Respostas Metabólicas da Metformina e Polimorfismos Genéticos do Gene SLC22A1 na SOP

Objetivos do estudo Objetivo geral Determinação da associação de respostas metabólicas à metformina com polimorfismos do gene SLC22A1 (rs628031 e rs2282143) em mulheres com SOP Objetivos específicos

• Ver as alterações do perfil metabólico (índice de massa corporal, circunferência da cintura, pressão arterial, estado glicêmico, resistência à insulina, peptídeo-c e lipídios) em 24 semanas de terapia com metformina em mulheres com SOP
• Determinação da frequência dos polimorfismos do gene SLC22A1 (rs628031 e rs2282143) em mulheres com SOP
• Categorização de pacientes com SOP de acordo com os polimorfismos do gene SLC22A1 (rs628031 e rs2282143) em grupos selvagens e variantes
• Comparação das alterações metabólicas de 24 semanas de terapia com metformina entre o grupo selvagem vs. variante dos polimorfismos do gene SLC22A1 (rs628031 e rs2282143) em mulheres com SOP

Outras:

• Determinação dos efeitos colaterais de curto prazo da metformina em mulheres com SOP
• Comparação dos efeitos colaterais da metformina em mulheres com SOP com ou sem polimorfismos do gene SLC22A1 (rs628031 e rs2282143)

Materiais e métodos:

Tipo de estudo:

Estudo clínico prospectivo

Local de estudo:

Departamento de Endocrinologia, BSMMU

Período de estudos:

Outubro de 2022 a setembro de 2024

População do estudo:

Mulheres com idade reprodutiva (18 a 35 anos) com SOP

Método de amostragem:

Amostragem intencional/conveniente consecutiva

Tamanho da amostra:

O tamanho da amostra será calculado a partir da seguinte fórmula:

n= {(Zα + Zβ)^2 × (σ1^2 + σ2^2)} ÷ (μ1 - μ2)^2 De um estudo semelhante anterior, a relação glicose/insulina OGTT de 2 horas antes e depois de 24 semanas de terapia com metformina foram 2,3±2,5 e 3,2±3,2 no genótipo variante e 2,0±1,9 e 3,9±2,9 respectivamente no genótipo selvagem de SLC22A1 rs628031. As diferenças médias no genótipo variante e selvagem foram 0,9±0,7 e 1,9±1,0 respectivamente.

Aqui, Zα= 1,96 com nível de confiança de 95%, Zβ= 1,28 com poder de 90%, μ1= alterações médias de GIR após metformina no genótipo variante de rs628031 (AG/GG) = 0,9, μ2 = média de GIR após metformina no genótipo selvagem de rs628031(AA) = 1,9, Assumindo desvio padrão (SD)= 1,5 (σ1=σ2) em ambos os grupos

Número mínimo de amostras a serem estudadas em cada grupo, n= {(1,96 + 1,28)^2 × (1,52 + 1,52)} ÷ (0,9 - 1,9)^2

• {(3.24)^2 × (2.25 + 2.25)} ÷ (1.0)^2
• {10,50 × 4,50} ÷ 1 = 47,25 ÷ 1 = 47,25 Pelo menos 94 pacientes com SOP são necessários para este estudo. No entanto, considerando o abandono, pelo menos 100 pacientes com SOP serão incluídos no estudo. O tamanho da amostra pode ser aumentado, se necessário.

Procedimento do estudo Pelo menos 100 mulheres recém-diagnosticadas em idade reprodutiva (18 - 35 anos) pacientes com SOP serão consecutivamente recrutadas do departamento de Endocrinologia, BSMMU. O consentimento informado por escrito será obtido dos pacientes e solicitado a comparecer em jejum em determinado dia, horário e local, duas vezes por semana. A história relacionada (histórico reprodutivo, pessoal e familiar) será coletada e o exame físico (altura, peso, circunferência da cintura, circunferência do quadril, acne, hirsutismo, acantose nigricans) será feito e todos os dados serão documentados em um questionário semiestruturado pré-testado .

Coleta de amostra de sangue na linha de base:

Serão colhidos cerca de 10 ml de sangue venoso de cada participante com 8 a 12 horas de jejum. Em seguida, será feito um teste oral de tolerância à glicose (OGTT) de 75 g e outros cinco ml de sangue serão coletados após duas horas. Cerca de dois ml de sangue coletados em jejum e duas horas após TOTG serão mantidos em tubo fluorado para dosagem de glicemia no mesmo dia da coleta. Dois ml adicionais de sangue total serão preservados a -70 graus Celsius no departamento de Endocrinologia para polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição de reação em cadeia da polimerase (PCR-RFLP) após a conclusão de todas as análises bioquímicas para evitar viés. Os seis ml de sangue restantes coletados em jejum e os três ml de sangue coletados após TOTG serão mantidos em repouso por 15 minutos para permitir a coagulação. Após a centrifugação, o soro será separado e guardado em eppendorf. Após a devida rotulagem, serão preservados em geladeira a -700C. Análises bioquímicas (glicemia e perfil lipídico) do soro serão feitas no mesmo dia e insulina e peptídeo-c em até sete dias após a coleta.

