前立腺癌における AdNRGM プラス CB1954 の臨床試験 (AdUP)

背景と根拠:

局所再発前立腺癌は、腫瘍が前立腺または周囲の組織に局在し、疾患の長い段階に留まるため、遺伝子治療の魅力的な標的となります。 また、遺伝子治療ベクターの前立腺への送達は、超音波ガイド下の経直腸注射または小線源治療用に開発された適応方法のいずれかを使用して簡単であり、複数のテンプレート誘導経会陰注射を送達して前立腺の飽和カバレッジを達成します。 ウイルス指向性酵素プロドラッグ療法（VDEPT）、条件付き複製アデノウイルス（CRAds）、GMCSFベースの免疫刺激など、いくつかの遺伝子治療および遺伝子免疫療法戦略が、局所再発または転移性前立腺癌の患者で試験されています。 これらの治療は忍容性が高く、抗腫瘍活性の証拠がいくつか示されました。

ニトロレダクターゼ/CB1954 VDEPT システム:

ニトロレダクターゼ／ＣＢ１９５４系は、プロドラッグ活性化酵素として大腸菌ニトロレダクターゼ（ＮＴＲ）を使用し、活性化されるプロドラッグとしてＣＢ１９５４を使用する。 このシステムを利用するために、サイトメガロ ウイルス (CMV) プロモーターの制御下にある NTR 遺伝子を含む CTL102 と呼ばれる E1-E3 欠失、複製欠損ヒト アデノ ウイルス (Ad5) が以前に生成されました。 CTL102 は癌細胞に感染し、in vitro で NTR 発現を誘導することができました。さらに、NTR 発現細胞は CB1954 に対して感作されます。 動物モデルで実施された実験では、CTL102 を注射した前立腺癌異種移植片で NTR 発現を検出できること、および CTL102 の腫瘍内注射とそれに続く 2 日後に CB1954 の腹腔内投与を行うと、異種移植片の増殖が阻害されることが実証されました。

CB1954 プロドラッグ変換と臨床開発:

CB1954 [5-(アジリジン-1-イル)-2,4-ジニトロベンズアミド] は弱いアルキル化剤であり、ラットのニトロレダクターゼ酵素である DT ジアホラーゼによって還元され、強力な二官能性アルキル化剤 (5-(アジリジン-1-イル) -4-ヒドロキシルアミノ-2-ニトロベンズアミド) は、DNA を架橋し、分裂細胞と非分裂細胞の両方を殺すことができます。 DT diaphorase のヒト型およびマウス型は、この反応を欠いています。 大腸菌の nfsB 遺伝子がコードするニトロレダクターゼ酵素は、ラットの DT ジアホラーゼよりも 60 倍から 100 倍速く同じ還元を行うことがわかっており、これが CTL102 と AdNRGM にコードされている酵素 (NTR) です。

CB1954 の第 I 相薬物動態試験では、最大耐用量 (MTD)、用量制限毒性、および血漿濃度-時間プロファイルが定義されました。 それぞれ 3 人の患者からなる 10 のコホートが、3mg/m2 から 37.5mg/m^2 の用量レベルで CB1954 で治療されました。 骨髄抑制、腎毒性または脱毛症は観察されなかった。 用量を制限する毒性 (グレード 4 の下痢 1 件とグレード 2 の肝臓毒性 2 件) が 37.5 mg/m^2 で見られました。他の毒性には、吐き気、嘔吐、食欲不振、疲労が含まれます。 24 mg/m^2 で記録された副作用はグレード 3 の吐き気と疲労であったため、この用量は将来の臨床試験の標準用量として推奨されました。 白内障としても知られる眼の水晶体の混濁が、CB1954 薬を投与された数匹の動物で発生しました。 治験責任医師は、この変化がヒトで起こる可能性は非常に低く、以前の臨床試験でこの薬で治療された患者は誰もこの合併症に苦しんでいないと考えています.

前立腺がんの試験:

CTL102/CB1954 の第 I/II 相臨床試験は、前立腺癌の男性で完了しました。 試験の第 1 段階では、前立腺全摘除術が予定されていた 20 人の患者が、手術前に前立腺内注射によって CTL102 のみを投与されました。 研究のこの部分の目的は、安全性、忍容性、および NTR 発現のレベルでした。 免疫組織化学は、使用されたすべての用量レベル (1x10^10 から 1x10^12 ウイルス粒子) で、腫瘍の腺上皮および正常な前立腺組織の NTR 染色を示しました。 NTR の発現は前立腺標本スライドの 30 ～ 50% で見られ、より高いベクター用量または複数回の注射を使用すると増加するように見えましたが、ウイルス用量と NTR 発現の程度の間に統計的に有意な関係はありませんでした。 5x10^10 vp を投与された 1 人の患者は DLT (一過性ビリルビン増加) を示しましたが、遺伝子治療は忍容性が良好でした。 したがって、コホートは拡大されましたが、他の DLT は観察されず、用量漸増を再開することができました。 （その後、DLT は術後の心筋梗塞に起因するとされた。） その他の有害事象は、一過性のグレード 3 のリンパ球減少症 (患者 3 人) とグレード 2 の肝酵素の増加 (患者 4 人) でした。 治療に関連した重篤な有害事象はありませんでした。

私たちのデータは、CTL102 の前立腺内注射とそれに続く静脈内 CB1954 の注射が安全で忍容性が高いことを示しています11。 CTL102 は NTR 発現を誘導することができ、CTL102/CB1954 処理は活性の初期の指標を提供しました。 しかし、このアプローチの全体的な抗腫瘍効果は最適ではなく、PSA が 50% を超えて減少した患者は 2 人だけで、治療後の生検では生存可能な腫瘍細胞がまだ存在していました。 CTL102/CB1954 の限られた抗腫瘍活性の原因は、NTR を発現する腫瘍細胞の比較的小さな割合とその局所的な分布にあると考えられます。 有効性を高めるために、現在の臨床試験には 2 つの重要な改善が組み込まれています。

1. 前立腺全体へのベクターのより良い分布を達成するために、複数のテンプレート誘導経会陰注射を介して、前立腺小線源治療の技術の適応を使用してベクターを投与する。
2. GMCSFベースの免疫刺激によるVDEPTの有効性を高めるために、NTRとヒトGMCSFの両方を発現するE1、E3欠失複製欠損アデノウイルス（AdNRGM）を組み合わせます。

AdNRGM の提案された用量レベルは 10^10、3x10^10、10^11、3x10^11、10^12 vp であり、プロドラッグ CB1954 は 24 mg/m^2 の標準用量で投与されます。 In vitro 実験では、AdNRGM の 1 x 10^10 vp が 5 ～ 25 μg GMCSF/24 時間の生産をもたらす可能性が高いと見積もることができます。 GMCSF の臨床試験では、500 µg の単回投与、または最大 250 µg/m^2 の反復投与が使用されています。 したがって、治験責任医師は、1 x 10^10 vp の開始用量が GMCSF 生産に十分な安全マージンを提供すると考えています。 固定用量または 24 mg/m^2 CB1954 は、CB1954 単独の初期用量漸増試験の後に推奨される用量です。