Отслеживание прогностических факторов пневмонии COVID-19 (NIKE_C19)

Сообщалось, что почти половина пациентов, госпитализированных с пневмонией Covid-19, на момент поступления имеют пожилой возраст или сопутствующие заболевания.

В частности, артериальная гипертензия присутствовала в 30 % случаев, диабет — в 19 %, ишемическая болезнь сердца — в 8 % и хроническая обструктивная болезнь легких — в 3 % больных.

Удивительно, но в двух крупных исследованиях, опубликованных в «Ланцете» и в «Медицинском журнале Новой Англии», вес испытуемых, а также их индекс массы тела (ИМТ) не учитывались. Однако ожирение, само по себе или в сочетании с диабетом, может быть основным фактором предрасположенности к инфекции Covid-19.

Ожирение связано с системным вялотекущим воспалением с повышением циркулирующих уровней многих провоспалительных цитокинов, таких как IL-1β и IL-6.

Принадлежащие врожденной иммунной системе, но имеющие общие характеристики с адаптивным иммунитетом, естественные клетки-киллеры (NK) активируются в белой жировой ткани субъектов с ожирением, где они пролиферируют и вызывают накопление макрофагов M1.

NK-клетки являются первой линией защиты от вирусных инфекций. Они опосредуют цитолиз или апоптоз инфицированных вирусом клеток. Кроме того, NK-клетки выделяют провоспалительные цитокины с противовирусной активностью.

У лиц с ожирением снижается не только частота NK-клеток, но и снижается их цитотоксическая способность.

Более низкая активность NK-клеток также присутствует у субъектов с диабетом 2 типа. Следовательно, субъекты с ожирением и/или диабетом 2 типа должны иметь повышенную восприимчивость к вирусным инфекциям.

Было показано, что гипертония связана с инфекцией Covid-19 в 24-30% случаев, тогда как диабет присутствовал у 12-22% пациентов.

В настоящее время признано, что липиды выполняют многочисленные незаменимые клеточные функции, и некоторые из них участвуют в активации иммунных активных клеток. Кроме того, липиды участвуют в нескольких этапах цикла репликации вируса, и в недавней статье показано, как метаболическое ремоделирование липидов хозяина в значительной степени связано с распространением патогенного для человека коронавируса.

Липиды проявляют как провоспалительную, так и противовоспалительную активность и взаимодействуют с иммунным ответом посредством активации липид-реактивных Т-клеток. Церамиды (Cer), фосфолипиды или сфинголипиды, а также аминокислоты и свободные жирные кислоты (FFA) активируют провоспалительные пути, что приводит к активации толл-подобных рецепторов-4 (TLR-4) и лизофосфатидилхолинов (LPC), которые играют важную роль. роль в клеточной пролиферации и активации Т-клеток.

Фактор активации тромбоцитов (также известный как PAF, PAF-ацетер или AGEPC, ​​то есть ацетил-глицерил-эфир-фосфорилхолин) также может быть вовлечен. PAF является мощным активатором фосфолипидов и медиатором многих функций лейкоцитов, агрегации и дегрануляции тромбоцитов, воспаления и анафилаксии. Кроме того, он является важным медиатором бронхоконстрикции.

Мы предполагаем, что некоторые липиды могут служить биомаркерами пациентов, у которых разовьется более серьезная реакция на вирус. Измерение липидомного профиля плазмы поможет выявить субъектов с повышенным риском развития тяжелого легочного заболевания и поможет выбрать целевую стратегию лечения.

Первичной конечной точкой нашего проспективного обсервационного исследования является оценка скорости выздоровления пациентов с диагнозом пневмонии Covid-19. Среди других вторичных конечных точек мы намерены найти предикторы времени до клинического улучшения или выписки из больницы у пациентов с пневмонией, вызванной Covid-19.

Клиническое улучшение определяется как уменьшение тяжести пневмонии Covid-19, выраженное в виде перехода от более тяжелого состояния к менее тяжелому. Возможные исходы 1. Смерть; 2. госпитализация, требующая экстракорпоральной мембранной оксигенации и/или инвазивной искусственной вентиляции легких; 3. госпитализация, требующая назальной высокопоточной оксигенотерапии и/или неинвазивной искусственной вентиляции легких; 4. госпитализация, требующая дополнительного кислорода; 5. выписка из стационара.

Вторичные конечные точки будут включать печеночную, почечную или полиорганную недостаточность, сердечную недостаточность, эффективность различных фармацевтических препаратов против Covid-19 и развитие предикторов и биомаркеров тяжести инфекции Covid-19.

