- ICH GCP
- 미국 임상 시험 레지스트리
- 임상시험 NCT04962100
정자 선택의 가능한 바이오마커로서의 용량화 관련 단백질 티로신 인산화 (FOSFOTIR)
환자 및 기증자의 정자에서 정자 선택의 가능한 바이오마커로서의 용량 관련 단백질 티로신 인산화
연구 개요
상세 설명
인간 남성은 사정 시 여성의 질에 수백만 개의 정자 세포를 축적합니다. 그러나 소수의 정자 세포만이 나팔관에 도달할 수 있습니다. 사실, 100-1000개 사이의 정자만이 적운-난모세포 복합체에 도달하고 오직 하나만 난모세포를 수정시킬 수 있습니다.
모든 포유류의 사정액에서 나온 정자 세포는 난모세포를 수정시킬 수 없습니다. 수정 능력을 획득하기 위해 정자는 수정 능력이라는 과정을 거쳐야 합니다. 정전용량은 정자의 생화학적 및 생리학적 변화와 관련된 복잡한 현상으로 정의됩니다.
이러한 변경 사항은 다음과 같습니다.
- 단백질 손실 또는 저분자량 다른 단백질로 대체
- 인지질의 변형, 콜레스테롤/인지질 비율 감소
- 당단백질의 탄수화물 분율 변화
- 지질 및 단백질 이동성
복잡한 용량화 과정과 관련된 모든 사건이 알려진 것은 아닙니다.
다음 단계를 구분할 수 있습니다.
- 세포막 유동화
- 세포내 Ca2+ 증가
- 제어된 양의 활성 산소종 생성
- 세포내 pH 증가 및 정자막 전위의 과분극
- 단백질 인산화(세린, 트레오닌 및 티로신 잔기)
생체 내 조건에서 운동성 정자는 자궁경관 점액을 통해 능동적으로 이동하고 사정액의 나머지 부분과 분리됩니다. 시험관 내에서 필요한 기간 동안 특정 배양 조건에 노출되면 정자 수용 능력을 달성할 수 있습니다.
정전 후 정자는 세 가지 특성을 얻습니다.
- 과잉 활성화.
- 아크로좀 반응.
- 정자-난모세포 상호작용.
정전용량화 과정은 정자가 난모세포를 둘러싸고 있는 세포층을 통과하고 첨체 반응을 겪을 수 있도록 하기 위해 필요합니다. 정자의 일부만이 특정 시점에서 수용력 상태에 도달하는 것으로 알려져 있습니다.
용량화 과정은 주로 단백질의 번역 후 변형에 따라 달라집니다. 이러한 단백질이 겪는 가장 중요한 변형 중 하나는 인산화입니다. 정자 용량화 동안 세린, 트레오닌 및 티로신 잔기가 인산화됩니다. 그러나 티로신 잔기의 인산화는 정자 용량화의 가장 좋은 지표입니다.
유세포 분석법에 의한 정자 단백질의 티로신 잔기의 인산화 평가를 통해 시험관 내에서 정자의 수용 능력 정도를 평가하고 이 과정을 적절하게 수행한 정자의 수를 결정할 수 있습니다. 앞서 언급한 바와 같이 샘플의 모든 정자 세포가 용량화 과정을 거치는 것은 아니며 모든 정자 세포가 티로신 잔기에서 동일한 비율의 인산화 단백질을 나타내는 것은 아닙니다.
냉동 보존 프로세스 및 수정 능력 치료(IA 또는 IVF/ICSI)에 사용할 때까지 샘플의 배양 시간과 같은 특정 이벤트는 용량화 프로세스에 영향을 줄 수 있습니다. 따라서 유세포 분석법에 의한 정자의 티로신 인산화 수준을 측정하면 연구자가 샘플의 용량화 수준을 알 수 있습니다. 샘플을 다른 기간 동안 배양할 때 성공률의 변화를 보고하는 연구가 있습니다. 잠복기는 정자의 첨체 반응 속도에 영향을 미치며 DNA 단편화에도 영향을 미칠 수 있습니다. 또한, 이러한 배양이 수행되는 온도도 정자 용량에 영향을 미치는 것으로 보입니다.
