A lisztféreg fehérje lenyelésének hatása az izomfehérje szintézisre futás utáni edzés után (Centurion)

Annak felmérésére, hogy az önkéntesek jogosultak-e részt venni ebben a tanulmányban, meghívjuk őket az egyetemre egy szűrővizsgálatra. A szűrés elején elmagyarázzuk a teljes kísérleti kísérletet, és megválaszoljuk az esetleges kérdéseket. Ezt követően megkérjük az önkénteseket, hogy olvassák el, töltsék ki és írják alá a beleegyező nyilatkozatot. A tájékoztatáson alapuló beleegyező nyilatkozat aláírása után a résztvevők alkalmasságát a be- és kizárási kritériumok alapján értékelik. Alkalmasságuk további értékeléséhez a résztvevőket arra kérik, hogy töltsenek ki egy orvosi kérdőívet általános egészségi állapotuk, gyógyszerhasználatuk, szokásos táplálékfelvételük és fizikai aktivitásuk felmérésére. Meg kell határozni a testtömeget (0,1 kg-os pontossággal) és a magasságot (0,01 m-es pontossággal), és a testösszetételt Dual Energy X-ray Absorptiometry (DEXA) vizsgálattal értékelik. A DEXA szkennelés egy egyszerű, nem invazív eljárás. Az eljárás elején az alanyokat felkérik, hogy feküdjenek le egy pásztázóasztalra, és mozdulatlanul kell maradniuk a mérés során. Ahogy a szkenner mozog, kettős energianyaláb halad át a megcélzott vázizomszakaszon, és egy detektor méri. Ezt az eljárást addig ismételjük, amíg az egész testet be nem vizsgáljuk, és körülbelül 3 percig tart.

A szűrésekre délelőtt kerül sor, és a résztvevőket arra utasítják, hogy ne reggelizzenek reggel, hogy elkerüljék a DEXA-vizsgálat zavarait.

A szűrés során váratlan orvosi lelet esetén az alanyokat mindig értesítjük. Ha egy alany nem akarja megkapni ezt az értesítést, nem vehet részt a vizsgálatban. Ezután biztosítson a résztvevőnek egy kereskedelmi forgalomban kapható harapnivalót. Végül a Vo2peak-et egy növekményes futásteszttel határozzák meg az akaratlagos fáradtságig egy futó futópadon (Technogym, Rotterdam). 5 perces gyaloglási sebességgel (5 km/h) végzett bemelegítés után három percre megnövelik a sebességet (nők 8 km/h és férfiak 9 km/h). Ezt követően a nőknél 11 km/h-ra, a férfiaknál 12 km/h-ra emelik a sebességet két percre. Ezt követően a futási sebesség változatlan marad, azonban a lejtő 2 percenként 2%-kal nő az akaratlagos kifáradásig. Az O2-felvétel és a CO2-kiválasztás (Omnical, Maastrichti Egyetem, Hollandia), a futási sebesség (v), a dőlésszög (%) és a pulzusszám (Polar Finland) minden intervallumban rögzítésre kerül. Az észlelt terhelés (RPE) besorolása a 6-20-ig terjedő Borg-skála segítségével történik a teszt befejezése után.

A szűrőlátogatás után a résztvevők egy 2 napos étkezési és tevékenységi naplót kapnak, amelyet az 1. tesztnapot megelőző 2 napon belül kell kitölteni. Az 1. tesztnapot követően a résztvevők egy 2 napos étkezési és tevékenységi naplót kapnak, amelyet a 2. tesztnapot megelőző 2 napon belül kell kitölteni.

Ez alatt a 2 nap alatt a résztvevők ehetik és ihatják azokat az ételeket, amelyeket általában fogyasztanának, kivéve az alkoholos italokat és a fehérje-kiegészítőket. Ezenkívül a résztvevőknek szabványos vacsorát és uzsonnát kell fogyasztaniuk a kísérleti vizsgálat előtti este, legkésőbb 22:00 óráig. Ez a szabványos vacsora „Aviko maaltijdpannetje”, és egy szokásos szupermarketben vásárolható meg. Esti uzsonnaként egy "Mondelice vanília desszert" és egy "Liga Evergreen" kerül felszolgálásra. A gyártó által megadott lejárati dátum ellenőrzésre kerül. Eközben az ételeket a Humán Biológiai Tanszéken található Maastrichti Metabolikus Kutató Egység (MRUM) diétás konyhájában megfelelő fagyasztóban tárolják. Az alanyok a szűrést követően megkapják az 1. vizsgálati nap előtti esti vacsorát, és a 2. tesztnap előtti estén, az első vizsgálati nap végén kapják meg a vacsorát.

Minden résztvevőt arra utasítanak, hogy a kísérleti vizsgálat előtt 2 napig tartózkodjanak mindenféle nehéz fizikai gyakorlattól, és jegyezzék fel tevékenységeiket a mellékelt tevékenységnaplóban. A résztvevőket arra kérik, hogy az 1. tesztnapot megelőző 2 napban a lehető legpontosabban ismételjék meg étkezéseiket és fizikai tevékenységeiket a 2. tesztnaphoz.