Методы. Перед началом исследования протокол будет представлен и одобрен местными комитетами по этике в Fondazione Policlinico Universitario A. Gemelli IRCCS, Католический университет, Рим, Италия. Перед регистрацией каждый субъект подпишет информированное согласие.

Критерии включения: госпитализированные субъекты обоих полов в возрасте 18 лет и старше с диагнозом пневмония, подтвержденным визуализацией грудной клетки и насыщением кислородом (SaO2) ≤ 94% в окружающем воздухе, положительный результат теста на Covid-19, информированное согласие на сбор данных от пациента. или от законного представителя пациента, если пациент слишком болен, чтобы дать согласие.

Критерии исключения: возраст младше 18 лет, беременность или кормление грудью. Образцы мазка из носоглотки будут взяты для количественной полимеразной цепной реакции в режиме реального времени для постановки диагноза Covid19 (2 повторных теста).

Собранные данные включают время появления симптомов (кашель, лихорадка, одышка, конъюнктивит, диарея, астения, артралгия), возраст, пол, рост, вес, образование, алкоголь и курение, заболеваемость, уровень глюкозы в плазме, креатинин, трансаминазы, γ-ГТ, общее холестерин, ЛПВП-холестерин, триглицериды, общий анализ крови, D-димер, дегидрогеназа молочной кислоты (LDH), высокочувствительный С-реактивный белок (hs-CRP), креатинкиназа (CK), ферритин, альбумин, HbA1c, рентген грудной клетки , КТ грудной клетки, терапия пневмонии, другие виды лечения, включая антигипертензивные и антигипергликемические средства, измерение температуры тела, артериального давления и скорости потока кислорода или другие виды лечения кислородом.

Пять мл плазмы, разделенные на аликвоты по 1 мл каждая, также будут получены и храниться при температуре -80°C анонимным образом для будущего анализа, включая третьи стороны.

Первичная конечная точка Первичная конечная точка исследования заключается в сравнении средней скорости выздоровления у пациентов с диагнозом пневмония Covid-19, у которых на момент госпитализации имеются осложнения (такие как диабет, ожирение, сердечно-сосудистые заболевания, гипертония). или дыхательная недостаточность), со средней скоростью выздоровления у пациентов без каких-либо из вышеперечисленных осложнений.

Вторичные конечные точки

Вторичной конечной точкой исследования является сравнение кривых выживаемости (время до улучшения) в двух группах (пациенты с осложнениями и без) и среди пациентов с различными типами осложнений:

1. Гипертония
2. Ожирение и/или диабет 2 типа
3. Сердечно-сосудистые заболевания
4. Хроническая обструктивная болезнь легких
5. Ни одно из вышеперечисленных заболеваний Другими конечными точками являются печеночная, почечная или полиорганная недостаточность, сердечная недостаточность, эффективность различных фармацевтических препаратов против Covid-19 и развитие предикторов и биомаркеров тяжести инфекции Covid-19.

Размер выборки Расчет размера выборки (20) выполнен при следующих гипотезах: скорость выздоровления пациентов без осложнений предполагается равной 98%; средний показатель выздоровления больных с одним из следующих осложнений: сахарным диабетом, ожирением, сердечно-сосудистыми заболеваниями, артериальной гипертонией или хронической дыхательной недостаточностью предполагается равным 88%. При этом предполагается, что соотношение между размерами двух групп составляет k=Nc/Nwc=1, при допущении, что 50% пациентов с пневмонией Covid-19 имеют одно из вышеперечисленных осложнений. Мы, по сути, в том числе избыточный вес и ожирение. Для достижения степени 0,80 при отношении k, равном 1, вероятности улучшения, равной pc = 0,88 и pwc = 0,98, и с ожидаемой частотой различий 0,10, требуется размер выборки 198 пациентов, если α равно 0,05.

Статистика Связь между выздоровлением и группами пациентов будет проверена с помощью точного теста Фишера. Регрессия пропорционального риска Кокса будет использоваться для сравнения кривых выживаемости (время до улучшения) среди изучаемых групп с поправкой на проводимую терапию и на все собранные количественные переменные. Количественные переменные, измеренные при поступлении в больницу, будут сравниваться между группами с использованием ANOVA. В однофакторном анализе категориальные переменные, такие как пол, образование, потребление алкоголя и курение, будут проанализированы с помощью критерия хи-квадрат для изучения их связи с выздоровлением, а модель логистической регрессии будет использоваться для проверки возможных количественных предикторов восстановление. Затем будет использоваться многопараметрическая логистическая модель с поэтапной процедурой выбора для проверки всех переменных, значимых для однофакторного анализа.