제2형 당뇨병 환자의 온찜질 및 근력운동 효과

재료 및 방법 연구 설계 및 설정 연구는 전향적, 무작위, 이중 맹검, 병렬, 비열등성 임상 시험이며 브라질 남부에 있는 대학인 Universidade Federal do Rio Grande do Sul에서 수행됩니다. 이 연구 프로토콜은 SPIRIT 권장 사항을 준수합니다.

개입 포함 기준을 충족하는 지원자는 연구에 안내를 받고 시험에 등록하기 전에 서면 동의서에 서명하도록 요청받습니다. 참가자는 개입 그룹 통제(C), RT 또는 HT로 무작위 배정됩니다. 통제 그룹에서 참가자는 개입을 받지 않습니다. 중재 그룹 RT에서 참가자는 일주일 중 연속되지 않는 3일 동안 체육관에서 감독하에 운동을 수행합니다. 각 세션은 약 60분 동안 지속되며 워밍업, 저항 훈련 및 쿨다운으로 구성됩니다. 모든 세션은 자격을 갖춘 스포츠 및 운동 과학자가 12주 동안 진행합니다.

RT 프로그램은 체육관 장비, 프리 웨이트 및 체중(기능적 운동)을 기본 저항으로 사용하는 상체 및 하체 운동의 조합으로 구성됩니다. 12주 RT는 각각 4주씩 3개의 중간 주기로 나뉩니다(표 1에서 세트, 반복 및 간격에 대한 자세한 내용 참조). 운동에는 레그 프레스, 니 익스텐션 및 레그 컬, 바이셉스 컬, 트라이셉스 익스텐션, 랫 풀 다운, 숄더 프레스, 벤치 프레스 및 복부 크런치가 포함됩니다. 교육 기간이 시작되기 전에 피험자는 운동 부하가 개별적으로 테스트되었을 때 교육 프로그램 중에 추가로 수행할 운동을 연습하기 위해 친숙화 세션을 완료합니다. 저항 훈련은 최대 12회에서 15회 반복(총 12-15회 반복을 수행할 수 있는 가장 무거운 중량) 사이의 강도로 운동당 2-3세트를 사용하여 수행됩니다. 기능적 운동의 강도는 OMNI scale로 조절하였다. 각 세션은 60분 동안 진행됩니다.

HT 그룹 참가자는 이전 방법에 따라 전신 온열 치료를 받게 됩니다. 참가자는 일주일 중 연속되지 않는 3일 동안 처음에 55.0oC로 설정된 환경 챔버에 수용됩니다. 각 세션은 60분 동안 진행됩니다. 세션 동안 직장 온도, 심박수, 혈압 및 열 불쾌감이 지속적으로 측정됩니다.

임상시험 유지 전략 참가자는 일주일에 한 번 대면 방문을 통해 부작용을 모니터링해야 합니다. 또한 전화 통화나 메시지는 예정된 방문 또는 놓친 방문과 관련하여 참가자를 기억하는 데에도 사용됩니다.

모집 및 참가자 일정 연구 모집 기간은 2023년 4월부터 2025년 12월까지입니다. 참가자는 신문, 전자 및 소셜 미디어에 발표하여 연구에 참여하도록 초대됩니다. 그림 1은 연구 설계의 흐름도를 보여줍니다.

준수 운동 프로그램에 대한 준수는 권장 또는 처방된 운동 용량의 최소 80%를 충족하는 것으로 분류되었습니다. 80% 또는 36회 이상의 교육 프로토콜 준수를 입증하는 모든 참가자는 준수한 것으로 간주됩니다. 참가자는 준수율이 80% 미만인 경우 비지속 또는 부분 준수로 분류됩니다.

통계적 고려 사항 개입 후 그룹 간의 혈장 HSP 수준에 대한 운동 효과를 평가하기 위해 검정력 80%, 유의 수준 5%, 효과 크기(Cohen's F)를 0.4로 가정했습니다. 탈락률을 10%로 추정했고 계산된 총 수는 각 그룹에서 22명이었습니다.

