吡格列酮对2型糖尿病TIMP-3和TACE的影响 (PIO-TACE)

吡格列酮已被证明具有有效的抗炎和抗动脉粥样硬化作用。 然而，吡格列酮发挥这些作用的机制尚不清楚。 我们提出金属蛋白酶 3 (TIMP-3) 和 TNF-α 转化酶 (TACE) 的组织抑制剂在吡格列酮介导的胰岛素敏感性和内皮功能改善中起主要作用。 在动物模型中，低剂量吡格列酮抑制晚期动脉粥样硬化斑块中的病变进展和基质金属蛋白酶表达。 我们认为较低剂量的吡格列酮也将具有抗炎作用，而不会增加体重的潜在副作用。

为了检查低剂量吡格列酮（15mg/天）对吡格列酮介导的胰岛素敏感性和内皮功能改善中TIMP-3和TACE的影响，我们建议研究对象患有2型糖尿病（T2DM）将参与以下研究: (i) OGTT； (ii) 体脂含量的 DXA，(iii) 正常血糖高胰岛素钳夹，(iv) 骨骼肌活检。

本研究将检查吡格列酮对 (1) 骨骼肌中 TIMP 和 TACE 底物活性的影响及其与胰岛素敏感性和脂肪细胞因子抵抗素、TNF-α 和 Visfatin 的关系； (2)炎症和动脉粥样硬化的标志物——C反应蛋白、VCAM-1、ICAM-1、内皮素1、E-选择素、P-选择素、TNFrecI、TNFrecII、IL-6 rec。 15 名受试者将接受安慰剂，15 名受试者将接受吡格列酮。

学习规划。

双盲安慰剂对照平行设计。

端点

主要：减少骨骼肌和脂肪组织中的 TIMP-3 和 TACE 基因表达以及 TACE 底物活性。

次要：改善：(1) 骨骼肌胰岛素敏感性，(2) 血浆 FFA（游离脂肪酸）和脂质水平 (3) VCAM 和 ICAM 浓度降低。

研究计划——实验方案 受试者——我们计划研究患有 T2DM 的受试者（BMI 30-40 Kg/m2，年龄=18-70 岁，HbA1c <10%）；其中每组中相同数量的受试者将接受安慰剂/研究药物。 通过这项研究设计，我们将能够区分吡格列酮对 T2DM 患者和非糖尿病代谢综合征患者 TIMP3 和 TACE 底物活性和基因表达的影响。 研究的两组受试者（安慰剂和研究药物）将在年龄、BMI 和 HbA1c 方面匹配，并且吡格列酮对这些受试者的影响将独立于药物的降糖作用。 先前接受过胰岛素或正在服用噻唑烷二酮的糖尿病受试者将被排除在外。 只有没有其他主要器官疾病的糖尿病患者才会被研究。 只有体重稳定至少三个月并且不参加剧烈运动的受试者才会被研究。

在吡格列酮开始之前，所有受试者将参与以下研究：

(i) 资格审查：将进行体检、病史、心电图追踪、全血细胞计数、SMA 24 和血脂分析。 此外，空腹血浆总胆固醇/HDL/LDL 胆固醇、甘油三酯、动脉粥样硬化和炎症标志物（CRP：C 反应蛋白）和高凝状态（纤溶酶原激活物抑制剂 -1）、脂联素、TNF-α 和 HbA1c 的空腹水平也会受到影响在这一天测量。

