AdNRGM Plus CB1954:n kliininen tutkimus eturauhassyövän hoidossa (AdUP)

Tausta ja perustelut:

Paikallisesti uusiutunut eturauhassyöpä on houkutteleva kohde geeniterapialle, koska kasvain säilyy eturauhasessa tai sitä ympäröivässä kudoksessa sairauden pitkän vaiheen ajan. Myös geeniterapiavektoreiden kuljettaminen eturauhaseen on yksinkertaista käyttämällä joko ultraääniohjattua trans-rektaalista injektiota tai brakyterapiaan kehitettyjä mukauttavia menetelmiä useiden templaattiohjattujen transperineaalisten injektioiden antamiseksi eturauhasen kyllästymispeiton saavuttamiseksi. Useita geeniterapia- ja geeni-immunoterapiastrategioita on testattu potilailla, joilla on paikallisesti uusiutunut tai metastaattinen eturauhassyöpä, mukaan lukien virusohjattu entsyymiaihiolääketerapia (VDEPT), ehdollisesti replikoituvat adenovirukset (CRAD) ja GMCSF-pohjainen immuunistimulaatio. Nämä hoidot olivat hyvin siedettyjä ja osoittivat jonkin verran näyttöä kasvainten vastaisesta aktiivisuudesta.

Nitroreduktaasi/CB1954 VDEPT-järjestelmä:

Nitroreduktaasi/CB1954-järjestelmä käyttää E. colin nitroreduktaasia (NTR) aihiolääkettä aktivoivana entsyyminä ja CB1954:ää aktivoitavana aihiolääkkeenä. Tämän järjestelmän hyödyntämiseksi luotiin aiemmin CTL102:ksi nimetty E1-E3-deletoitu, replikaatiovajautunut ihmisen adenovirus (Ad5), joka sisältää NTR-geenin sytomegaloviruksen (CMV) promoottorin ohjauksessa. CTL102 kykeni infektoimaan syöpäsoluja ja indusoimaan NTR-ilmentymistä in vitro, lisäksi NTR:ää ilmentävät solut herkistyvät CB1954:lle. Eläinmalleilla suoritetut kokeet osoittivat, että NTR:n ilmentyminen voitiin havaita eturauhassyövän ksenografteissa, joihin oli injektoitu CTL102:ta, ja että ksenograftien kasvua inhiboi intratumoraalinen CTL102-injektio, jota seurasi 2 päivää myöhemmin CB1954:n intraperitoneaalinen antaminen.

CB1954 aihiolääkekonversio ja kliininen kehitys:

CB1954 [5-(atsiridin-1-yyli)-2,4-dinitrobentsamidi] on heikko alkyloiva aine, jonka rotan nitroreduktaasientsyymi DT-diaforaasi pelkistää tehokkaaksi, bifunktionaaliseksi alkyloivaksi aineeksi (5-(atsiridin-1-yyli) -4-hydroksyyliamino-2-nitrobentsamidi), joka silloittaa DNA:n ja pystyy tappamaan sekä jakautuvia että jakautumattomia soluja. Ihmisen ja hiiren DT-diaforaasin muodot ovat puutteellisia tässä reaktiossa. E. colin nfsB-geenin koodaaman nitroreduktaasientsyymin havaittiin suorittavan saman pelkistyksen 60-100 kertaa nopeammin kuin rotan DT-diaforaasi, ja tämä on CTL102:ssa ja AdNRGM:ssä koodaama entsyymi (NTR).

CB1954:n faasin I farmakokineettinen tutkimus määritti sen suurimman siedetyn annoksen (MTD), annosta rajoittavat toksisuudet ja plasman pitoisuus-aikaprofiilin. Kymmenen kolmen potilaan kohorttia hoidettiin CB1954:llä annostasoilla 3 mg/m2 - 37,5 mg/m2. Ydinsuppressiota, nefrotoksisuutta tai hiustenlähtöä ei havaittu. Annosta rajoittavia toksisuuksia (yksi asteen 4 ripuli ja kaksi asteen 2 maksatoksisuutta) havaittiin annoksella 37,5 mg/m^2; muita toksisuuksia olivat pahoinvointi, oksentelu, anoreksia ja väsymys. Annoksilla 24 mg/m^2 havaitut sivuvaikutukset olivat asteen 3 pahoinvointi ja väsymys, joten tätä annosta suositeltiin standardiannokseksi tulevissa kliinisissä tutkimuksissa. Silmän linssin samentumista, joka tunnetaan myös nimellä kaihi, esiintyi muutamilla eläimillä, jotka saivat CB1954-lääkettä. Tutkijat uskovat, että tämä muutos on erittäin epätodennäköistä ihmisillä, eikä yksikään potilaista, joita hoidettiin tällä lääkkeellä aikaisemmissa kliinisissä tutkimuksissa, ole kärsinyt tästä komplikaatiosta.

