Una valutazione del probiotico nel decorso clinico dei pazienti con cancro del colon-retto

BACKGROUND: Lo studio mirava a determinare gli effetti del consumo di probiotici contenenti sei microrganismi vitali di 3g x 1010 ceppi di Lactobacillus e Bifidobacteria per sei mesi sugli esiti clinici e sul livello di otto citochine infiammatorie correlate al cancro del colon-retto in pazienti con cancro del colon-retto. Tra le citochine studiate c'erano il fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-α), l'interferone gamma (IFN-γ), l'interleuchina 6 (IL-6), l'interleuchina 10 (IL-10), l'interleuchina 12 (IL-12), l'interleuchina 17A (IL -17A), interleuchina 17-C (IL-17C) e interleuchina 22 (IL-22)

METODI:

È stato condotto uno studio randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo che ha coinvolto pazienti a cui è stato diagnosticato un cancro del colon-retto e pianificato per la resezione del colon-retto presso l'Universiti Kebangsaan Malaysia Medical Center (UKMMC)

ESEMPIO DI CALCOLO:

L'effetto dell'intervento è stato descritto utilizzando i rischi relativi e verranno eseguiti intervalli di confidenza al 95% e analisi per protocollo. I dati precedenti indicano che il tasso di fallimento tra i controlli è 0,8. Se il vero tasso di fallimento per i soggetti sperimentali è 0,4, lo studio ha richiesto 22 soggetti sperimentali e 22 soggetti di controllo per poter rifiutare l'ipotesi nulla che i tassi di fallimento per i soggetti sperimentali e di controllo siano uguali con probabilità (potenza) 0,8. La probabilità di errore di tipo I associata a questo test di questa ipotesi nulla è 0,05. Per valutare questa ipotesi nulla verrà applicata una statistica del chi quadrato non corretta. Assumendo un tasso di abbandono del 30%, i pazienti totali richiesti per questo studio interventistico per i pazienti con CRC sono 60 (30 pazienti per ciascun braccio).

VALUTAZIONE CLINICA DEI PAZIENTI:

Sono state identificate le caratteristiche cliniche del paziente tra cui età, sesso, abitudine al fumo, comorbilità, stadio del cancro, sottotipo patologico e sede del tumore. I pazienti reclutati sono stati randomizzati attraverso una semplice randomizzazione in trattamento con probiotici o placebo. Lo smascheramento della prova è stato effettuato al termine dell'analisi dei dati. I pazienti sottoposti a chemioterapia durante il periodo di intervento di sei mesi sono stati esaminati e la diarrea indotta dalla chemioterapia è stata valutata sulla base dei Common Terminology Criteria for Adverse Events versione 3.0 (CTCAEv3.0).

PRODOTTO E PROCEDURA DI TRATTAMENTO:

Il prodotto probiotico coinvolto nello studio era HEXBIO® prodotto da B-Crobes Laboratories Sdn. Bhd., Malesia. HEXBIO® contiene 30 miliardi di unità formanti colonia (CFU) di sei ceppi vitali di Lactobacillus e Bifidobacteria inclusi 107 mg di Lactobacillus acidophilus BCMC® 12130, Lactobacillus lactis BCMC® 12451, Lactobacillus casei subsp BCMC® 12313, Bifidobacterium longum BCMC® 02120, Bifidobacterium bifidum BCMC® 02290 e Bifidobacterium infantis BCMC® 02129. I campioni di placebo prodotti erano identici ai probiotici in termini di gusto e consistenza senza microrganismi vivi. Entrambi i campioni sono stati preparati sotto forma di granuli posti in bustine di alluminio e conservati a temperatura ambiente. HEXBIO® è stato etichettato come AGE 1 mentre il placebo come AGE 2.

Al fine di garantire che gli antibiotici postoperatori somministrati non interferissero con i risultati dello studio, ai pazienti è stato chiesto di consumare il prodotto quattro settimane dopo l'intervento. I pazienti dovevano assumere i prodotti per via orale due volte al giorno per sei mesi. Una buona compliance è stata considerata quando i pazienti hanno consumato più del 70% del totale dei prodotti somministrati. Qualunque cosa inferiore a questo era considerata non conformità.

PRELIEVO DEL CAMPIONE DI SANGUE:

Prima dell'intervento chirurgico, sono stati prelevati cinque ml di sangue da tutti i pazienti reclutati. Il sangue è stato prelevato in BD vacutainer e lasciato coagulare per 30 minuti. È stato quindi centrifugato per 15 minuti a 1000Xg dove il siero separato è stato conservato in congelatore a -80°C fino all'analisi. I passaggi sono stati ripetuti al termine del periodo di intervento di sei mesi.

Saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA):

I campioni di siero sono stati analizzati utilizzando il kit multiplex per test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) secondo le linee guida del produttore (R&D System Human Magnetic Luminex Assay: LXSAHM-08).