綿実油が酸化ストレス、炎症、代謝に与える影響

このアプローチは、健康な個人の集団 (n=32) を 4 アーム (CSO 30 g、OO 30 g、CSO 60 g、および OO 60 g) の無作為化二重盲検並行対照試験に登録することです。運動誘発酸化ストレスに対するこれらの異なる用量のオイルの効果を比較してください。

訪問 1 では、参加者はインフォームド コンセント、人体計測測定、および VO2max を決定するための最大下運動テストを受けます。 参加者は、グローバル身体活動アンケート (GPAQ)、運動準備アンケート (2022-PARQ+)、AHA/ACSM 健康/フィットネス施設参加前スクリーニングアンケート、および月経関連アンケートにも記入します。 訪問 1 と訪問 2 の間に最低 3 日間の導入期間があり、その間、参加者は、油の使用を最小限に抑える、脂肪の多い魚、オメガ 3、ビタミン A、ビタミンを制限するなど、特定の食事ガイドラインに従うよう求められます。 C、ビタミンAサプリメント、およびナッツ/ナッツ種子/油/油糧種子またはこれらの成分を含む食品の消費を制限する. 訪問 2 では、参加者は運動テスト (30 分間 75% VO2max) を行い、運動テストの前後に採血を行います。 運動テストの15分後に採血します。 さらに、参加者は、1 か月の食事履歴アンケートと 24 時間の食事想起を行うよう求められます。 訪問 2 と訪問 3 の間には 4 週間あります。この期間中、参加者はそれぞれの用量のオイルを含むスムージーを毎日摂取するよう求められます。 毎週スムージーを提供し、参加者が通常のオイルと交換できるように、追加のオイルをアルミホイルで包んだ噴出ボトルに入れて提供します。 さらに、参加者は、研究食の順守を確認するために順守チェックフォームに記入するよう求められます。 コンプライアンスフォームには、胃腸の問題に関する毎週1つの質問があります. 4週間の食事介入の後、参加者は訪問3のためにラボに来ます。訪問3は、身体測定が訪問3でも行われることを除いて、訪問2と同様のプロトコルに従います。

手順:

運動テスト: 訪問 1 では、運動中に参加者の体が使用できる酸素の量を予測するために、最大下運動テストが行​​われます。 これにより、研究者は、1 人の参加者が、フィットネス レベルに基づいて、他のすべての参加者と同じ最大値の最大下のパーセントで運動することができます。 これは、トレッドミル (Woodway GmbH D79576、Weil am Rhein、Denmark) を 0% 勾配で自己選択した快適な速度で 5 分間歩くことから始まり、テストの前にウォームアップします。 このテストには一連のステージが含まれており、2 分ごとに難易度が上がります。 参加者は、心拍数モニターを着用し、アナライザーに接続されたマウスピースから呼吸し、ノーズ クリップを着用します。 テストは歩くことから始まり、参加者がより難しい段階に進むにつれて、勾配と速度を上げて強度を上げます。 研究者は、参加者が年齢で予測された最大心拍数 (220 歳) の 85% に達したときにテストを終了します。 訪問 2 と 3 の間、参加者は一晩絶食した後に検査室に報告し、運動テストの前後に血液サンプルを採取します。 運動テストには、トレッドミルで 30 分間 75% VO2max で上り坂を早歩きします。 運動中、代謝測定システム (ParvoMedics TrueMax 2400 Metabolic System、米国ユタ州サンディ) を使用して、呼吸商および関連する脂肪酸化レベルを決定します。 呼吸商は、呼吸中に吸収された酸素の量に対して放出された二酸化炭素の量を決定することによって測定されます。 採血後、臨床化学分析装置（Piccolo press）を使用して、TG（および全脂質パネルとグルコース）をリアルタイムで分析します。 同時に、血清サンプルを分注し、炎症性サイトカイン (確立されたメディエーターおよびバイオマーカーのプロファイル)、インスリン、炎症に関連する他の代謝バイオマーカー、およびリピドミクスおよびメタボロミクス分析の分析まで、-80 C で保存します。 イソプロスタンの分析では、血清サンプルを等分してすぐに-80℃で保存した後、ドライアイスとエタノールスラリーで急速冷凍します。研究者は炎症性サイトカイン（TNF-α、インターロイキン（IL）-1β、IL- 6、IL-7、IL-23、および顆粒球マクロファージ コロニー刺激因子 (GM-CF) を高感度 Luminex マルチプレックス技術 (Bio-Rad Bio-Plex 200 HTS) を使用してミリポアが調製しました。

