芳香烃受体在神经母细胞瘤发生中的作用及其与MYCN表达的关系

神经母细胞瘤 (NB) 是婴儿期最常见的恶性肿瘤。 约60%的NB患者临床诊断为Ⅳ期，预后极差，5年生存率不超过30%。 NB的分子标志物对肿瘤行为有很大影响。 MYCN 扩增是预测 NB 患者预后不良的最著名标志物。 然而，MYCN 如何影响 NB 细胞行为仍然未知。 在我们的初步研究中，我们对 10 个具有 MYCN 扩增的 NB 肿瘤和 10 个具有正常 MYCN 拷贝数的肿瘤进行了差异基因表达的全基因组分析。 我们发现芳香烃受体 (AHR) 与 MYCN 表达呈负相关。 这种关系在 83 个 NB 肿瘤样本中得到验证。 此外，通过 NB 肿瘤的免疫染色，阳性 AHR 表达预示着良好的预后。 这些证据表明 AHR 不仅与 MYCN 表达有关，而且在 NB 的肿瘤发生中也起着重要作用。 因此在这个项目中我们旨在进一步研究AHR和MYCN之间的关系。 此外，还将阐明 AHR 在 NB 肿瘤发生中的可能作用。 具体来说，我们提出了一个为期 3 年的项目，具有以下三个目标：

目标 I. 确定 AHR 和 MYCN 表达之间的分子关系。 AHR 已被证明可以抑制 E2F1 表达。 已发现 E2F1 反向上调 MYCN 的表达。 在我们的初步微阵列研究中，我们还发现 E2F1 表达与 MYCN 表达呈正相关，但与 AHR 表达呈负相关。 因此，将用 AHR 表达载体或 AHR siRNA 转染 NB 细胞，然后检查相关的 E2F1 和 MYCN 表达，以阐明 AHR 是否可以通过 E2F1 调节 MYCN 表达。 此外，还将操纵 E2F1 水平以确定 AHR 对 MYCN 的影响是否取决于 E2F1。 此外，还将检查 NB 肿瘤样本中的 E2F1 表达，以阐明其在体内的作用。

目标二。 确定 AHR 表达对 NB 细胞行为的影响。 将检查几种 NB 细胞系中的基线 AHR 表达水平。 然后通过基因转染在 NB 细胞中过表达 AHR。 评估 AHR 过表达后的细胞增殖、迁移和分化。 此外，还检查了正常神经元细胞中的 AHR 表达，并通过 siRNA 抑制 AHR 的下调是否会导致癌症发展。

目标三。 确定 AHR 是否可以成为 NB 基因治疗的目标。 将在 AHR 基因转染前后具有正常 MYCN 或 MYCN 扩增的 NB 细胞接种到裸鼠体内，以证明 AHR 表达对 NB 细胞体内行为的影响。 然后将 AHR 转染到野生型 NB 肿瘤中，以查看肿瘤生长是否可以被 AHR 表达抑制。 然后对野生型肿瘤和用 AHR 转染的肿瘤进行微阵列分析，以与人类肿瘤数据集进行比较，以评估基因表达变化以及差异 AHR 表达。 总而言之，我们的研究不仅将建立 AHR 和 MYCN 之间的关系，而且还允许我们描述 AHR-MYCN 相互作用在 NB 肿瘤发生中的功能作用。