Intervenções Modificações no estilo de vida Os pacientes serão aconselhados no momento do diagnóstico e um documento por escrito será fornecido.

Dieta

• Será fornecido um gráfico de dieta individualizado preparado por nutricionista
• Sobrepeso/obesidade: Um déficit energético de 500 Kcal/dia de dieta de manutenção de peso
• Outros: Dieta para manutenção do peso Atividade física
• Um mínimo de 150 minutos/semana de atividade física de intensidade moderada (caminhada rápida a um ritmo de 6 km/h) com atividades de fortalecimento muscular em 2 dias/semana não consecutivos
• atividade seja realizada em pelo menos 10 minutos ou cerca de 1000 passos, com o objetivo de atingir pelo menos 30 minutos diários pelo menos 5 dias por semana

Prescrição de metformina Ingredientes de cada comprimido de metformina Cada comprimido de metformina contém metformina 500 mg HCl, BP junto com ingredientes inativos de povidona, celulose microcristalina, croscarmelose sódica e estearato de magnésio. Além disso, o revestimento dos comprimidos contém polietilenoglicol, álcool polivinílico, dióxido de titânio, talco, goma acácia, maltodextrina, propilenoglicol e aromas naturais.

Inventário Todos os comprimidos de metformina serão dispensados ​​periodicamente aos participantes do estudo pelo pesquisador na linha de base e na 1ª visita (após a semana 1) e na 2ª visita de acompanhamento após 12 semanas de terapia de manutenção com metformina (1500 mg/dia). Os comprimidos de metformina serão preservados de acordo com as instruções do fabricante. O prazo de validade e a qualidade dos medicamentos serão verificados periodicamente.

Fase inicial A metformina será prescrita em 500 mg uma vez ao dia após o jantar e aumentará para 1.500 mg/dia em três doses divididas após as refeições principais dentro de duas semanas após o início. Os pacientes serão solicitados a apresentar um gráfico de conformidade com o medicamento e efeitos colaterais uma semana após o início de 1.500 mg/dia de metformina. Os pacientes que não forem capazes de tolerar 1500 mg/dia serão excluídos do estudo para análise das respostas metabólicas.

Dose de manutenção: 1500 mg/dia em três doses divididas por 24 semanas Acompanhamento: Os pacientes serão solicitados a comparecer a três consultas de acompanhamento após 1, 12 e 24 semanas de terapia de manutenção com metformina com um período de janela de duas semanas em ambos os sentidos. Durante a 1ª consulta de acompanhamento (após 1 semana), a adesão ao medicamento e os efeitos colaterais dos pacientes serão monitorados; o estado clínico juntamente com o estilo de vida e a adesão ao medicamento e os efeitos adversos serão documentados após 12 semanas (2ª visita de acompanhamento). Após 24 semanas (3ª visita), os perfis metabólicos bioquímicos do paciente também serão feitos com as informações clínicas acima mencionadas.

Coleta de amostra de sangue após 24 semanas Cerca de oito ml de sangue venoso após 24 semanas de terapia com metformina com 8 - 12 horas de jejum serão coletados para medir FBG, HbA1C, insulina, peptídeo c e perfil lipídico e um OGTT de 75 gm seguido de cinco ml de sangue será coletado para dosagem de glicose e insulina.

Conformidade com medicamentos:

Ele será monitorado por telefone semanalmente durante as primeiras duas semanas e depois a cada visita ao pesquisador. Os pacientes serão solicitados a vir com blisters vazios de metformina. Um livro de registro será mantido para monitorar o cumprimento adequadamente. Os pacientes com adesão ao medicamento <95% em qualquer momento do estudo serão excluídos da análise de respostas metabólicas.

Monitoramento de eventos adversos:

Em cada visita, os pacientes receberão um diário de eventos adversos (EA) para anotar eventos gastrointestinais (GI) pré-especificados. Eles também serão questionados sobre qualquer efeito adverso grave (SAE) ou outro EA além do evento gastrointestinal. Todos os AE e SAE serão registrados no formulário de EA fornecido e serão preservados nos arquivos dos pacientes. Os pacientes serão aconselhados a usar estritamente a contracepção de barreira. A ALT sérica e a creatinina também serão medidas após 24 semanas de terapia com metformina.