食事介入: 登録栄養士が研究食 (スムージー) を準備し、参加者に 4 週間与えます。 参加者には、1 日あたり 30 g の CSO、30 g の OO、60 g の CSO、または 60 g の OO を含むスムージーが 2 つの別々の容器で提供されます。 30 g のスムージー (CSO と OO の両方) には、762 kcal のカロリー、120 g の炭水化物、3 g のタンパク質、30 g の脂肪が含まれています。 60 g のスムージー (CSO と OO の両方) には、761 kcal のカロリー、50 g の炭水化物、3 g のタンパク質、30 g の脂肪が含まれています。 この 4 週間の期間中、参加者は特定の食事ガイドラインに従うよう求められ、コンプライアンス フォームに記入するよう求められます。 参加者は、摂取したスムージーの量と、研究チームが推奨していないものを摂取したかどうかを示すコンプライアンス チェック フォームに毎日記入するよう求められます。 スムージーは毎週提供されます。つまり、参加者は 7 日ごとにラボを訪れてスムージーを受け取り、毎週のコンプライアンス フォームを提出します。

メタボロミクス分析: すべてのサンプルが収集されると、血清サンプルが解凍され、代謝物画分が抽出されます。 抽出後、サンプルは質量分析分析を使用して調査されます。 最初のターゲット分析は、胆汁酸と、8-isoPGF2a を含む一連の炎症および酸化ストレスのバイオマーカーに焦点を当てます。 標的検体は標準曲線を使用して定量化され、得られた濃度はいくつかの統計分析ツールを使用して比較されます。 CSOの消費によって調節される追加の代謝経路を明らかにする可能性がある、詳細な非標的分析も行われます。 代謝物サンプルは、Ｗａｔｅｒｓ Ｓｙｎａｐｔ Ｇ２Ｓｉ ＱＴＯＦ（Ｗａｔｅｒｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を使用して分析される。 この機器にはイオンモビリティ機能があり、断面積と質量に基づいて複雑な混合物中の胆汁酸などの密接に関連する化合物を区別できます。 Synapt QTOF は、高感度でさまざまなスキャン モードを備えているため、複雑な生物学的サンプルの非ターゲット分析に最適です。

食事分析: 長期的な食習慣は、CSO および OO の短期的な補給に対する反応に影響を与える適応を生み出す可能性があります。 この調査では、19 歳以上の成人向けに設計された食品摂取頻度アンケートである Web ベースの食事履歴アンケート (DHQ III) の最新バージョン (2018 年) を使用します。 NIH国立がん研究所。 DHQ III の出力には、炭水化物成分、カロテノイドとトコフェロール、サプリメントからの食事成分、脂肪、脂肪酸とコレステロール、多量栄養素とエネルギー、ミネラル、タンパク質成分、およびビタミンが含まれます。DHQ III 出力ファイルで利用可能な食事成分と食品グループです。 . さらに、急性の食事摂取量は、無料のウェブベースの自動自己管理式 24 時間 (ASA24®) アンケートを使用して決定されます。

統計テスト: H1 は、分散分析 (ANOVA) を使用してテストされ、30 g CSO、30 g OO、または 60 g CSO、または 60 g OO のいずれかを消費する個人間の運動誘発性酸化ストレス マーカー (イソプロスタン) の違いを比較します。 H2 は、分散分析 (ANOVA) を使用してテストされ、30 g CSO、30 g OO、60 g CSO、または 60 g OO のいずれかを消費する個人間の炎症および炎症マーカーの違いを比較します。 H3をテストするために、研究者は血清胆汁酸とメタボロームの変化を特定し、代謝変化に関連する代謝経路を決定して、CSOの健康への影響の根底にある潜在的なメカニズムを特定します. H4 をテストするために、研究者は血清イソプロスタン、胆汁酸、炎症、リピドーム、およびメタボロームの尺度を特定し、回帰分析を使用して、CSO および OO の異なる用量に応じた変動のレベルを決定します。