위의 내용을 바탕으로 이 프로젝트는 정자의 티로신 인산화 수준과 정액 샘플의 기능적 품질 및 주기의 번식 성공 사이의 가능한 상관 관계를 분석하는 것을 목표로 합니다. 이와 병행하여 조사관은 정자 용량화 과정이 일단 용량화되면 샘플의 배양 시간에 의해 영향을 받는지 또는 정자 샘플의 품질에만 전적으로 의존하고 남성에게 고유한 것인지를 분석할 것입니다.
연구 유형
등록 (실제)
단계
- 해당 없음
연락처 및 위치
연구 장소
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Sevilla, 스페인, 41092
- IVI RMA Sevilla
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참여기준
자격 기준
공부할 수 있는 나이
건강한 자원 봉사자를 받아들입니다
설명
포함 기준:
- 연구와 관련된 절차를 시작하기 전에 사전 서면 동의서에 서명해야 합니다.
- 성적 금욕(2~5일).
- 진단 또는 인공 수정 치료를 위해 신선한 정액 샘플을 제공하는 남성 환자입니다.
- 기증을 위해 또는 기증 프로그램에 그를 포함시키기 위한 이전 테스트를 위해 신선한 정액 샘플을 제공하는 남성 기증자가 되는 것.
- 인공수정을 받고 있는 여성 환자입니다.
제외 기준:
- 고환 또는 부고환 기원의 정자 사용.
- 정자 농도가 1밀리/ml 미만인 정자 과소증 또는 정자 과소증.
- 5일 이상의 금욕으로 얻은 사정.
- 파트너의 정액으로 인공 수정 주기를 위한 냉동 정액 샘플.
- 임신의 생존 가능성을 손상시키는 자궁 기형을 나타내는 여성 환자(3cm 초과의 내부 또는 점막하 근종, 폴립, 선근증 또는 선천성 또는 후천성 기형). Hydrosalpinx를 가진 여성 환자.
- 이전에 2회 이상의 낙태(반복 낙태)를 경험한 환자.
- 체질량 지수가 30Kg/m2 이상인 환자.
공부 계획
연구는 어떻게 설계됩니까?
디자인 세부사항
- 주 목적: 기초 과학
- 할당: 해당 없음
- 중재 모델: 단일 그룹 할당
- 마스킹: 없음(오픈 라벨)
무기와 개입
참가자 그룹 / 팔 |
개입 / 치료 |
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실험적: 연구 인구
신선한 사정된 정액의 샘플을 제공하는 남성 환자 및 기증자는 파트너의 정액 또는 냉동 기증자 정액으로 인공 수정을 받는 여성 환자뿐만 아니라 이 연구의 모집단이 될 것입니다.
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샘플의 거시적 및 미시적 특성을 평가한 후 샘플을 세척하고 밀도 구배의 3개 레이어를 사용하여 처리합니다. 진단 분석을 위한 샘플의 경우 나머지 부피는 37ºC에서 배양되며 0.1-0.2 ml 분취량은 t0(인큐베이터에 샘플을 도입하기 직전), t1(인큐베이션 1시간 후) 및 t3(인큐베이션 3시간 후)에서 처리 종료 시부터 취합니다. 또한 밀도 구배로 샘플을 처리하기 전에 세척 후 샘플을 채취합니다. 수정을 위해 처리된 샘플의 경우 수정이 수행되는 정확한 순간에 추가 분취량을 취하고 경과된 배양 시간을 기록합니다. 용량화의 평가는 유세포 분석법에 의한 티로신의 인산화 상태를 분석함으로써 수행될 것이다. |
연구는 무엇을 측정합니까?
주요 결과 측정
결과 측정 |
측정값 설명 |
기간 |
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티로신 잔기의 인산화를 평가하여 정자 용량화 상태를 결정하기 위해
기간: 1 일
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유세포 분석은 용량 상태를 결정하기 위해 시험관 내에서 용량화된 정액 샘플의 정자 단백질에서 티로신 잔기의 인산화 수준을 평가하기 위해 수행됩니다.
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1 일
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공동 작업자 및 조사자
스폰서
수사관
- 수석 연구원: Cristina González Ravina, PhD, IVI RMA Sevilla
간행물 및 유용한 링크
일반 간행물
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연구 주요 날짜
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연구 완료 (실제)
연구 등록 날짜
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추가 정보
이 연구와 관련된 용어
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미국 FDA 규제 기기 제품 연구
미국에서 제조되어 미국에서 수출되는 제품
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