무작위로 할당된 참가자의 데이터는 고정 효과로 등록된 치료, 시간 및 치료 시간 상호작용과 함께 1차 선택으로 치료 의도 원칙과 프로토콜 당 원칙에 따라 분석됩니다. 각 철회 사유와 내용을 정성적으로 문서화하겠습니다. 데이터의 정규성은 Shapiro-Wilk 테스트에 의해 테스트됩니다. 평균 및 표준 편차는 파라메트릭 연속 변수와 비모수 변수의 중앙값 및 사분위수 범위를 설명하는 데 사용되며 절대 및 상대 빈도는 범주 변수에 사용됩니다. 분산 분석(ANOVA)은 결과의 최종 값을 비교하는 데 사용됩니다. 치료 효과(그룹, 시간 및 그룹 상호 작용)는 GEE(Generalized Estimation Equations)에 이어 Bonferroni 사후 테스트(P < 0.05)를 사용하여 추정됩니다. 일상적인 약물 요법, 성별 및 연령이 1차 및 2차 결과에 미치는 영향을 조사하기 위해 다중 선형 회귀 분석(역방향 방법)을 수행합니다. 사회과학 전문가용 통계 패키지 소프트웨어 버전 20.0(IBM Corp., Armonk, NY, USA)이 이러한 분석에 사용됩니다.

할당 참가자는 컴퓨터에서 생성된 임의 번호 순서에 따라 그룹에 무작위로 할당됩니다. 이 시퀀스는 Excel Microsoft 프로그램에서 1:1 비율로 얻어지며 계산된 총 수를 완성하기 위해 8명 또는 6명의 참가자 블록이 있습니다. 할당 코드가 포함된 봉인된 봉투는 연구 참여 순서에 따라 참가자가 있는 상태에서 치료 시작 시에만 개봉됩니다.

개입의 특성으로 인해 운동 세션을 수행하는 연구원과 참가자는 눈이 멀지 않습니다. 평가자 마스킹을 보장하기 위해 피험자는 할당된 그룹을 생략하고 결과 평가 세션 동안 개입에 대해 이야기하지 않도록 요청받습니다. 어떤 이유로든 의도하지 않은 맹검 해제의 경우, 해당 연구원은 책임 연구원에게 이를 알립니다.

데이터 수집 및 관리 연령, 성별, 결혼 여부, 학력, 당뇨병 기간, 당뇨병 가족력 및 자가 보고 신체 활동을 포함하여 참가자의 사회 인구학적 및 임상적 특성을 얻기 위해 설문지가 적용됩니다. T2DM에 대한 약물은 기준선과 연구가 끝날 때 등록됩니다.

체중, 키, 계산된 체질량 지수(kg/m2), 허리 및 엉덩이 둘레 변화를 포함한 인체 측정 측정값이 첫 번째 및 마지막 방문 시 기록됩니다. 무게는 최대 150kg의 용량과 100g의 정밀도로 디지털 보정 저울에서 측정됩니다. 높이는 2m/0.1cm(Urano®, Canoas, Brazil) 용량의 저울에 부착된 수직 stadiometer에 의해 결정됩니다. 허리와 엉덩이 둘레는 비탄성 미터법 테이프(2m/0.1cm)로 측정합니다. 전체 신체 구성은 이중 에너지 X선 흡수측정법(DEXA 스캔 - Lunar iDXA, GE Healthcare, Buckinghamshire, UK)을 통해 평가됩니다.

이 평가 후 개인은 최대 산소 섭취량(VO2 피크) 및 최대 심박수를 결정하기 위해 숙련된 운동 생리학자 팀이 감독하는 트레드밀에서 자기 제한 최대 운동 테스트를 수행합니다. 테스트는 Bruce 프로토콜에 따라 수행됩니다. 산소 흡수(VO2) 및 이산화탄소 생성(VCO2)은 호흡별 컴퓨터 가스 교환 시스템에 의해 결정되고 20초 평균 신호를 사용하여 분석됩니다. 기초 대사율은 빠른 상태에서 분석됩니다(Quark CPET, Cosmed, Italy).

실험실을 처음 방문하고 마지막으로 방문할 때 혈액 샘플을 수집하고 10분 동안 1000g에서 원심분리하여 혈장 또는 혈청을 분리하고 생화학적 매개변수의 추가 분석을 위해 보관합니다. 총 글루코스, C-반응성 단백질, HDL-콜레스테롤, HbA1c 및 트리글리세라이드는 자동화 시스템 Cobas C111(Roche Diagnostics, Basel, Switzerland)에서 결정될 것이다. LDL-콜레스테롤은 Friedewald 방정식으로 계산됩니다. 인슐린 저항성은 인슐린 및 공복 혈당 수치를 기준으로 HOMA-IR(Homeostatic Model Assessment) 방법으로 계산됩니다.

미생물 분석을 위해 고품질 핵산 추출 상용 키트인 QIAmp Blood and Body Fluid(Qiagen, Canada)를 사용하여 대변에서 실리카 멤브레인 기반 DNA 정제를 수행합니다. 16S rRNA 유전자의 V3-V4 초가변 영역이 증폭되고 Illumina MiSeq에서 시퀀싱됩니다. 시퀀스는 이전에 설명한 대로 수정된 절차로 mothur(v.1.41.1) 23에서 처리됩니다. 그런 다음 서열은 SILVA 16 S rRNA 데이터베이스(v 132)에 정렬됩니다.

