Pesquisa sobre o diagnóstico precoce e prognóstico da demência vascular

Cerca de 10% dos sobreviventes de AVC desenvolvem demência dentro de 3 meses após o AVC e mais de 20% dos pacientes com AVC desenvolvem demência nos 3 anos subsequentes. Estudos anteriores documentaram uma estreita relação entre acidente vascular cerebral e doença de Alzheimer (DA). Não há, no entanto, biomarcadores confiáveis ​​para detectar disfunção cognitiva e demência entre pacientes com AVC ou para prever os riscos de demência vascular (DV) e DA entre pacientes com AVC. Há uma clara necessidade de identificar novos mediadores da disfunção cognitiva em pacientes com AVC para fornecer informações sobre a patogênese, adequar o atendimento clínico com base nos riscos e desenvolver novas estratégias terapêuticas.

Tornou-se cada vez mais claro que a transcrição do genoma eucariótico é muito mais difundida e complexa do que se pensava anteriormente. Embora a expressão de RNAs mensageiros (mRNAs) e microRNAs (miRNAs) represente apenas ~1% de todas as espécies transcritas, até 90% do genoma dos mamíferos é transcrito como RNAs longos não codificantes (lncRNAs), um grupo heterogêneo de não transcritos codificantes com mais de 200 nucleotídeos. Os LncRNAs têm se mostrado funcionais e envolvidos em processos fisiológicos e patológicos específicos por meio de mecanismos epigenéticos, transcricionais e pós-transcricionais. Embora os papéis dos lncRNAs em doenças humanas, incluindo câncer e distúrbios neurodegenerativos, estejam começando a surgir, ainda não está claro como a regulação do lncRNA contribui para a disfunção cognitiva e demência em pacientes com AVC. Os exossomos são pequenas vesículas de origem endocítica que são liberadas no meio extracelular e podem participar da transdução de sinais entre as células. Exossomos do sistema nervoso central podem penetrar na barreira hematoencefálica e podem ser coletados do soro. Recentemente, foi demonstrado que os exossomos contêm vários tipos de proteínas e RNA importantes e desempenham papéis na sobrevivência e morte de células pós-doenças. Nossos estudos anteriores se concentram nas respostas inflamatórias específicas em neurônios que recebem lesão isquêmica. Utilizamos amostras de sangue em pacientes com AVC agudo para verificar a relação entre proteínas sinalizadoras específicas nas vias inflamatórias e o resultado funcional pós-AVC. Além disso, nosso projeto em andamento também descobriu que exossomos liberados de neurônios com privação de oxigênio e glicose podem estar relacionados à inflamação pós-AVC.

A espectroscopia NIR é um novo dispositivo revolucionário que permite a medição das concentrações de hemoglobina oxigenada e desoxigenada no tecido. O dispositivo funciona emitindo luz infravermelha próxima (NIR) no tecido em um caminho de difusão conhecido de um detector. Uma vez que a absorção e a dispersão são determinadas, a hipótese de que a hemoglobina é o único absorvedor significativo é aplicada e as concentrações de hemoglobina oxigenada e desoxigenada são calculadas. As aplicações da espectroscopia NIR incluem, entre outras, doenças vasculares periféricas, cirurgia cardiotorácica e vascular e neurocirurgia. Também desenvolvemos um protótipo de espectroscopia de infravermelho próximo. Os achados preliminares e o possível valor clínico dessa tecnologia foram comprovados.

Nesta proposta, buscamos aplicar tecnologia de sequenciamento de última geração para investigar a expressão de lncRNA circulante, bem como de RNAs exossomais em indivíduos com e sem disfunção cognitiva ou demência. Além disso, aplicaremos a espectroscopia de infravermelho próximo (NIRS) para avaliar o fluxo sanguíneo cerebral, o metabolismo e a oxigenação nesses indivíduos. Testaremos a hipótese de que a assinatura de lncRNA/RNA exossomal circulante e as imagens de NIRS podem refletir os estados cognitivos em pacientes com AVC. A precisão, sensibilidade e especificidade do sistema de pontuação de disfunção cognitiva baseado em lncRNA-exosomal RNA-NIRS serão então testadas em uma grande coorte de validação independente. Em seguida, propomos testar a hipótese de que lncRNAs/RNA exossomal circulante e imagens de NIRS podem ser novos biomarcadores prognósticos para prever disfunção cognitiva e demência em pacientes com AVC. Esses estudos também estabelecerão um conjunto de novos biomarcadores diagnósticos e prognósticos baseados em lncRNA em pacientes com AVC para melhorar os cuidados clínicos preventivos e terapêuticos.