칼로리 제한은 노화 과정을 지연시킵니다

가설: 칼로리 제한은 결합 해제 단백질과 시르투인의 발현 조절을 통해 산화 스트레스의 감소로 인해 노화 과정과 텔로미어 침식을 지연시킵니다.

후향적 연구:

40세에서 55세 사이의 성인 약 1,000명은 체중이 기록되는 영양 평가 연구에 참여했으며 당시 체질량 지수(BMI)가 30kg/m2 미만인 것으로 간주됩니다. 피험자 모집의 다른 출처는 군대 요원 및 기관 데이터베이스의 건강 기록입니다. 서면 동의서를 수락하고 서명하는 사람들은 다음을 준수해야 합니다.

1. 완전한 임상 병력, 과거 및 현재 질병, 약물 사용, 흡연, 음주 및 불법 약물 사용 기록을 기록합니다.
2. 영양 섭취를 평가하기 위한 식이 설문지
3. 체중, 키, 혈압 측정을 포함한 완전한 임상 검사.
4. 이전에 당사에서 검증한 신체 활동 설문지 1
5. DEXA에 의한 체성분 측정

6. 측정을 위해 30ml의 10시간 공복 혈액 샘플 채취

   • 포장 적혈구 용적, 혈당, 크레아티닌, 혈청 지질, TSH, 갑상선 호르몬 및 인슐린
   • 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)의 텔로미어 길이
   • PBMC에서 Sirt1 및 6 유전자 발현.
   • 혈장 8- 이소프로스테인
7. 이전에 보고된 프로토콜을 사용하여 숙련된 전문가가 수행한 초음파에 의한 경동맥 내막 두께 측정.

평가가 완료되면 대상은 다음과 같이 분류됩니다.

1. 체중 유지자는 실제 체중이 최소 10년 전에 기록된 체중의 최대 10% 이내인 경우
2. 체중 증가자, 실제 체중이 이전에 기록된 체중의 20% 이상인 경우

다음은 추가 분석에서 제외됩니다.

1. 신부전, 암, 자가면역질환, 갑상선기능저하증, 당뇨병 또는 AIDS와 같은 만성 쇠약성 질환의 병력이 있는 피험자.
2. 극도로 높은 신체 활동(주당 10시간 이상의 스포츠 또는 삽질이나 힘든 육체 노동과 같은 극도의 신체 활동이 필요한 작업)에 종사하는 피험자.
3. 약물 남용 또는 알코올 중독의 병력이 있는 피험자
4. 식욕 부진 또는 단백 동화 약물을 사용하는 피험자 또는 비 스테로이드 항염증 약물의 만성 사용자.
5. 1일 5개비 이상의 흡연자(연간 91갑)
6. 18kg/m2 미만의 체질량 지수로 정의되는 지나치게 영양실조인 피험자.

예상 연구:

주요 목적:

근육의 SIRT1 및 UCP3, PBMC의 SIRT6, 갈색 지방 조직 활동 및 산화적 손상 마커의 축적에 대한 정상 지원자의 칼로리 제한 3개월 기간의 효과를 연구합니다.

구체적인 목표:

1. 정상적인 인간 지원자에서 칼로리 제한의 전향적 모델을 개발합니다.

2. 칼로리 제한과 관련된 변화를 연구하려면:

   • 금식 중 염증 및 유리 지방산의 혈청 마커.
   • PET-CT로 측정한 갈색 지방 조직의 18fluorodexoyglucose 흡수
   • 근육 생검에서 UCP3 및 SIRT1의 mRNA 발현.
   • 근육 및 말초 혈액 단핵 세포에서 SIRT1 및 6에 대한 mRNA의 발현
   • 산화적 손상의 지표로서 근육에 4개의 하이드록시노네날과 8개의 하이드록시구아노신 축적
   • 자유 라디칼 생성 능력의 전반적인 척도로서 말초 호중구에 의한 ROS 생산
   • 포도당 내성에서 파생된 공식을 사용하여 측정된 인슐린 민감도. 방법론 체중 감량에 관심이 있고 BMI가 27~32kg/m2인 25~40세의 폐경 전 여성을 대상으로 합니다. 포함 기준은 다음과 같습니다: 완전한 고등학교, 지난 6개월 동안 안정적인 체중(±2kg), 당뇨병 없음, 베타 차단제(경구 피임약 제외)와 같은 에너지 소비에 영향을 미칠 수 있는 약물 섭취 및 경쟁 또는 지친 신체 활동. 여성은 효과적인 피임 방법을 사용해야 하며 연구가 지속되는 동안 매달 임신 테스트를 수행합니다.

