摄入黄粉虫蛋白对人体跑步运动后肌肉蛋白合成的影响 (Centurion)

为了评估志愿者是否有资格参加这项研究，我们将邀请他们到大学进行筛选访问。 在筛选会议开始时，我们将解释整个实验试验并回答任何潜在问题。 此后，要求志愿者阅读、填写并签署知情同意书。 签署知情同意书后，将根据纳入和排除标准评估参与者的资格。 为了进一步评估他们的资格，参与者将被要求填写一份医疗问卷，以评估他们的总体健康状况、药物使用情况、习惯性食物摄入和身体活动。 将确定体重（精度为 0.1 千克）和身高（精度为 0.01 米），并通过双能 X 射线吸收测定法 (DEXA) 扫描评估身体成分。 DEXA 扫描是一种简单的非侵入性程序。 在程序开始时，受试者将被要求躺在扫描台上，并且他们需要在测量过程中保持不动。 当扫描仪移动时，双能量束穿过目标骨骼肌部分并由检测器测量。 重复此过程，直到扫描整个身体，大约需要 3 分钟。

筛选会议将在早上进行，并指示参与者早上不要吃任何早餐，以避免 DEXA 扫描受到干扰。

如果在筛选过程中出现意外的医学发现，将始终通知受试者。 如果受试者不想收到此通知，则他/她不能参加研究。 然后为参与者提供市售小吃。 最后，Vo2peak 将通过使用跑步机（Technogym，鹿特丹）的意志疲劳增量跑步测试来确定。 以步行速度（5 公里/小时）进行 5 分钟热身后，速度将增加（女性 8 公里/小时，男性 9 公里/小时）三分钟。 接下来，女性的速度将提高到 11 公里/小时，男性的速度将提高到 12 公里/小时，持续两分钟。 随后，跑步速度将保持不变，但倾斜度将每 2 分钟增加 2%，直到意志力疲劳。 O2 吸收和 CO2 排泄（Omnical，马斯特里赫特大学，荷兰）、跑步速度（v）、倾斜度（%）和心率（Polar Finland）将在每个间隔记录。 完成测试后，将使用 Borg 量表 6-20 确定感知用力 (RPE) 的等级。

筛选访问后，将向参与者提供 2 天的食物和活动日志，在测试第 1 天之前的 2 天内填写。 在第 1 天测试之后，将向参与者提供 2 天的食物和活动日志，并在第 2 天测试前的 2 天内填写。

在这 2 天内，参与者可以吃和喝他们通常会吃的食物，酒精饮料和蛋白质补充剂除外。 此外，参与者需要在实验前一天晚上（不迟于 22:00）享用标准化的晚餐和小吃。 这种标准化的晚餐是“Aviko maaltijdpannetje”，将在普通超市购买。 作为晚间小吃，将提供“Mondelice 香草甜点”和“Liga Evergreen”。 将检查制造商的有效期。 同时，膳食将储存在人类生物学系马斯特里赫特代谢研究中心 (MRUM) 膳食厨房的适当冰箱中。 受试者将在筛选后的第 1 天测试前一晚获得晚餐，并在第 1 个测试日结束时获得第 2 天测试前一晚的晚餐。

将指示所有参与者在实验前 2 天避免进行任何类型的剧烈运动，并将他们的活动记录在提供的活动日志中。 参与者被要求在测试第 1 天之前的 2 天内尽可能地复制他们在测试第 2 天的食物摄入量和身体活动。

每个受试者将参加 2 次持续约 10 小时的实验性试验。 研究方案的概要如图 3 所示。受试者将被指示在禁食和休息过夜的状态下于上午 7:45 到大学报到，这意味着参与者不得从实验前一晚22:00，按指示乘汽车或公共交通工具来校。 受试者到达大学后，我们会要求他们穿上短裤，测量他们的体重，并将他们分配到一张床上。 受试者将以仰卧位休息，并将特氟龙导管插入加热的手背静脉中，并放置在热箱 (60°C) 中以进行动脉化采血。 将在 t= -210 分钟时收集基线血样 (20 mL)，以确定干预前的氨基酸富集水平。 在收集基础血样后，将第二根聚四氟乙烯导管插入对侧手臂的肘前静脉，以输注氨基酸 13C6-苯丙氨酸和 D2-酪氨酸的稳定同位素。 在同位素输注开始时，血浆苯丙氨酸和酪氨酸池将用单剂量示踪剂溶液启动，此后将立即开始连续示踪剂输注。

在整个实验测试日期间，每次抽血前，将带有手背导管的手在 60°C 的热箱中预热 10 分钟，以增加血流量。 这使得更容易收集血液并防止营养物质从血液交换到其他组织。 因此，它使我们能够从静脉中采集富含营养的（动脉化）血液。 动脉血样 (10mL) 将在 t = -180、-120、-60 和 0 分钟时收集，以评估吸收后静息过夜期间示踪剂输注期间的血浆示踪剂富集情况。 在 30 分钟的预输注期 (t = -180) 之后，在此期间示踪剂输注达到稳定状态，将从 m 进行第一次肌肉​​活检。 股外侧肌确定背景富集。 在 t=-45 分钟时，将进行跑步锻炼（40 分钟，心率为 70%，对应 Vo2peak）。 随后，在 t = 0 分钟时，将从同一条腿上进行第二次活检，以评估基础肌肉蛋白质合成率。 在第二次活组织检查后，受试者将立即饮用一种黄粉虫蛋白（约 0.38 克/千克体重）或一种无热量的安慰剂饮料。 将指示受试者在约 5 分钟内进餐。

摄入饮料后，秒表将重置（t = 0 分钟），并在后的 t = 30、60、90、120、180、240、300 和 360 分钟收集动脉血样（10 mL） -评估血浆氨基酸概况和富集的膳食期。 为了确定餐后肌肉蛋白质合成 (MPS)，将在 t = 180 和 t = 360 分钟从对侧腿进食后进行另外 2 次活检。 t = 180 分钟的肌肉活检将允许计算峰值 MPS。 通常假设峰值 MPS 率在预测肌肉适应性结果方面比在较长时期内计算的 MPS 更有意义。 然而，富含蛋白质的正餐/零食之间的固定时间通常超过 3 小时，并且肌肉蛋白质合成峰值可能出现在不同的时间点，具体取决于消耗的蛋白质来源。 因此，蛋白质摄入后对肌肉蛋白质合成率的刺激可以延长到超过这个 3 小时时间点。 因此，在 t = 360 分钟时进行肌肉活检可以让我们获得关于蛋白质摄入的合成代谢反应持续时间的生理相关信息。 总的来说，通过获得的活检，我们可以测量静息状态（-180-0 分钟）、蛋白质摄入后的早期（0-180 分钟）、蛋白质摄入后的晚期（180-360 分钟）和整个餐后时期（0 - 360 分钟；主要结果）。

在每个测试日期间，将通过 4 个单独的切口进行总共 4 次肌肉活检，2 次来自左腿，2 次来自右腿。 每个测试日共采集 13 次血样，采集的第一个样本为 20mL，后续样本为 10mL，共计 140mL。 此外，将在 t = -60、30 和 180 分钟时评估胃肠道 (GI) 症状，并在 t = 15 分钟时通过问卷评估适口性（附录 F1.2）。

每个参与者将参加 2 个测试日（交叉设计）。 测试日是相同的（如上文所述），但以下情况除外：

• 测试饮料：一天喝粉虫蛋白饮料，另一天喝无热量的安慰剂。