면실유가 산화 스트레스, 염증 및 신진대사에 미치는 영향

접근 방식은 건강한 개인(n=32)의 모집단을 4군(30g CSO, 30g OO, 60g CSO 및 60g OO), 무작위, 이중 맹검, 병렬 제어 시험에 등록하는 것입니다. 운동으로 유발된 산화 스트레스에 대한 이러한 다양한 오일 용량의 효과를 비교합니다.

방문 1 동안 참가자는 정보에 입각한 동의, 인체 측정 측정 및 VO2max를 결정하기 위한 최대 이하 운동 테스트를 받게 됩니다. 참가자는 또한 글로벌 신체 활동 설문지(GPAQ), 운동 준비 설문지(2022-PARQ+), AHA/ACSM 건강/피트니스 시설 참여 전 선별 설문지 및 월경 관련 설문지를 작성합니다. 방문 1과 방문 2 사이에는 최소 3일의 준비 기간이 있으며, 이 기간 동안 참가자는 최소한의 기름 사용, 기름진 생선 제한, 오메가-3, 비타민 A, 비타민 C, 비타민 A 보충제, 견과류/견과류 씨앗/기름/유지종자 또는 이러한 성분을 함유한 식품의 섭취를 제한합니다. 방문 2 동안 참가자는 운동 테스트(30분 동안 75% VO2max)를 수행하고 운동 테스트 전후에 채혈을 합니다. 운동 테스트 15분 후 혈액을 채취합니다. 또한, 참가자는 1개월 식단 기록 설문지와 24시간 식단 회상을 수행해야 합니다. 방문 2와 방문 3 사이에는 4주가 있을 것이며, 이 기간 동안 참가자는 매일 각각의 오일 용량이 포함된 스무디를 섭취하도록 요청받을 것입니다. 우리는 매주 스무디를 제공할 것이며 참가자들이 일반 오일로 대체할 수 있도록 알루미늄 호일로 포장된 물병에 오일을 추가로 제공할 것입니다. 또한 참가자는 연구 식단을 준수하는지 확인하기 위해 준수 확인 양식을 작성해야 합니다. 준수 양식에는 위장 문제에 대한 매주 1개의 질문이 있습니다. 4주간의 식이 개입 후 참가자는 방문 3을 위해 실험실에 올 것입니다. 방문 3은 신체 측정이 방문 3에서도 수행된다는 점을 제외하고 방문 2와 유사한 프로토콜을 따릅니다.

절차:

운동 테스트: 방문 1 동안 참가자의 신체가 운동 중에 사용할 수 있는 산소의 양을 예측하기 위해 준최대 운동 테스트가 수행됩니다. 이를 통해 연구원은 한 참가자가 체력 수준에 따라 다른 모든 참가자와 동일한 최대 이하 비율로 운동할 수 있습니다. 이것은 테스트 전에 예열하기 위해 0% 등급에서 자체 선택한 편안한 속도로 5분 동안 러닝머신(Woodway GmbH D79576, Weil am Rhein, 덴마크)에서 걷는 것으로 시작됩니다. 테스트에는 2분마다 점점 더 어려워지는 일련의 단계가 포함됩니다. 참가자는 심박수 모니터를 착용하고 분석기에 연결된 마우스피스를 통해 호흡하며 코 클립을 착용합니다. 테스트는 걷기로 시작되며 참가자가 더 어려운 단계로 이동함에 따라 등급과 속도가 증가하여 강도가 증가합니다. 연구원은 참가자가 연령 예측 최대 심박수(220세)의 85%에 도달하면 테스트를 종료합니다. 방문 2 및 3 동안 참가자는 하룻밤 금식 후 실험실에 보고하고 운동 테스트 전후에 혈액 샘플을 수집합니다. 운동 테스트에는 러닝머신에서 30분 동안 75% VO2max로 빠르게 오르막길을 걷는 것이 포함됩니다. 운동 중 대사 측정 시스템(ParvoMedics TrueMax 2400 Metabolic System, Sandy, Utah, USA)을 사용하여 호흡 지수 및 관련 지방 산화 수준을 결정합니다. 호흡 지수는 호흡 중에 흡수된 산소의 부피에 대해 방출된 이산화탄소의 부피를 결정하여 측정됩니다. 채혈 후 TG(및 전체 지질 패널 + 포도당)는 임상 화학 분석기(Piccolo press)를 사용하여 실시간으로 분석됩니다. 동시에, 혈청 샘플은 분취되어 염증성 사이토카인(확립된 매개체 및 바이오마커의 프로필), 인슐린, 염증과 관련된 기타 대사 바이오마커, 지질체학 및 대사체학 분석에 대한 분석까지 -80C에서 저장됩니다. 이소프로스탄의 분석을 위해, 혈청 샘플은 분주된 후 드라이아이스와 에탄올 슬러리에서 급속 동결되고 즉시 -80C에 저장됩니다. 조사자는 염증성 사이토카인(TNF-α, 인터루킨(IL)-1β, IL- 6, IL-7, IL-23 및 Millipore에서 제조한 고감도 Luminex 다중화 기술(Bio-Rad Bio-Plex 200 HTS)을 사용하는 과립구-대식세포 콜로니 자극 인자(GM-CF).

