Studie av effekten av medfödd på det inflammatoriska svaret på endotoxin

Denna forskningsstudie kommer att undersöka rollen av medfödd immunitet på det inflammatoriska svaret hos monocyter och makrofager på endotoxin. Cirka 1450 friska deltagare i åldern 18 år och äldre kommer att identifieras och rekryteras från Environmental Polymorphism Registry (EPR). EPR är ett långsiktigt projekt för att samla in och lagra upp till 15 000 DNA-prover för användning i forskningsstudier från individer i North Carolina Triangle Region. Det förväntas att cirka 50 % av deltagarna som kontaktas kommer att anmäla sig och cirka 15 % av de inskrivna deltagarna kommer att dra sig ur.

Denna kontrollerade, observerande genassocieringsstudie kommer att rekrytera deltagare på basis av genotyp och sedan observera fenotypen för varje deltagare. Det finns flera SNP av intresse i generna TIRAP, MyD88, ABCA1, CD14, CD44, ITIH3, ITIH4, TLR4, TNFa, TLR5, IRGM och APOL1. Dessutom finns det alleler av intresse i genen ApoE. Dessa alleler tillsammans anses vara en polymorfism. För varje polymorfism av intresse kommer en separat grupp av deltagare att rekryteras (inklusive heterozygot och homozygot för både de mindre och större allelerna för varje SNP). Maximalt 200 ml blod kommer att erhållas från varje deltagare under ett besök som varar cirka 1-1,5 timmar. Blodmonocyter kommer att isoleras från de donerade blodproverna och odlas för att erhålla makrofager. Makrofagerna kommer att exponeras ex vivo för ett endotoxin (LPS) och för PAM3CSK4 för att bestämma cellsvar beroende på genotyp. I studier av APOL1 kommer även ett urinprov att tas för att utvärdera proteinfiltrering.

Det primära målet är att fastställa associationer mellan utvalda polymorfismer i gener [TIRAP (TIR Associated Protein), MyD88 (Myeloid Differentiation Primary Response Protein 88), ApoE (Apolipoprotein E), ABCA1 (ATP Binding Cassette Transporter A1), CD14, CD44, ITIH3 , ITIH4, TLR4, TNFa, TLR5, IRGM och APOL1] och kvantitativa in vitro inflammatoriska funktioner av två celltyper, makrofagen och neutrofilen. De primära målen för denna studie för båda celltyperna kommer att vara nivåer av 6 cytokiner TNF alfa, IL-6, MIP-2, IL-8, MCP-1 och IFN-beta (ELISA) inducerade av LPS och av PAM3CSK4 plus baslinje cytokinnivåer (ingen exponering för LPS eller PAM3CSK4). Urinnivåer av protein kommer att kvantifieras i vissa studier som ett mått på tidig njurdysfunktion.

Vi hoppas att resultaten av denna studie kan leda till upptäckten av viktig information om rollen av MDC1 (Mediator of DNA damage Checkpoint protein 1) i mänsklig sjukdom, vilket potentiellt kan identifiera nya mål för framtida studier.