정보에 입각한 동의서에 서명한 후 열량계와 액티그래피 또는 이중 라벨링된 물을 통해 총 에너지 소비량을 측정합니다. 대상체는 체중이 안정적이라는 점을 고려하여 에너지 균형 상태에 있는 것으로 간주됩니다(체중 변화 부족은 포함 연구에 필요한 2주 동안 평가됨). 따라서 그 순간의 에너지 섭취량은 총 에너지 소비량과 같다고 확신할 수 있습니다.

그 후, 피험자는 측정된 총 에너지 소비량의 25% 제한을 받았습니다(이 수준의 제한은 지원자가 1년 동안에도 잘 견뎌냈습니다). 제한은 지중해식 식단을 사용하여 탄수화물 50%, 지질 25-30%, 단백질 25% 및 미량 영양소 요구량 100%의 비율을 유지하면서 균형을 이룰 것입니다. 환자는 매주 영양사 강화에 참석할 것입니다. 제한 기간을 완화하기 위해 주 1회 추가 식사가 허용됩니다. 체중 변화에 따라 지원자는 연구 기간 동안 최소 3kg 또는 5% 체중이 감소하면 에너지 제한(그룹 1)으로 간주됩니다. 대신 이러한 목표에 도달하지 못한 피험자는 대조군(그룹 2)으로 간주됩니다.

중재는 3개월 동안 지속되며 기후가 갈색 지방 조직 활동에 미치는 영향을 피하기 위해 칠레 산티아고에서 온도가 상대적으로 안정적이고 더 낮은 기간 동안 수행됩니다. 이상적인 시기는 5월에서 8월 사이입니다. 두 그룹 모두 영양사에 의해 매주 평가되어식이 요법 준수 여부를 평가하고 적응증을 강화하며 체중을 측정합니다. 피험자는 처방된 특정 식품 및 브랜드의 구매를 허용하기 위해 매월 금전적 보상을 받게 됩니다. 각 과목은 건강한 식습관과 신체 활동 생활 방식에 대해 교육을 받습니다. 휴대용 액티그래프(Actiheart®)를 사용하여 확인할 수 있는 신체 활동의 궁극적인 변화.

체중 변화와는 별도로 트리글리세리드 수치가 최소 15% 감소하고 T3 수치가 최소 8ng/dl 감소하면 지원자는 칼로리 제한으로 간주됩니다.

기준선에서, 대조군이 에너지 균형이 0이고 피험자가 음의 에너지 균형을 유지해야 하는 3개월 개입 기간의 끝에서 다음 결정이 수행됩니다.

1. 수반되는 질병을 폐기하기 위한 일상적인 임상 실험실 매개변수의 측정.
2. 공복 혈청 유리 지방산의 측정.
3. 상용 ELISA 키트를 사용하여 각각 염증 표지자 및 글리코톡신으로서 초민감성 C 반응성 단백질 및 카르복시메틸리신(CML)을 측정합니다.
4. 칼로리 제한 준수 여부를 평가하기 위한 트리글리세리드 및 T3 수치 측정.
5. 포도당과 인슐린을 측정하고 Matsuda 공식을 사용하여 인슐린 감수성을 계산하는 포도당 내성 곡선
6. 유기체의 ROS 생산 능력의 표현으로서 FACS(Fluorescence Activated Cell Sorting)에 의한 말초 호중구의 산화 폭발 측정
7. Crujeiras et al에 의해 보고된 기술에 따라 RT-PCR에 의한 PBMC에서의 SIRT1 및 6 유전자 발현 측정
8. Virtanen et al.

9. 외측광근 생검, 이전에 보고된 기술을 사용하여 Bard 바늘을 사용하여 의사가 수행한 측정 :

   • RT-PCR에 의한 UCP3에 대한 mRNA는 인간에서 유사한 방식으로 얻은 생검에서 Millet et al에 의해 보고된 기술을 사용합니다.
   • Heilbronn et al.에 의해 보고된 기술을 사용한 RT-PCR에 의한 SIRT1에 대한 mRNA.
   • 우리가 이전에 보고한 방법을 사용하여 산화 마커로서 8개의 하이드록시구아노신 및 4개의 하이드록시노네날의 면역조직화학적 발현.
10. 이중 에너지 X선 흡수 측정법(DEXA)에 의한 체성분 측정.
11. 휴식 에너지 ​​소비 측정 및 개방 회로 간접 열량계(모델 2900, Sensor Medics Corp., Yerba Linda, CA, USA).
12. Actiheart 액티그래프를 사용한 액티그래피는 칼로리 제한으로 인한 자발적인 신체 활동의 궁극적인 변화를 평가합니다.

텔로미어 길이는 짧은 연구 기간 동안 변화가 감지되지 않는다는 점을 고려하여 향후 프로토콜에서 측정되지 않습니다.