A pioglitazon hatása a TIMP-3-ra és a TACE-ra 2-es típusú cukorbetegségben (PIO-TACE)

A pioglitazonról kimutatták, hogy erős gyulladáscsökkentő és érelmeszesedés-ellenes hatással rendelkezik. Mindazonáltal nem világos, hogy a pioglitazon milyen mechanizmusok révén fejti ki ezeket a hatásokat. Javasoljuk, hogy a metalloproteináz-3 (TIMP-3) és a TNF-alfa konvertáló enzim (TACE) szöveti inhibitorai játsszák a fő szerepet az inzulinérzékenység és az endothel funkció pioglitazon által közvetített javulásában. Állatmodellekben az alacsony dózisú pioglitazon gátolja a lézió progresszióját és a mátrix metalloproteináz expresszióját az előrehaladott atheroscleroticus plakkokban. Úgy gondoljuk, hogy a Pioglitazone alacsonyabb dózisának gyulladáscsökkentő hatása is lesz a súlygyarapodás esetleges káros hatásai nélkül.

Annak érdekében, hogy megvizsgáljuk az alacsony dózisú pioglitazon (15 mg/nap) hatását a TIMP-3-ra és a pioglitazonban előforduló TACE-re az inzulinérzékenység és az endothel funkciója által közvetített javulásra, javasoljuk, hogy a 2-es típusú diabetes mellitusban (T2DM) szenvedő alanyok a következő vizsgálatokban vegyenek részt. : (i) OGTT; (ii) DXA a testzsírtartalomra, (iii) euglikémiás hiperinzulinémiás bilincs, (iv) vázizom biopszia.

Ez a tanulmány megvizsgálja a pioglitazon hatását a (1) TIMP és TACE szubsztrát aktivitására a vázizomban, valamint ezek kapcsolatát az inzulinérzékenységgel és az adipocitokin-rezisztinnel, a TNF-α-val és a Visfatinnal; (2) gyulladás és érelmeszesedés markerei- C-reaktív protein, VCAM-1, ICAM-1, endotelin 1, E-szelektin, P-szelektin, TNFrecI, TNFrecII, IL-6 rec. Tizenöt alany placebót, 15 pedig pioglitazont kap.

Dizájnt tanulni.

Kettős vak, placebo-vezérelt párhuzamos kialakítás.

VÉGPONTOK

ELSŐDLEGES: A TIMP-3 és a TACE gén expressziójának és a TACE szubsztrát aktivitásának csökkenése a vázizomzatban és a zsírszövetben.

MÁSODLAGOS: Javulás: (1) a vázizom inzulinérzékenysége, (2) a plazma FFA (szabad zsírsav) és lipidszintjei (3) a VCAM és ICAM koncentrációjának csökkenése.

KUTATÁSI TERV - KÍSÉRLETI JEGYZŐKÖNYV alanyok - Tervezzük a T2DM-es alanyok vizsgálatát (BMI 30-40 Kg/m2, életkor=18-70 év, HbA1c <10%); amelyek közül minden csoportban azonos számú alany kap placebót/vizsgálati gyógyszert. Ezzel a vizsgálati tervvel képesek leszünk megkülönböztetni a pioglitazon hatását a TIMP3 és TACE szubsztrát aktivitására és génexpressziójára T2DM-ben szenvedő betegeknél és metabolikus szindrómában szenvedő nem cukorbetegeknél. A vizsgálat mindkét ágában (placebo és vizsgálati gyógyszer) szereplő alanyok életkora, BMI-értéke és HbA1c-értéke megegyezik, és a pioglitazon hatása ezekben az alanyokban független lesz a gyógyszer glükózcsökkentő hatásától. Azok a cukorbetegek, akik korábban inzulint kaptak, vagy akik tiazolidindiont szednek, kizárásra kerülnek. Csak azokat a cukorbetegeket vizsgálják, akik mentesek más jelentős szervi betegségektől. Csak azokat az alanyokat vizsgálják, akiknek testsúlya legalább három hónapja stabil, és akik nem vesznek részt megerőltető testmozgásban.

A pioglitazon kezelés megkezdése előtt minden alany részt vesz a következő vizsgálatokban:

(i) Minősítő látogatás: Fizikális vizsgálat, kórelőzmény, EKG nyomon követés, teljes vérsejtszám, SMA 24 és lipidprofil vizsgálatra kerül sor. Emellett a plazma össz/HDL/LDL koleszterin, trigliceridek, valamint az érelmeszesedés és gyulladás markereinek (CRP: C-reaktív fehérje), valamint a hiperkoagulálhatóságnak (plazminogén aktivátor inhibitor -1), az adiponektinnek, a TNF-α-nak és a HbA1c-nek az éhgyomri szintje is csökkenni fog. ezen a napon mérve.

(ii) OGTT (75 gramm) az általános glükóztolerancia és az inzulinszekréció értékelésére. A vastus lateralis izom biopsziáját 30 perccel az OGTT kezdete előtt kell elvégezni.

(iii) A sovány testtömeg és a zsírmentes tömeg mérése Dual Energy Xray Absorptiometry (DXA) vizsgálattal.

(iv) Az artéria brachialis reaktivitása az ischaemiás áramlás által közvetített értágulattal és a szublingvális nitroglicerinre adott válaszreakció ugyanazon a napon történik, mint a DXA.

