ALS 환자의 sCD163

서론 근위축성 측삭 경화증(ALS)은 진행성 근육 약화로 심각한 장애와 결국 사망에 이르게 하는 치명적인 질병입니다. 그것은 운동 신경 질환의 가장 흔한 형태이며 상부 및 하부 운동 신경 모두를 포함합니다. 증상이 나타난 후 사망할 때까지 평균 생존 기간은 약 3년입니다.

진단은 임상적 특징과 근전도 이상에 의존하며 이는 질병 경과 후반에 발생할 수 있으므로 질병 초기 단계에서 ALS 진단을 확인하거나 배제할 수 있는 진단 검사를 식별할 필요가 있습니다.

ALS는 신경퇴행성 질환이지만 병인은 잘 확립되어 있지 않습니다. 그 원인은 아마도 유전적 요인과 우세하게 유전되는 c9orf72 유전자 및 시냅스 간극에서 성상세포(EAAT2-수용체)의 손상된 글루타메이트 섭취와 그에 따른 글루타메이트 흥분 독성에 관한 중요한 분자 경로의 기능 장애 사이의 다인자적이고 복잡한 상호작용일 것입니다. 이 글루타메이트 흥분독성은 산화 스트레스, 전압 관문 지속성 나트륨 채널 및 소교세포 활성화를 유발하여 전염증성 사이토카인을 분비할 수 있습니다.

보다 최근에는 신경 염증이 ALS 발달에 중요한 역할을 한다는 연구 결과가 있습니다. 2012년의 연구(돌연변이 슈퍼옥사이드 디스뮤타제(mSOD1)를 과발현하는 ALS의 마우스 모델)는 미세아교세포가 어떤 표현형의 미세아교세포가 활성화되었는지에 따라 운동 뉴런을 보호하고 손상시킬 수 있음을 문서화했습니다. 그것은 보호적인 M2 표현형 상태(질병 발병)와 신경독성 M1 표현형 상태(질병 말기) 사이의 연속체인 것처럼 보입니다. 또한, 질병 발병 시 마우스는 Ym1, CD163 및 뇌 유래 신경영양 인자(M2의 마커)를 더 높은 수준으로 발현했습니다.

다른 분자 메커니즘 중에서 미토콘드리아의 구조적 및 기능적 이상, 축삭 수송 시스템의 손상 및 엔도좀 트래피킹 및 소포체 스트레스 반응의 유도는 ALS에서 이차적인 사건으로 보이지만 언급할 가치가 있습니다. 최종 결과는 대뇌 피질, 뇌신경 핵, 척수의 전각 및 피질 척수로의 운동 뉴런의 퇴행입니다. 현재 사용 가능한 유일한 치료법은 ALS 환자의 심각한 호흡기 문제의 수명 또는 발병 시간을 연장하는 것으로 입증된 Riluzole입니다. Riluzole의 작용 방식은 여전히 ​​결정되어야 하며, 역학은 시냅스전 뉴런에서 글루타메이트 방출을 억제하는 것일 수 있습니다. (1,2,3,4,5,6) 염증 과정은 이차적인 사건인 것처럼 보이지만 신경 퇴화에 중요한 것으로 보입니다. 한 연구에서 중추 신경계 표적 글루코코르티코이드를 통해 ALS 병리학을 감소시키고자 했으며, ALS 마우스 모델에서 뇌간 병리학을 감소시키는 데 성공했습니다. 다양한 바이오마커 중에서 인터류킨-1 계열 사이토카인과 같은 염증성 마커도 테스트되었습니다. 이들 중 총 인터루킨-18, 내인성 억제제 인터루킨-18BP 및 활성 형태의 사이토카인(유리 인터루킨-18)만이 ALS 환자에서 대조군보다 유의하게 더 높았습니다. 사이토카인은 ALS의 다른 임상적 형태 또는 질병의 임상적 설정과 상관관계가 없는 것으로 나타났습니다. 사이토카인은 또한 신경 보호제로 시도되었습니다. Erythropoietin(EPO)은 순환하는 적혈구의 수를 유지하는 성장 인자로 알려져 있습니다. 그러나 EPO의 생물학적 역할은 뇌의 뉴런, 소교 세포 및 성상 세포와 같은 다른 세포로 확장되었습니다. EPO는 질병이 진행되는 동안 전염증성 사이토카인을 억제하는 것으로 보이며, 후기 증상 단계까지 항염증성 사이토카인을 유지하고 최종적으로 증상 발병을 지연시키고 운동 뉴런의 수를 보존하는 것으로 보입니다. (7,8,9,10) 분화 클러스터 163(CD-163) - ALS에서 염증을 모니터링하는 새로운 방법? CD-163은 단핵구-대식세포 활성화를 표시하는 스캐빈저 수용체(거대분자를 인식하고 흡수함)입니다. CD163은 대식세포에서 헤모글로빈-합토글로빈 복합체의 수용체로 작용합니다. 수용체의 가용성 형태는 sCD163이라고 불리며 혈장 및 뇌척수액에서 발견되며 광범위한 염증성 질환에서 상향 조절되는 것으로 밝혀졌습니다.