Eturauhassyöpätutkimus:

Vaiheen I/II kliininen tutkimus CTL102/CB1954:stä saatettiin päätökseen miehillä, joilla oli eturauhassyöpä. Kokeilun ensimmäisessä vaiheessa 20 potilasta, joille oli määrä tehdä radikaali eturauhasen poisto, sai CTL102:ta yksinään eturauhasensisäisenä injektiona ennen leikkausta. Tämän tutkimuksen osan tavoitteet olivat turvallisuus, siedettävyys ja NTR-ilmentymisen taso. Immunohistokemia osoitti kasvaimen rauhasepiteelin ja normaalin eturauhaskudoksen NTR-värjäytymisen kaikilla käytetyillä annostasoilla (1x10^10 - 1x10^12 viruspartikkelia). NTR:n ilmentyminen havaittiin 30-50 %:ssa eturauhasnäytelevyistä, ja se näytti lisääntyvän käytettäessä suurempia vektoriannoksia tai useita injektioita, mutta virusannoksen ja NTR-ilmentymisen laajuuden välillä ei ollut tilastollisesti merkitsevää yhteyttä. Geeniterapia oli hyvin siedetty, vaikka yhdellä potilaalla, joka sai 5x10^10 vp, oli DLT (lyhytaikainen bilirubiinin nousu). Siksi kohorttia laajennettiin, mutta muuta DLT:tä ei havaittu ja annoksen nostamista voitiin jatkaa. (DLT:n katsottiin myöhemmin johtuvan leikkauksen jälkeisestä sydäninfarktista.) Muita haittavaikutuksia olivat ohimenevä asteen 3 lymfopenia (3 potilasta) ja asteen 2 maksaentsyymiarvojen nousu (4 potilasta). Hoitoon liittyviä vakavia haittavaikutuksia ei ollut.

Tietomme osoittavat, että CTL102:n intraprostaattinen injektio, jota seuraa suonensisäinen CB1954, on turvallinen ja hyvin siedetty11. CTL102 kykeni indusoimaan NTR-ilmentymistä ja CTL102/CB1954-hoito antoi varhaisia ​​merkkejä aktiivisuudesta. Tämän lähestymistavan yleinen kasvainten vastainen teho ei kuitenkaan ollut optimaalinen, sillä vain kahdella potilaalla oli PSA:n lasku >50 % ja eläviä kasvainsoluja oli edelleen läsnä hoidon jälkeisissä biopsioissa. On todennäköistä, että suhteellisen pieni osa kasvainsoluista, jotka ilmentävät NTR:ää, ja niiden paikallinen jakautuminen olivat vastuussa CTL102/CB1954:n rajoitetusta kasvainten vastaisesta aktiivisuudesta. Tehon lisäämiseksi nykyiseen kliiniseen tutkimukseen on sisällytetty kaksi merkittävää parannusta:

1. Vektorin paremman jakautumisen saavuttamiseksi kaikkialla eturauhasessa vektoria annetaan käyttämällä eturauhasen brakyterapiatekniikan mukautusta useiden templaattiohjattujen transperineaalisten injektioiden kautta.
2. VDEPT:n tehokkuuden lisäämiseksi GMCSF-pohjaisella immuunistimulaatiolla käyttämällä E1,E3-deletoitua replikaatiovajavaa adenovirusta (AdNRGM), joka ekspressoi sekä NTR:ää että ihmisen GMCSF:ää, yhdistetään.

AdNRGM:lle ehdotetut annostasot ovat 10^10, 3x10^10, 10^11, 3x10^11, 10^12 vp, kun taas aihiolääkettä CB1954 annetaan standardiannoksena 24 mg/m^2. In vitro -kokeet antavat meille mahdollisuuden arvioida, että 1 x 10^10 vp AdNRGM:ää johtaa todennäköisesti 5 - 25 µg GMCSF:n tuotantoon/24 h. GMCSF:n kliinisissä tutkimuksissa on käytetty kerta-annoksia 500 µg tai toistuvia annoksia aina 250 µg/m^2 asti. Tutkijat katsovat, että aloitusannos 1 x 10^10 vp tarjoaa siksi riittävän turvallisuusmarginaalin GMCSF:n tuotannolle. Kiinteä annos tai 24 mg/m^2 CB1954:ää on suositeltu annos pelkän CB1954:n annoksen nostokokeessa.