A fenti vizsgálatok befejezése után az alanyokat véletlenszerűen besorolják arra, hogy placebót vagy pioglitazont kapjanak napi 15 mg-os dózisban 24 héten keresztül. A pioglitazon-terápia megkezdése előtt az alanyok táplálkozási tanácsadásban részesülnek, és felkérik őket, hogy a vizsgálat során egy standard ADA, testsúlymegtartó diétát vegyenek igénybe. A betegeket 2 hetente kell ellenőrizni. Minden utánkövetési látogatás alkalmával meghatározzák az időközi kórtörténetet, a vérnyomást, a pulzust, a testsúlyt és az éhgyomri plazma glükózkoncentrációját. Négyhetente megmérik a TIMP és TACE szubsztrát aktivitását, az adiponektint, a viszfatint, a C-reaktív fehérjét (CRP) és a gyulladás és érelmeszesedés markereit (VCAM-1, ICAM-1, endotelin 1, E-szelektin, P-szelektin). Emellett minden hónapban mérjük a HbA1c-t, a plazma lipideket és a májfunkciós teszteket. 24 hetes pioglitazon kezelés után minden alanynak meg kell ismételnie: (i) zsír- és sovány testtömeg mérése DXA-val, (ii) OGTT, (iii) vastus lateralis biopszia.

A vizsgálat teljes időtartama a pioglitazon/placebo kezelés kezdetétől számítva 26-30 hét lesz. Az alapszintű vizsgálatokat 1-4 héten át kell elvégezni. Az ismételt vizsgálatokat a pioglitazon-terápia utolsó 24-30 hetében kell elvégezni.

Módszerek OGTT ÉS PERCUTÁN CSELETAL SMUCLE BIOPSY

Valamennyi alany felvételt nyer a Dél-Texasi Veteránok Egészségügyi Rendszerének Általános Klinikai Kutatóközpontjába (GCRC), Audie Murphy Division, San Antonio, Texas, a vizsgálat napján 6:45 és 8 óra között. Az alanyok nem ehetnek vagy ihatnak semmit előző este 22 óra után, amíg a vizsgálat be nem fejeződik. Körülbelül 7:30-kor az alanyok 75 gramm glükózt fogyasztanak el. A glükóz-, inzulin- és C-peptid-koncentrációra plazmamintákat vesznek -30, -15 és 0 percnél, majd ezt követően 15 percenként két órán keresztül. 30 perccel az OGTT kezdete előtt a vastus lateralis izom izombiopsziáját végezzük. A xilokain injekció beadása után a térdkalács felett 10-15 cm-rel 5 mm-es bemetszést végeznek, és a biopsziás tűt az izomba szúrják. A tűt szívással csatlakoztatjuk, és körülbelül 200 mg izomszövetet kapunk. Az összes izombiopsziát folyékony nitrogénben tárolják 15 másodpercen belül, egészen a specifikus vizsgálatokhoz való feldolgozásig.

Az OGTT-ből a "MATSUDA" index, valamint az OGIS (orális glükóz inzulinérzékenység) index kiszámításával nagyon megbízható becslést tudunk levezetni az inzulinszekrécióra és az inzulinérzékenységre vonatkozóan. Ezek az indexek ismételten kimutatták, hogy rendkívül jól korrelálnak az euglikémiás szorítóval kapott eredményekkel.

Három-hét nappal később a testzsírtartalmat a DXA határozza meg.

EUGLYCEMIC HIPERINSULINEMIC CAMP:

Egy külön napon az alanyokat a Dél-Texasi Veteránok Egészségügyi Rendszerének Általános Klinikai Kutatóközpontjába (GCRC) fogadják, az Audie Murphy osztály, San Antonio, Texas, 6:45 és 8 óra között hiperinzulinémiás euglikémiás (80. mU (mili-Unit)/m2•min) bilincs. Folyamatos indirekt kalorimetriát (Deltatrac, Sensormedics, Anaheim, CA) végeznek 30 perccel az inzulinkapocs megkezdése előtt, és az inzulinkapoccsal végzett 150-180 perces periódus alatt a glükóz és lipidoxidáció sebességének kiszámítása érdekében. Az inzulin, a C-peptid alapmintáinak beszerzése után az első 10 percben beinduló inzulinadagot adnak be, amelyet folyamatos infúzió követ. 5 perc elteltével változó sebességű glükóz infúziót adunk be, hogy a plazma glükózt ~100 mg/dl értéken tartsuk 180 percig.

A fenti vizsgálatok befejezése után minden alany (diabetikus, nem diabéteszes metabolikus szindróma) napi 15 mg-os pioglitazon-kezelést kezd, és a kezelést 24 hétig folytatják. A pioglitazon-terápia megkezdése előtt az alanyok táplálkozási tanácsadásban részesülnek, és felkérik őket, hogy a vizsgálat során egy standard ADA, testsúlymegtartó diétát vegyenek igénybe. A betegeket 2 hetente kell ellenőrizni. Minden utánkövetési látogatás alkalmával meghatározzák az időközi kórtörténetet, a vérnyomást, a pulzust, a testsúlyt és az éhgyomri plazma glükózkoncentrációját. Minden hónapban mérjük a HbA1c-t, a plazma lipideket, a májfunkciós teszteket, az adipocitokineket és a gyulladásos markereket a korábban leírtak szerint. 4 hónap pioglitazon kezelés után az alanyoknál meg kell ismételni: (i) zsír- és sovány testtömeg mérést DXA-val, (ii) OGTT-t vastus lateralis biopsziával.