler la réponse immunitaire et prévenir le développement de la maladie chez les personnes infectées de manière latente. Si les niveaux élevés de lymphocytes T spécifiques observés après une seule immunisation avec le MVA85A sont attribuables au renforcement des réponses préexistantes induites par l'environnement, cela fait du MVA85A un candidat extrêmement prometteur pour un vaccin de rappel, administré en tant que vaccin post-exposition en phase latente. infection.

L'étude suivante, dont le recrutement au Royaume-Uni s'est achevé en février 2006, a évalué l'innocuité et l'immunogénicité du MVA85A chez des volontaires sains infectés de manière latente par M.tb. Douze sujets sains infectés de manière latente ont été vaccinés avec une dose unique de 5 x 10^7pfu MVA85A. Dans cette étude, l'infection latente à M.tb a été déterminée par un test cutané à la tuberculine et des réponses Elispot IFN-γ ex vivo à deux antigènes spécifiques de M.tb, ESAT6 et CFP10. Le suivi a impliqué une évaluation radiologique et clinique détaillée de la sécurité de ce vaccin chez les sujets infectés par M.tb. Nous avons constaté que le MVA85A est aussi sûr et immunogène dans cette population infectée de manière latente que dans la population vaccinée avec le BCG (Sander et al, données non publiées). Nous avons également mené une étude de recherche de dose portant sur deux autres doses de MVA85A, 1 x 10^7pfu et 1 x 10^8 pfu. Douze sujets ont été vaccinés avec chaque dose. Les résultats préliminaires montrent que le vaccin est significativement plus immunogène à la dose la plus élevée (1 x 10^8 pfu) mais l'immunogénicité de la dose la plus faible (1 x 10^7 pfu) est comparable à la dose standard (5 x 10^7pfu) .

Nous venons de commencer le recrutement dans une étude sur le VIH où des adultes infectés par le VIH et naïfs d'antirétroviraux avec un nombre de CD4 supérieur à 350 sont vaccinés avec le MVA85A. À ce jour, il n'y a eu aucun problème de sécurité avec cette étude.

Le MVA85A est testé dans une série d'études de phase I et II dans la province du Cap occidental, en Afrique du Sud, où la prévalence de la tuberculose est extrêmement élevée (incidence annuelle de la maladie ~ 1 %). En août 2005, l'inscription a commencé pour l'essai 008 et s'est poursuivie jusqu'en juillet 2006. 24 adultes sains naïfs de tuberculose et non infectés par le VIH ont été vaccinés. Les résultats préliminaires de ce volet de l'essai ont été présentés à Vienne (Hawkridge et al, TB Vaccines for the World ; avril 2006) et à Paris, le vaccin s'est avéré sûr et hautement immunogène. L'inscription dans le bras adolescent de cette étude a commencé en novembre 2006, une fois qu'il était clair que les résultats de sécurité au jour 84 chez les adultes étaient satisfaisants.

Ce protocole constitue la deuxième partie de ces études de désescalade de l'âge en Afrique du Sud, qui sont nécessaires avant de commencer un essai d'efficacité de preuve de concept de phase IIb avec le MVA85A dans cette population en 2008.