La détection des CTC chez les patients atteints d'un cancer du pancréas subissant une cryochirurgie associée à un traitement DC-CIK.

1 jour avant et 2 jours après la cryochirurgie avec ou sans traitement DC-CIK, environ 17 ml de sang d'acide éthylène diamine tétraacétique (EDTA) ont été prélevés par ponction veineuse chez des patients atteints d'un cancer du pancréas et des volontaires sains. Le sang des volontaires sains sera utilisé pour évaluer la sensibilité et la spécificité et comme cellules de contrôle négatif. Pour éviter la contamination par les cellules de la peau, 2 ml de sang seront jetés avant que les échantillons d'étude ne soient prélevés. Brièvement, les cellules mononucléées seront séparées du sang sur Ficoll-Paque pendant 20 min avec 1800 g à 4 ℃. Les cellules d'interface seront retirées et lavées, et les globules rouges (RBC) seront retirés à l'aide d'un tampon de lyse suivi d'un lavage répété. Les cellules mononucléaires seront comptées et aliquotes pour RT-PCR et cytométrie en flux multiparamètres sur la base d'au moins 2-3×106 cellules pour chaque méthodologie. Le culot cellulaire sera remis en suspension dans une solution saline tamponnée au phosphate pour la cytométrie en flux multiparamètre et dans le réactif Trizol pour la RT-PCR. Objectif : L'identification des CTC peut conduire à un meilleur diagnostic et pronostic et pourrait aider à choisir une thérapie adéquate.