Donatore di cellule Th2 per prevenire la malattia del trapianto contro l'ospite nei trapianti di midollo osseo

Il trapianto allogenico di cellule staminali del sangue periferico (PBSCT) è principalmente limitato dalla malattia del trapianto contro l'ospite (GVHD). In modelli murini, abbiamo dimostrato che i linfociti T CD4+ del donatore con fenotipo di citochine Th1 (definito dalla loro secrezione di IL-2 e IFN-gamma) mediano la GVHD. Al contrario, le cellule T CD4+ del donatore con fenotipo Th2 (definito dalla loro secrezione di IL-4, IL-5 e IL-10) non generano GVHD e abrogano la GVHD mediata da Th-1. È importante sottolineare che abbiamo dimostrato che l'arricchimento di allotrapianti murini con cellule Th2 riduce la GVHD senza compromettere la capacità delle cellule T del donatore di prevenire il rigetto dell'innesto. Questi studi indicano che la somministrazione di cellule Th2 dopo il trapianto allogenico rappresenta una strategia per ottenere l'allotrapianto con GVHD ridotta.

Oltre alla GVHD, la PBSCT allogenica è stata limitata dalla tossicità associata ai regimi preparativi mieloablativi convenzionali. Tali regimi, che tipicamente utilizzano l'irradiazione corporea totale (TBI) e la chemioterapia ad alte dosi, un tempo erano considerati essenziali per la prevenzione del rigetto del trapianto. Tuttavia, recenti studi clinici hanno dimostrato che dosi non mieloablative di chemioterapia a base di fludarabina possono provocare l'allotrapianto. Nei modelli murini, abbiamo dimostrato che la grave deplezione delle cellule T dell'ospite indotta dalla combinazione di fludarabina e cytoxan può prevenire anche il rigetto del trapianto di midollo non corrispondente a MHC completo. Sebbene i regimi non mieloablativi possano ridurre la tossicità correlata al regime, tali trapianti sono stati associati a un'incidenza del 30-40% di GVHD acuta grave, simile ai tassi osservati con i regimi mieloablativi. Poiché i regimi non mieloablativi sembrano essere associati a una ridotta tossicità correlata al regime, abbiamo scelto di condurre questo studio di fase I delle cellule Th2 nell'ambito di un regime preparativo immunoablativo (non mieloablativo).

I pazienti con leucemia in remissione clinica e i pazienti con neoplasia linfoide refrattaria saranno candidati per questo protocollo PBSCT allogenico compatibile con HLA. I pazienti riceveranno un nuovo regime di induzione (fludarabina ed EPOCH) e un regime di preparazione al trapianto (fludarabina e cytoxan) progettati per esaurire al massimo le cellule T immunitarie dell'ospite in grado di mediare il rigetto del trapianto. Dopo l'induzione e la chemioterapia del regime preparatorio, i pazienti riceveranno un innesto di PBSC mobilizzato con G-CSF non manipolato. Nei primi sei pazienti che hanno ricevuto questa procedura di trapianto presso l'NCI, il rigetto del trapianto è stato prevenuto con successo (chimerismo del donatore al 100% entro il giorno 30 post-trapianto). È importante sottolineare che la GVHD è stata osservata in tutti e sei i pazienti, con tre dei sei pazienti che hanno sviluppato GVHD grave (grado III). Dato che questo regime raggiunge con successo l'attecchimento del donatore ed è associato a una significativa GVHD, questo regime di trapianto rappresenta un'eccellente impostazione clinica per la valutazione delle cellule Th2.

Utilizzando questo approccio PBSCT allogenico non mieloablativo, eseguiremo uno studio di fase I per valutare la sicurezza e la fattibilità della somministrazione di cellule Th2 del donatore il giorno 1 post-trapianto. Prima del trapianto, le cellule T CD4+ del donatore saranno stimolate in vitro utilizzando condizioni di coltura che supportino la generazione di cellule CD4 del donatore del profilo delle citochine Th2. Se questo studio di fase I dimostra che la somministrazione di cellule Th2 è sicura e fattibile, verrà eseguito uno studio di fase III per valutare se la somministrazione di cellule Th2 riduca l'incidenza e la gravità della GVHD. L'implementazione di successo di questa strategia Th2 ridurrà notevolmente la morbilità e la mortalità associate alla PBSCT allogenica e potrebbe anche rappresentare un approccio al trapianto di cellule staminali in pazienti privi di un donatore compatibile con HLA.