대식세포 활성화 증후군, 혈구식세포 증후군 및 급성 간부전과 같은 질병에서 값이 크게 증가(>20mg/l)합니다. 또한, sCD163의 수준은 질병의 활성을 반영합니다. 값이 증가하고 높은 환자는 예후가 좋지 않은 것으로 나타났습니다. 증가된 값(5-20 mg/l)은 간 질환, 패혈증 및 고셔병에서 나타납니다. 수치가 10mg/l보다 큰 패혈증 환자는 치명적인 결과를 초래할 위험이 10배 더 높습니다. 약간 증가한 값(3-5 mg/l)은 감염 상태의 염증 및 암에서 종종 나타납니다. (11,12,13,14) 파일럿 데이터 연구자 실험실에서 파일럿 데이터(Kallestrup M et al, 미공개 데이터(15))는 유망한 결과를 보여주었습니다. 대조군에 비해 ALS 환자 7명에서 뇌척수액의 sCD163 수치가 증가했습니다. 또한, ALS가 확실하고 가능성이 있는 환자 모두 sCD163 수치가 증가합니다. 이러한 결과는 질병의 초기 및 후기 단계에서 ALS 환자를 평가하는 더 큰 연구가 수행되어야 함을 시사합니다.

가설 ALS 환자는 건강한 대상에 비해 뇌척수액과 혈청에서 상향 조절된 sCD-163 수준을 가지며 이 수준은 질병의 중증도와 관련이 있습니다.

목적 ALS 환자의 뇌척수액과 혈청 내 sCD-163 농도를 대조군(불특정 신경학적 증상이 있는 환자)과 비교하여 정의합니다. 또한 척수액의 단백질, 포도당, 면역글로불린 G 지수 및 기타 요인의 농도를 정의합니다.

방법 연구 모집단 연구 모집단은 Aarhus 대학 병원 신경과에서 ALS가 확립되고 의심되는 모든 환자가 될 것입니다.

참여하는 확립된 ALS 환자는 이 연구의 일부로 요추 천자를 받게 됩니다. ALS로 고통받는 것으로 의심되는 피험자는 진단 작업의 일부로 요추 천자를 받고 뇌척수액의 sCD163 수준이 분석됩니다.

Aarhus University Hospital 신경과에는 약 80명의 ALS 환자가 있습니다. 우리는 이 환자들 중 50명이 참여할 의향이 있고 포함될 자격이 있을 것으로 예상합니다(31-08-2015). 또한 연구 기간 동안 Aarhus 대학 병원 신경과에서 ALS로 진단될 8명의 환자를 포함할 것으로 예상합니다.

대조군에는 이 연구와 관계없이 진단 작업의 일환으로 오르후스 대학 병원 신경과에서 요추 천자를 받을 다양한 신경학적 증상 또는 질병이 있는 환자가 포함됩니다. 최종 분석에서는 신경계 질환이 없거나 척수액과 관련이 없는 것으로 여겨지는 신경계 질환이 있는 대조군만 포함될 것입니다. 우리는 40-50개의 컨트롤을 포함할 것으로 예상합니다.

모집 참가자는 연구에 대한 서면 및 구두 정보를 받게됩니다. 구두 설명은 Aarhus University Hospital 신경과에서 진행됩니다. 또한 팜플렛 "Forsøgspersoners rettigheder i et sundhedsvidenskabeligt forskningsprojekt"도 배포됩니다. 신경과의 컨설턴트는 ALS가 의심되는 환자에게 정보를 제공합니다. 확립된 ALS가 있는 대조군과 환자는 신경과의 의사와 연구생인 Anne Sofie Vinther로부터 정보를 받게 됩니다.

동반자 동반이 가능하며 참여자에게는 최소 24시간의 참여 고려 시간이 제공됩니다.

서면 정보 자료로 제공되는 환자 기록에 대한 액세스가 요청됩니다.

연구 참여의 단점에 대한 새로운 지식이 나타나면 참가자에게 즉시 알립니다. 또한 연구 중 평가가 환자의 일반적인 건강 상태에 대한 지식을 제공하는지 여부를 환자가 명확하게 거부하지 않는 한 참가자에게 알립니다.

연구가 끝날 때까지 참가자는 연구 코디네이터에게 연락하여 연구 결과에 대한 정보를 얻을 수 있습니다.

모든 참가자는 연구 프로젝트에 대한 정보를 받고 참여에 대한 내용을 제공하라는 요청을 받습니다. 참여는 5-6ml의 척수액과 sCD-163 분석에 사용될 혈액 샘플(30ml)의 추출을 의미합니다.

참가자는 어떤 형태의 지불도 받지 못하지만 교통비를 보상받을 수 있습니다.