Minden alany 2 kísérleti kísérletben vesz részt, amelyek ~10 óráig tartanak. A vizsgálati protokoll vázlata a 3. ábrán látható. A vizsgálati alanyok 7:45-kor jelentkezzenek az egyetemen egy éjszakán át éheztetett és pihent állapotban, ami azt jelenti, hogy a résztvevőknek nem szabad enni és inni (kivéve a vizet) 22:00 óráig a kísérleti vizsgálatot megelőző este, és utasítják őket, hogy autóval vagy tömegközlekedéssel érkezzenek az egyetemre. Miután az alanyok megérkeznek az egyetemre, megkérjük őket, hogy vegyék fel rövidnadrágjukat, határozzák meg testtömegüket, és helyezzék ágyba. Az alanyok hanyatt fekszenek, és egy teflon katétert helyeznek be egy fűtött háti kéz vénába, és melegdobozba (60 °C) helyezik az artériás vérmintavételhez. Az alapszintű vérmintát (20 ml) t = -210 percnél gyűjtik, hogy meghatározzák az aminosav-dúsítás szintjét a beavatkozás előtt. A bazális vérminta vételét követően egy második teflon katétert helyeznek be az ellenoldali kar antecubitalis vénájába a 13C6-fenilalanin és D2-tirozin aminosavak stabil izotóp-infúziója érdekében. Az izotóp infúzió kezdetekor a plazma fenilalanin és tirozin medencéket fel kell tölteni egyetlen adag nyomjelző oldattal, majd közvetlenül ezután kezdődik a folyamatos nyomjelző infúzió.

A teljes kísérleti tesztnap alatt a háti kézkatéterrel ellátott kezet minden vérvétel előtt 10 percig előmelegítik egy forró dobozban 60°C-on a véráramlás fokozása érdekében. Ez megkönnyíti a vérgyűjtést, és megakadályozza a tápanyagcserét a vérből más szövetekbe. Ezért lehetővé teszi, hogy tápanyagban gazdag (arterializált) vért gyűjtsünk a vénából. Arterializált vérmintákat (10 ml) gyűjtünk t = -180, -120, -60 és 0 percnél, hogy értékeljük a plazma nyomjelző feldúsulását a nyomjelző infúzió során az éjszakai nyugalmi posztabszorpciós periódusban. 30 perces infúzió előtti periódus után (t = -180), amely alatt a nyomjelző infúzió eléri az egyensúlyi állapotot, az első izombiopsziát veszik a m. vastus lateralis a háttér dúsulás meghatározásához. t=-45 percnél futást végeznek (40 perc 70%-os pulzusszámmal a Vo2csúcsnak megfelelően). Ezt követően, t = 0 percnél egy második biopsziát vesznek ugyanabból a lábból, hogy felmérjék a bazális izomfehérje szintézisét. Közvetlenül a második biopszia után az alanyok vagy lisztféreg fehérjét (~0,38 g testtömeg-kilogrammonként) vagy kalóriamentes placeboitalot fogyasztanak. Az alanyokat utasítják, hogy ~5 percen belül fogyasszák el az ételt.

Ital lenyelése esetén a stopper alaphelyzetbe áll (t = 0 perc), és arterializált vérmintákat (10 ml) gyűjtenek t = 30, 60, 90, 120, 180, 240, 300 és 360 percnél a poszt alatt. - étkezési időszak a plazma aminosavprofiljának és dúsításának értékelésére. Az étkezés utáni izomfehérje szintézis (MPS) meghatározásához további 2 biopsziát vesznek t = 180 és t = 360 perccel az étkezést követően az ellenoldali lábból. Az izombiopszia t = 180 percnél lehetővé teszi a csúcs MPS kiszámítását. Általában azt feltételezik, hogy a csúcs MPS-arányok nagyobb jelentőséggel bírnak az izomadaptív eredmények előrejelzésében, mint a hosszabb időszakra számított MPS. A fehérjében gazdag étkezések/nassolnivalók közötti rendszeres idő azonban általában több mint 3 óra, és az izomfehérje szintézis csúcssebességei különböző időpontokban jelenhetnek meg az elfogyasztott fehérjeforrástól függően. Ezáltal az izomfehérje szintézisének stimulálása a fehérje elfogyasztását követően túlléphet ezen a 3 órás ponton. Ezért a t = 360 percnél végzett izombiopszia lehetővé teszi számunkra, hogy élettanilag releváns információkat szerezzünk a fehérjebevitelre adott anabolikus válasz időtartamára vonatkozóan. A kapott biopsziákkal együttesen mérhetjük az izomfehérje szintézist nyugalmi állapotban (-180 - 0 perc), a fehérjebevitelt követő korai időszakot (0 - 180 perc), a fehérjebevitelt követő késői időszakot (180 - 360 perc), ill. a teljes étkezés utáni időszak (0 - 360 perc; fő eredmény).

Minden vizsgálati napon összesen 4 izombiopsziát vesznek 4 külön bemetszésen, 2 biopsziát a bal lábból és 2 biopsziát a jobb lábból. Minden vizsgálati napon összesen 13 alkalommal vesznek vérmintát, az első minta 20 ml, a következő minták 10 ml, összesen 140 ml. Ezenkívül a gyomor-bélrendszeri (GI) tüneteket t = -60, 30 és 180 percnél, az ízletességet pedig t = 15 percnél kérdőívek segítségével értékelik (F1.2. függelék).

Minden résztvevő 2 tesztnapon vesz részt (cross-over tervezés). A tesztnapok azonosak (a fent leírtak szerint), kivéve a következőket:

• tesztital: lisztkukac fehérjeital az egyik napon, kalóriamentes placebo a másik napon.