식이 개입: 등록된 영양사가 4주 동안 참가자에게 제공될 연구 식단(스무디)을 준비합니다. 참가자는 두 개의 별도 용기에 하루에 30g CSO, 30g OO, 60g CSO 또는 60g OO가 포함된 스무디를 제공합니다. 30g 스무디(CSO 및 OO 모두)에는 762kcal 칼로리, 120g 탄수화물, 3g 단백질 및 30g 지방이 포함되어 있습니다. 60g 스무디(CSO 및 OO 모두)에는 761kcal 칼로리, 50g 탄수화물, 3g 단백질 및 30g 지방이 포함되어 있습니다. 이 4주 동안 참가자는 특정 식단 지침을 따르고 준수 양식을 작성해야 합니다. 참가자는 매일 스무디를 얼마나 섭취했는지, 연구팀이 권장하지 않는 것을 섭취했는지를 나타내는 규정 준수 확인 양식을 작성해야 합니다. 스무디는 매주 제공됩니다. 즉, 참가자는 7일마다 실험실을 방문하여 스무디를 수령하고 주간 규정 준수 양식을 제출해야 합니다.

대사 분석: 모든 샘플이 수집되면 혈청 샘플을 해동하고 대사체 분획을 추출합니다. 추출 후 샘플은 질량 분석 분석을 사용하여 탐색됩니다. 초기 표적 분석은 담즙산과 8-isoPGF2a를 포함한 일련의 염증 및 산화 스트레스 바이오마커에 초점을 맞출 것입니다. 대상 분석물은 표준 곡선을 사용하여 정량화되고 결과 농도는 여러 통계 분석 도구를 사용하여 비교됩니다. CSO 소비에 의해 조절되는 추가 대사 경로를 밝힐 수 있는 심도 있는 비표적 분석도 수행될 것입니다. 대사산물 샘플은 Waters Synapt G2Si QTOF(Waters Corporation)를 사용하여 분석됩니다. 이 장비는 Ion Mobility 기능이 있으며 복잡한 혼합물에서 담즙산과 같이 밀접하게 관련된 화합물을 단면적과 질량을 기준으로 구별할 수 있습니다. 높은 감도와 다양한 스캔 모드 덕분에 Synapt QTOF는 복잡한 생물학적 시료의 비표적 분석을 위한 최적의 선택입니다.

식이 분석: 장기간의 식습관은 CSO 및 OO의 단기 보충에 대한 반응에 영향을 미치는 적응을 만들 수 있습니다. 이 연구는 19세 이상의 성인을 위해 고안된 식품 빈도 설문지인 웹 기반 식이력 설문지(DHQ III)의 가장 최신 버전(2018)을 사용할 예정입니다. NIH 국립 암 연구소. DHQ III의 출력에는 탄수화물 성분, 카로티노이드 및 토코페롤, 보충제의 식이 성분, 지방, 지방산 및 콜레스테롤, 다량 영양소 및 에너지, 미네랄, 단백질 성분 및 비타민이 DHQ III 출력 파일에서 사용 가능한 식이 성분 및 식품군이 포함됩니다. . 또한 급성 식이 소비는 무료 웹 기반 자동 자가 관리 24시간(ASA24®) 설문지를 사용하여 결정됩니다.

통계 테스트: H1은 30g CSO, 30g OO, 또는 60g CSO 또는 60g OO를 소비하는 개인 간의 운동 유발 산화 스트레스 마커(이소프로스테인)의 차이를 비교하기 위해 분산 분석(ANOVA)을 사용하여 테스트됩니다. H2는 30g CSO, 30g OO, 60g CSO 또는 60g OO를 소비하는 개인 간의 염증 및 염증 마커의 차이를 비교하기 위해 분산 분석(ANOVA)을 사용하여 테스트됩니다. H3를 테스트하기 위해 연구자는 혈청 담즙산 및 대사체의 변화를 확인한 다음 대사 변화와 관련된 대사 경로를 결정하여 CSO가 건강에 미치는 잠재적인 메커니즘을 식별합니다. H4를 테스트하기 위해 조사자는 혈청 이소프로스탄, 담즙산, 염증, 지질체 및 대사체의 측정치를 식별한 다음 회귀 분석을 사용하여 CSO 및 OO의 다양한 용량에 대한 반응의 가변성 수준을 결정합니다.