(ii) OGTT（75 克）评估整体葡萄糖耐量和胰岛素分泌。 股外侧肌活检将在 OGTT 开始前 30 分钟进行。

(iii) 使用双能 X 射线吸收测定法 (DXA) 扫描测量瘦体重和无脂肪体重。

(iv) 肱动脉反应性与缺血后血流介导的血管舒张和对舌下含服硝酸甘油的反应将在 DXA 完成的同一天完成。

完成上述研究后，受试者将被随机分配接受安慰剂或吡格列酮，剂量为每天 15 毫克，持续 24 周。 受试者将在开始吡格列酮治疗之前接受饮食咨询，并被要求在整个研究过程中食用标准的 ADA 体重维持饮食。 患者将每 2 周接受一次随访。 在每次随访时，将确定中期病史、血压、脉搏、体重和空腹血浆葡萄糖浓度。 每 4 周测量一次 TIMP 和 TACE 底物活性、脂联素、内脂素、C 反应蛋白 (CRP) 以及炎症和动脉粥样硬化标志物（VCAM-1、ICAM-1、内皮素 1、E-选择素、P-选择素）。 此外，每个月我们都会测量糖化血红蛋白、血脂和肝功能检查。 吡格列酮治疗 24 周后，所有受试者将重复：(i) 通过 DXA 测量脂肪和瘦体重，(ii) OGTT，(iii) 股外侧肌活检。

从吡格列酮/安慰剂开始的研究总时长为 26-30 周。 基线研究将在 1 至 4 周的时间内进行。 将在吡格列酮治疗的最后 24-30 周期间进行重复研究。

方法 OGTT 和经皮骨骼肌活检

所有受试者都将在研究当天早上 6:45 至 8 点之间进入德克萨斯州圣安东尼奥奥迪墨菲分部南德克萨斯退伍军人医疗保健系统的综合临床研究中心 (GCRC)。 在研究完成之前，前一天晚上 10 点之后，不允许受试者进食或喝任何东西。 在早上 7:30 左右，受试者将摄入 75 克葡萄糖。 葡萄糖、胰岛素和 C 肽浓度的血浆样本将在 -30、-15 和 0 分钟时抽取，此后每 15 分钟抽取一次，持续两小时。 在 OGTT 开始前 30 分钟，将对股外侧肌进行肌肉活检。 注射赛洛卡因后，在髌骨上方 10-15 厘米处做一个 5 毫米的切口，并将活检针插入肌肉。 针头与抽吸相连，获得大约 200 毫克的肌肉组织。 所有肌肉活组织检查将在 15 秒内储存在液氮中，直到进行特定分析处理。

通过计算“MATSUDA”指数以及 OGIS（口服葡萄糖胰岛素敏感性）指数，我们将能够从 OGTT 中得出非常可靠的胰岛素分泌和胰岛素敏感性估计值。 这些指数已被反复证明与正常血糖钳获得的结果非常相关。

三到七天后，体脂含量将由DXA测定。

正常血糖高胰岛素钳夹：

在另一天，受试者将在早上 6 点 45 分到 8 点之间进入德克萨斯州圣安东尼奥奥迪墨菲分部南德克萨斯退伍军人医疗保健系统的综合临床研究中心 (GCRC)，进行高胰岛素正常血糖治疗（80 mU（毫单位）/m2•min) 钳位。 连续间接量热法（Deltatrac, Sensormedics, Anaheim, CA）将在胰岛素钳夹开始前进行 30 分钟，并在胰岛素钳夹的 150-180 分钟期间进行，以计算葡萄糖和脂质氧化的速率。 在获得胰岛素 C 肽的基础样本后，在前 10 分钟内给予胰岛素的初始剂量，然后持续输注。 在 5 分钟时，以可变速率输注葡萄糖以将血浆葡萄糖维持在 ~100mg/dl 180 分钟。

完成上述研究后，所有受试者（糖尿病患者、非糖尿病代谢综合征患者）将开始服用 15 毫克/天剂量的吡格列酮并持续 24 周。 受试者将在开始吡格列酮治疗之前接受饮食咨询，并被要求在整个研究过程中食用标准的 ADA 体重维持饮食。 患者将每 2 周接受一次随访。 在每次随访时，将确定中期病史、血压、脉搏、体重和空腹血浆葡萄糖浓度。 每个月我们都会测量 HbA1c、血浆脂质、肝功能测试、脂肪细胞因子和炎症标志物，如前所述。 吡格列酮治疗 4 个月后，受试者将重复：(i) 通过 DXA 测量脂肪和瘦体重，(ii) OGTT 股外侧肌活检。