포함 기준:

ALS ALS 진단을 받은 환자 및 ALS가 의심되는 환자. 연령 >18 제어 연령 >18

제외 기준(모든 그룹에 대해):

신경 감염을 포함한 급성 감염 sCD163 수치가 상승한 것으로 알려진 기타 장애 요추 천자를 금하는 장애 또는 치료. 기타 확립된 신경학적 장애. 진단 워크업 동안 그리고 결과적으로 연구 프로젝트에서 우리는 환자의 정신적, 신체적 상태를 존중하면서 이를 수행할 것입니다. 연구 프로젝트는 개인정보 처리에 관한 법률에 따라 수행되며, 나아가 해당 프로젝트는 Midtjylland 지역 공통 지역 정보 시스템에 제출됩니다.

분석 척수액과 혈청은 Aarhus University Hospital의 임상 생화학과에서 분석됩니다. 척수액과 혈액 샘플은 Aarhus University Hospital의 연구 바이오뱅크에 보관됩니다. 모든 샘플이 수집되면 모든 생화학 분석이 수행될 예정입니다. 프로젝트가 끝나면 샘플은 의사 익명으로 처리됩니다. 이 분야에서 새로운 지식을 개발할 가능성으로 인해 샘플은 이 프로젝트가 완료된 후 5년 후에 바이오뱅크에 보관됩니다.

척수액 및 혈청 내 sCD-163의 농도는 오르후스 대학 병원 임상 생화학과에서 이미 확립된 기술로 분석될 것입니다.

검사 검사는 병력과 임상 검사로 구성됩니다. 우리는 ALS 환자의 장애 진행을 모니터링하기 위한 평가 도구인 개정된 ALS 기능 평가 척도(ALSFRS-R)를 사용합니다. 과거의 병력, 약물의 실제 사용, 생화학 분석 및 뇌 영상 결과, ALSFRS-R 결과, 근전도 검사 결과, 임상 검사의 이상 및 진단 작업의 결론.

전력 및 통계 분석 조사자의 파일럿 데이터(n=7)는 ALS 환자의 뇌척수액에서 CD163 수준이 50% 증가한 것으로 나타났기 때문에 40명의 환자를 포함하면 혈청에서도 더 작은 차이와 CD163 사이의 관계를 감지할 수 있을 것으로 예상됩니다. 및 임상 소견.

프로그램 ANOVA는 통계 분석에 사용됩니다. 데이터의 정규 분포에 따라 파라메트릭 또는 비모수 테스트가 사용됩니다. 모든 통계 분석에서 5% 유의 수준이 사용됩니다.

전망 ALS에서 예후 바이오마커를 식별하는 것이 중요합니다. ALS의 병리학은 아직 알려지지 않았지만 염증이 그 과정에서 중요한 요소인 것 같습니다. 여러 연구에서 sCD163은 광범위한 염증성 질환에서 상향 조절되는 것으로 나타났으며 조사자들과 함께 파일럿 데이터를 약속하면서 sCD163은 ALS의 잠재적 마커입니다. (4) ALS에서 약물 효능의 평가는 ALS 등급 척도 개정(ALSFRS-R)의 활용을 통한 질병 진행률 측정에 의존하는 임상적 기반을 유지합니다. 이러한 임상 척도는 특히 질병 진행의 초기 단계에서 둔감할 수 있습니다. 신뢰할 수 있는 정량화 가능한 바이오마커의 개발은 ALS에서 아직 파악하기 어렵고 예후 바이오마커의 개발은 개발 초기 단계에서 치료제를 효과적으로 평가하는 데 중요합니다.

윤리적 고려 이 연구 프로젝트에 참여하는 환자에게 수행되는 테스트는 요추 천자 및 혈액 샘플입니다.

그것은 요추 천자 수행에 약간의 위험을 수반하며, 요추 천자 후 두통이 발생률이 12%로 젊은 환자에서 가장 흔합니다. 대부분의 경우 두통은 지속 시간이 짧고 혈액 패치를 적용하면 치유될 수 있습니다. 또한 요추 천자는 일시적인 요추 통증과 피하 혈액 축적을 유발할 수 있습니다. 척수 신경 압박으로 인해 경막외 공간에서 출혈 위험이 매우 낮고 감염(수막염 또는 수막뇌염) 위험이 훨씬 더 낮습니다. 그러나 요추 천자는 Aarhus University Hospital의 신경과에서 일상적인 진단 작업의 일부라는 점을 강조하는 것이 중요합니다.

이 프로젝트와 관련된 낮은 위험, 질병에 대한 나쁜 예후, 미래의 ALS 환자에 대한 진단 및 치료 개선 가능성을 고려할 때 우리는 이 프로젝트가 윤리적으로 수용 가능하다고 생각합니다.

간행물 이 연구의 긍정적, 부정적 및 결정적이지 않은 결과가 출판될 것입니다. 결과는 영어로 작성된 피어 리뷰 저널에 게시하기 위해 기사로 작성됩니다.