장내미생물군과 숙주에 미치는 주요 식사시간 효과 (TIMC)

이 연구는 건강한 성인을 대상으로 공개 라벨 교차 RCT가 될 것입니다. 건강한 성인(>18세) 참가자는 광고 전단지(관련 지원 문서 - "광고 전단지" 참조) 및 입소문을 통해 커뮤니티에서 모집됩니다. 연구자는 연구에 대한 관심을 표명하는 사람들과의 만남을 주선할 것입니다. 연구원은 인구통계학적 정보(예: 연령 및 성별) 피험자에게 급성 또는 만성 질병(의료 서비스를 정기적으로 방문해야 하는 질병으로 정의됨)을 앓고 있는지 여부를 묻습니다(관련 지원 문서 - "건강 설문지" 참조). 만성 질환을 앓고 있는 경우 제외됩니다. 다른 제외 기준에는 지난 3개월 동안 주요 창자 수술 병력, 불안정한 체중, 항생제 또는 스테로이드 사용이 포함됩니다. 참가자는 Human Nutrition, New Lister Building, Glasgow Royal Infirmary 또는 University of Glasgow 메인 캠퍼스 사회 공간(예: 길크리스트). 자녀를 모집하지 않습니다. 연구에 대한 관심을 표명했지만 참여에 적합하지 않은 피험자는 인정되며 제외된 이유에 대한 설명을 받게 됩니다.

정보에 입각한 서면 동의에 따라 참가자는 MS Excel "rand()" 기능을 사용하여 개입 그룹에 무작위로 할당됩니다. 여성은 호르몬 변화가 연구 결과에 미치는 영향을 피하기 위해 월경 주기의 동일한 단계에서 개입을 시작합니다.

식이 중재: 참가자는 두 가지 실험적인 식이 요법을 수행해야 합니다. 두 가지 식이 요법은 주요 식사(저녁과 점심)를 소비하는 시기만 다를 뿐 동일합니다. 참가자는 두 개입 사이에 3주의 세척 기간을 포함하여 1주일 동안 각 다이어트를 따르게 됩니다. 세척 기간은 장내 미생물 특성을 기준선 수준으로 되돌리는 것을 목표로 합니다. 다이어트는 참가자(보건부)의 평균 에너지 요구 사항을 제공하고 연구 기간 동안 참가자의 체중을 안정적으로 유지하는 것을 목표로 합니다. 연구의 모든 식이 측면은 연구팀의 구성원인 자격을 갖춘 영양사/영양사가 설계하고 감독합니다. 참가자에게는 선택할 수 있는 식사 및 간식 목록이 제공됩니다(관련 지원 문서 - "음식 목록 기본 설정" 참조). 모든 식사는 참가자들에게 무료로 제공됩니다. 식사는 University of Glasgow Hub를 사용하여 연구원이 온라인으로 주문하고 슈퍼마켓 직원이 참가자의 거주지로 배달합니다. 몸무게와 키가 측정됩니다.

1주차 참가자는 일주일 동안 자신이 선택한 식사가 포함된 구조화된 식단을 따르게 됩니다. 참가자는 연구원이 제공할 목록에서 이러한 식사를 선택합니다. 식사 시간이 지정되고 참가자는 25±5분 이내에 식사를 완료해야 합니다. 참가자는 식단을 따르는 방법에 대한 서면 지침을 받게 됩니다(관련 지원 문서 - "지침서" 및 "참가자 연구 일정" 참조). 참가자는 5일차 정오부터 8일차 정오까지 생성된 모든 대변 샘플을 제공합니다. 단식 혈액(6ml) 및 소변 샘플은 1주차 개입이 끝난 다음 날(즉, 8일). 이것들은 Glasgow Royal Infirmary의 New Lister Building에 있는 Human Nutrition 실험실에서 수집될 것입니다. 체중 및 신장 측정이 반복됩니다.

2주, 3주 및 4주 휴약 기간 동안 참가자는 습관적인 식단을 따르고 연구 개입은 일어나지 않습니다.

5주차 이것은 1주차에 ​​식이 중재 및 샘플 수집을 반복합니다. 유일한 차이점은 1주차의 점심 식사가 5주차의 저녁 식사로 바뀐다는 것입니다.

식이 준수: 참가자에게 처방된 식이와 함께 "체크리스트"를 작성하도록 요청하여 2가지 실험 식이 준수를 모니터링합니다(관련 지원 문서 - "준수 질문서" 참조). 참가자의 동기부여와 다이어트 준수를 높이기 위해 3일마다 부드러운 알림 전화 또는 문자가 참가자에게 전송됩니다.

샘플 수집 및 분석: 신선한 대변 및 소변 샘플을 위에서 설명한 대로 수집합니다. 주요 결과 측정은 다음과 같을 것입니다. 대사산물(짧은 사슬 지방산, 황화물, 암모니아, 젖산염, 숙신산염, 에탄올). 혈액 지질, 식욕 호르몬, 아디포카인 및 염증 마커는 ELISA 키트를 사용하여 측정됩니다. 대변 ​​샘플은 참가자의 집에서 수집하거나 선불 택시로 실험실로 배달됩니다.

상세 분석: 게놈 DNA는 사내에서 개발된 분석법을 사용하여 대변 샘플에서 추출됩니다. 샘플은 1% Agarose 젤에서 순도를 테스트하고 핵산 농도는 Nanodrop으로 측정합니다. 16S rRNA 유전자의 V4 영역 증폭은 PCR 및 High Fidelity Mastermix 및 Golay Barcodes를 사용하여 사내에서 수행됩니다. 풀링된 샘플은 MiSeq에서 250bp 페어 엔드 시퀀싱을 위해 University of Birmingham으로 전송됩니다. 데이터는 Bioinfomatics의 Gerasimidis PDRA 박사가 분석합니다. 마찬가지로 SCFA 측정은 FID 검출기가 장착된 가스 크로마토그래피를 사용하여 산성화된 에테르 추출물에서 수행됩니다. 정량화는 실제 표준에 따라 수행됩니다. 다른 세균 대사산물 및 심혈관 마커는 이전에 보고된 바와 같이 비색 및 효소 분석 및 상업적으로 이용 가능한 ELISA 키트로 분석될 것입니다. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28318688 및 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26119811

전력 계산: 파일럿 데이터가 부족하여 정확한 전력 계산이 불가능합니다. 5.4μmol/g의 분변 아세테이트(SD=5) 및 80% 검정력의 평균 차이에 대한 유사한 연구를 기반으로 20명의 참가자가 필요합니다. 전원 계산은 처음 7명의 참가자를 모집하고 연구를 완료한 후 수정됩니다.