Kaloriebegrænsning forsinker aldringsprocessen

HYPOTESE: Kaloriebegrænsning forsinker aldringsprocessen og dermed telomererosion, på grund af en reduktion af oxidativt stress, via ekspressionsmodulation af afkoblingsproteiner og sirtuiner.

RETROSPEKTIV STUDIE:

Ca. 1000 voksne i alderen 40 til 55 år, der havde deltaget i ernæringsvurderingsundersøgelser, hvor deres kropsvægt blev registreret, og som havde et kropsmasseindeks (BMI) på mindre end 30 kg/m2 på det tidspunkt, vil blive betragtet som kvalificerede. Andre kilder til rekruttering af forsøgspersoner vil være sundhedsjournaler fra væbnede styrkers personale og vores institutionelle database. De, der accepterer og underskriver et skriftligt informeret samtykke, vil blive underlagt:

1. En komplet klinisk historie, der registrerer tidligere og nuværende sygdomme, medicinbrug, historie med rygning, drikkeri og ulovligt stofbrug.
2. Et kostspørgeskema til vurdering af næringsindtag
3. En komplet klinisk undersøgelse inklusive måling af kropsvægt, højde, blodtryk.
4. Et spørgeskema til fysisk aktivitet, der tidligere er valideret af os 1
5. Måling af kropssammensætning ved DEXA

6. Udtagning af en 10 timers fastende blodprøve på 30 ml for at måle

   • Pakket volumen af ​​røde blodlegemer, blodsukker, kreatinin, serumlipider, TSH, skjoldbruskkirtelhormoner og insulin
   • Telomerlængde i mononukleære celler i perifert blod (PBMC)
   • Sirt1 og 6 genekspression i PBMC.
   • Plasma 8- isoprostaner
7. Måling af carotis intima media tykkelse ved ultralyd, udført af en uddannet professionel ved hjælp af tidligere rapporterede protokoller.

Når de er blevet evalueret, vil emnerne blive klassificeret som:

1. Vægtvedligeholdere, hvis deres faktiske vægt er højst inden for 10 % af vægten registreret mindst 10 år før
2. Vægtforøgere, hvis deres faktiske vægt er over 20 % af den tidligere registrerede vægt

Følgende vil blive udelukket fra yderligere analyse:

1. Personer med en historie med kroniske invaliderende sygdomme såsom nyresvigt, cancer, autoimmune sygdomme, hypothyroidisme, diabetes mellitus eller AIDS.
2. Forsøgspersoner, der er involveret i ekstremt høj fysisk aktivitet (mere end 10 timer om ugen med sport eller arbejde, der kræver ekstrem fysisk aktivitet såsom skovlning eller hårdt manuelt arbejde.
3. Personer med en historie med stofmisbrug eller alkoholisme
4. Personer, der bruger anorexigene eller anabolske lægemidler, eller kroniske brugere af ikke-steroide antiinflammatoriske lægemidler.
5. Personer, der ryger mere end 5 cigaretter om dagen (91 pakker om året)
6. Overdreven underernærede forsøgspersoner, defineret som et kropsmasseindeks under 18 kg/m2.

PROSPECTIVE STUDIE:

Hovedformål:

At studere virkningerne af en periode på tre måneder med kaloriebegrænsning hos normale frivillige på ekspressionen af ​​SIRT1 og UCP3 i muskler, SIRT6 i PBMC, brun fedtvævsaktivitet og akkumulering af markører for oxidativ skade.

Specifikke mål:

1. At udvikle en prospektiv model for kaloriebegrænsning hos normale menneskelige frivillige.

2. For at studere ændringer forbundet med kaloriebegrænsning på:

   • Serummarkører for betændelse og frie fedtsyrer under faste.
   • Optagelsen af ​​18fluordexoyglucose af brunt fedtvæv målt ved PET-CT
   • Ekspressionen af ​​mRNA af UCP3 og SIRT1 i muskelbiopsier.
   • Ekspressionen af ​​mRNA for SIRT1 og 6 i mononukleære muskelceller og perifere blodceller
   • Akkumulering af 4 hydroxynonenal og 8 hydroxyguanosin i muskler, som markører for oxidativ skade
   • Produktionen af ​​ROS af perifere neutrofiler som et overordnet mål for evnen til at generere frie radikaler
   • Insulinfølsomhed, målt ved hjælp af formel afledt af glucosetolerance. METODOLOGI Præmenopausale kvinder, i alderen 25 til 40 år, med et BMI mellem 27 og 32 kg/m2, interesserede i at tabe sig, vil blive undersøgt. Inklusionskriterier vil være: fuldført gymnasiet, stabil vægt (± 2 kg) i de sidste seks måneder og fravær af diabetes, medicinindtag, der kan påvirke energiforbruget såsom betablokkere (undtagen orale præventionsmidler) og manglende engagement i konkurrence- eller udmattende fysiske aktiviteter. Kvinder skal bruge en effektiv præventionsmetode, og der vil blive udført en graviditetstest hver måned, mens undersøgelsen varer.