염증성 바이오마커 및 혈장 LPS 수준의 경우 혈액을 1000g에서 10분 동안 원심분리하고 혈청을 냉동(-80°C)하여 상용 키트인 LPS를 사용하여 ELISA(효소 결합 면역흡착 검정) 기술로 추가 분석합니다. , TNF-α, IL-1, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 및 IL-13(Human ELISA Kits, Sigma-Aldrich, St. Louis, MI, USA).

스트레스 적응을 위한 HSR의 중요성을 고려하여 열 스트레스 조건(건강한 세포에서 정상적이고 예상되는 반응)에서 HSP72를 방출하는 백혈구(순환 HSP72의 주요 공급원이자 면역 세포 스트레스 반응의 대표자)의 능력을 테스트할 것입니다. ). 이 전략을 사용하여 다른 중재가 당뇨병의 HSR을 개선할 수 있는지 비교할 것입니다. 요약하면, 채취 후 전혈을 수조에서 2시간 동안 37°C(대조군) 및 42°C(열 스트레스)의 두 가지 온도에서 즉시 배양했습니다. 배양 후 전체 혈액을 원심분리하여 혈장을 분리합니다. 플라즈마는 eHSP72 26의 분석에 사용됩니다. 매우 민감한 효소 결합 면역흡착 분석법(EIA) 방법(EKS-715 Stressgen, Victoria, Canada)을 사용하여 이전에 설명한 바와 같이 혈장 HSP72 단백질의 수준을 정량화합니다 27. PBMC(NF-kB; TLR2 e 4, TRIF, IKKi/IKKε, e MyD88)에서 염증 세포 시그널링은 이전에 기술된 바와 같이 웨스턴 블롯에 의해 분석될 것입니다28.

흐름 매개 확장 충혈에 대한 상완 동맥 흐름 매개 확장(FMD)은 초음파 장치(Toshiba 모델 Nemio XG, 일본)를 사용하여 내피 기능의 간접 측정으로 현재 지침에 맞게 조정됩니다. (THIJSSEN DHJ 외, 2011).

수화 프로토콜 열 노출 전날 참가자는 12mL•kg-1의 물을 마시도록 지시받습니다(일반적인 액체 섭취량에 추가). 무더운 실험 당일 오전에는 참가자들에게 탈수 상태를 보장하기 위해 평소 물 섭취량 외에 6mL•kg-1의 물을 섭취하도록 지시합니다. 환경 챔버에 들어가기 전에 굴절계(29)를 통해 비중을 사용하여 수화 상태를 확인하기 위해 소변 수집이 수행됩니다. 30 및 특정 척도를 통한 색상 31. 1.25의 소변 비중 컷오프가 적용됩니다. 더 높은 값을 위해 참가자는 200-250mL의 물을 마시고 열 노출 전에 30분을 기다립니다.

안전 및 부작용 참가자는 부작용을 방지하기 위해 개입 중 및 개입 후 최소 30분 동안 지속적인 의료 전문가의 통제를 받게 됩니다. 다음과 같은 경증 및 중등도의 이상 반응이 나타날 수 있습니다. 운동 프로토콜, 특히 최대한 노력하는 동안 약간의 불편함(메스꺼움, 근육통)이 발생할 수 있습니다. 온열 요법은 대부분의 사람들에게 안전한 것으로 나타났습니다. 그러나 일부 참가자의 경우 더 높은 온도로 인해 약간의 열 불편이 발생할 수 있습니다. 심박수 및 혈압 증가와 같은 심혈관 변화가 예상되며 유해하지 않습니다. 마지막으로, 프로토콜 후에 가벼운 탈수가 관찰될 수 있습니다. 이것은 나중에 적절한 수화로 약화됩니다.

윤리적 고려 사항 연구는 정보에 입각한 동의 양식, 기밀성 및 익명성에 관한 프로토콜을 엄격히 따릅니다. 지침, 프로젝트 목표, 절차 설명, 가능한 위험 및 이점이 포함된 정보에 입각한 동의서가 제공됩니다. 참가자는 또한 참여가 자발적이며 언제든지 연구에서 철회할 수 있음을 알립니다. 이 연구는 헬싱키 선언에 따라 수행되며 시설의 기관 검토 위원회(추적 번호: 38626420.6.0000.5347)의 승인을 받았습니다. 임상 시험 데이터베이스에 등록됩니다. 참가자의 데이터가 포함된 모든 파일은 승인된 연구팀 구성원만 액세스할 수 있는 암호로 보호된 안전한 데이터베이스 문서에 저장됩니다.