Efter at have underskrevet en informeret samtykkeerklæring vil det samlede energiforbrug blive målt ved hjælp af kalorimetri og aktigrafi eller dobbeltmærket vand. Forsøgspersoner vil blive anset for at være i energibalance under hensyntagen til, at vægten er stabil (manglen på vægtændring vil blive vurderet i løbet af de to uger, der kræves til inklusionsstudier). Derfor kan man være sikker på, at energiindtaget på det tidspunkt er lig med det samlede energiforbrug.

Bagefter blev forsøgspersoner udsat for en begrænsning på 25 % af deres målte samlede energiforbrug (dette niveau af begrænsning er blevet godt tolereret af frivillige, selv i løbet af et år). Begrænsningen vil blive afbalanceret ved at bruge en middelhavsdiæt, der opretholder en andel på 50 % kulhydrater, 25-30 % lipider, 25 % proteiner og en forsyning med 100 % af behovet for mikronæringsstoffer. Patienterne vil deltage i diætistforstærkning hver uge. For at lette begrænsningsperioden tillades et ekstra måltid en gang om ugen. I henhold til vægtændring vil frivillige blive betragtet som energibegrænsede (gruppe 1), hvis de taber sig mindst 3 kg eller 5 % vægt i løbet af undersøgelsesperioden. I stedet vil de forsøgspersoner, der ikke når disse mål, blive betragtet som kontrolgruppen (Gruppe 2).

Indgrebet vil vare tre måneder og vil blive udført i en periode, hvor temperaturen forbliver relativt stabil og er lavere, i Santiago Chile, for at undgå klimapåvirkning på brunt fedtvævsaktivitet. Det ideelle vil være mellem maj og august. Begge grupper vil blive evalueret på ugentlig basis af en ernæringsekspert for at vurdere overholdelse af diæten, forstærke indikationer og blive vejet. Forsøgspersoner vil modtage et månedligt pengevederlag for at tillade køb af specifikke fødevarer og mærker, der er foreskrevet. Hvert emne vil blive undervist i sund kost og fysisk aktivitet livsstil. Eventuelle ændringer i fysisk aktivitet, som vil blive konstateret ved hjælp af bærbare actigrafer (Actiheart®).

Bortset fra vægtændringer vil frivillige blive betragtet som kaloriebegrænsede, hvis triglyceridniveauer falder med mindst 15 % og T3-niveauer reduceres med mindst 8 ng/dl.

Ved baseline og slutningen af ​​den tre måneders interventionsperiode, hvor kontroller skal være i nul energibalance og tilhængende forsøgspersoner i negativ energibalance, vil følgende bestemmelser blive udført:

1. Måling af rutinemæssige kliniske laboratorieparametre for at kassere samtidige sygdomme.
2. Måling af fastende serumfrie fedtsyrer.
3. Måling af ultrasensitivt C-reaktivt protein og carboxymethyllisin (CML) som henholdsvis inflammationsmarkør og glycotoxin ved hjælp af kommercielle ELISA-sæt.
4. Måling af triglycerid- og T3-niveauer for at vurdere overholdelse af kaloriebegrænsning.
5. Glucosetolerancekurve til at måle glukose og insulin og beregne insulinfølsomhed ved hjælp af Matsuda-formlen
6. Måling af oxidativt udbrud af perifere neutrofiler ved fluorescensaktiveret cellesortering (FACS) som udtryk for organismens ROS-produktionskapacitet
7. Måling af SIRT1- og 6-genekspression i PBMC ved RT-PCR ifølge teknikken rapporteret af Crujeiras et al.
8. PET CT til måling af 18fluordeoxyglucoseoptagelse af supraclavikulært fedt under termoneutrale forhold og efter nedsænkning af en fod i vand ved 8°C i fem minutter, ifølge Virtanen et al.

9. Vastus lateralis muskelbiopsi, udført af en læge ved hjælp af en Bard-nål ved hjælp af en teknik, der tidligere er rapporteret, køb vores gruppe (dette er en sikker og enkel procedure, men den opnåede biopsiprøve er lille, derfor er de analyser, der kan udføres, begrænsede), for at måle :

   • mRNA for UCP3 ved RT-PCR under anvendelse af teknikken rapporteret af Millet et al. i biopsier opnået på lignende måde hos mennesker.
   • mRNA for SIRT1 ved RT-PCR under anvendelse af teknikken rapporteret af Heilbronn et al.
   • Immunhistokemisk ekspression af 8 hydroxyguanosin og 4 hydroxynonenal som oxidationsmarkører ved hjælp af metoder, der tidligere er rapporteret af os.
10. Kropssammensætningsmåling ved dobbelt energi røntgenabsorptiometri (DEXA).
11. Måling af hvileenergiforbrug i et indirekte kalorimeter med åbent kredsløb (model 2900, Sensor Medics Corp., Yerba Linda, CA, USA).
12. Actigrafi ved hjælp af Actiheart actigraphs til at vurdere eventuelle ændringer i spontan fysisk aktivitet induceret af kaloriebegrænsning.

Telomerlængde vil ikke blive målt i den prospektive protokol, da der ikke vil blive opdaget ændringer i den korte undersøgelsesperiode.