흑색종에서 ICI 의존성 면역 각성을 강화하기 위한 TNF 차단 (ATPIC)

최신 기술과 관련된 프로젝트의 배경 및 독창성

진행성 흑색종 환자의 치료를 위해 도입된 항PD-1 및 항CTLA-4와 같은 획기적인 면역관문억제제(ICI)에도 불구하고 이들 중 60%는 치료 시작 후 5년 이내에 반응하지 않거나 재발합니다. 인플릭시맙과 같은 TNF(종양 괴사 인자 알파)의 억제제(TNFi)로 치료할 수 있는 대장염과 같은 ICI 치료 시 심각한 면역 관련 부작용(irAE)이 유발됩니다. 면역 및 임상 반응에 대한 TNF1의 약력학적 영향은 아직 명확하지 않습니다.

TNF는 생쥐에서 종양 괴사를 유발할 수 있는 가용성 인자로 확인되었지만 종양 미세 환경에서 TNF의 만성 생산은 암 진행에 기여하는 것으로 나타났습니다. 조사자들과 다른 사람들은 이 암 촉진 속성이 면역 탈출을 포함한 여러 메커니즘에 의존한다는 것을 보여주었습니다. 예를 들어, 연구자들은 TNF가 CD8 T 세포에서 활성화 유도 세포 사멸(AICD)을 유발하여 마우스 흑색종 종양에서 CD8 T 세포의 침윤을 제한한다는 것을 보여주었습니다. 흑색종, 유방암 및 결장암의 마우스 모델에서 TNFi는 ICI(항-PD-1, 항-CTLA-4) 효능을 향상시키고 대장염과 같은 irAE의 중증도를 감소시킵니다. 따라서 TNF 차단 항체를 ICI에 결합하면 생체 내에서 치료 효능과 내성이 촉진됩니다.

연구자의 미공개 데이터는 모든 치료가 기준선(치료 유도 전, 0주[W0])과 치료 후 6주(W6) 유도 사이에 효과기 기억 표현형(데이터는 표시되지 않음)으로 순환하는 T 세포의 분화를 촉진했음을 보여줍니다. 그들은 또한 상당히 1- 진행성 흑색종 환자의 치료를 위해 도입된 항-PD-1 및 항-CTLA-4와 같은 엄청난 획기적인 면역 체크포인트 억제제(ICI)에도 불구하고 최신 기술과 관련하여 프로젝트의 배경 및 독창성 , 그들 중 60%는 치료 시작 후 5년 이내에 반응하지 않거나 재발합니다. 인플릭시맙과 같은 TNF(종양 괴사 인자 알파)의 억제제(TNFi)로 치료할 수 있는 대장염과 같은 ICI 치료 시 심각한 면역 관련 부작용(irAE)이 유발됩니다. 면역 및 임상 반응에 대한 TNF1의 약력학적 영향은 아직 명확하지 않습니다. TNF는 생쥐에서 종양 괴사를 유발할 수 있는 가용성 인자로 확인되었지만 종양 미세 환경에서 TNF의 만성 생산은 암 진행에 기여하는 것으로 나타났습니다. 조사자들과 다른 사람들은 이 암 촉진 속성이 면역 탈출을 포함한 여러 메커니즘에 의존한다는 것을 보여주었습니다. 예를 들어, 연구자들은 TNF가 CD8 T 세포에서 활성화 유도 세포 사멸(AICD)을 유발하여 마우스 흑색종 종양에서 CD8 T 세포의 침윤을 제한한다는 것을 보여주었습니다. 흑색종, 유방암 및 결장암의 마우스 모델에서 TNFi는 ICI(항-PD-1, 항-CTLA-4) 효능을 향상시키고 대장염과 같은 irAE의 중증도를 감소시킵니다. 따라서 TNF 차단 항체를 ICI에 결합하면 생체 내에서 치료 효능과 내성이 촉진됩니다. 전임상 연구를 기반으로 연구자들은 ICI[항-PD-1, 니볼루맙(nivo) + 항-CTLA-4, 이필리무맙(ipi )] TNFi[certolizumab(certo) 또는 infliximab(inflix)]와 병용(TICIMEL) 또는 비(MELANFalpha). inflix는 2가 항-TNF 키메라 IgG1 단클론 항체인 반면, certo는 인간화 항-TNF 단클론의 1가 PEG화 Fab' 단편입니다. 모든 환자(즉, 92명)는 2018년에서 2021년 사이에 등록되었습니다. TICIMEL(n=32)은 ipi, nivo 및 TNFi(certo 또는 inflix) 병용 투여의 안전성과 내약성을 평가하기 위한 1b상 임상 시험입니다. 14명의 환자로부터 얻은 조사관의 첫 번째 데이터는 세 가지 요법 모두 사람에게 안전하며 certo 코호트에서 높은 반응률을 기대할 수 있음을 나타냅니다. MELANFalpha(n=60)는 ICI에 대한 반응/저항의 예측 바이오마커를 발견하는 것을 목표로 하는 파일럿 연구입니다. 비반응자의 혈장에서 ipi/nivo 처리 시 높은 TNF 수준이 검출됨을 특히 보여줍니다. 연구자의 미공개 데이터는 모든 치료가 기준선(치료 유도 전, 0주[W0])과 치료 후 6주(W6) 유도 사이에 효과기 기억 표현형을 향한 순환 T 세포의 분화를 촉진했음을 보여줍니다. 그들은 또한 환자의 혈액에서 Th1 T 세포의 비율을 상당히 증가시켰습니다. 그러나 이러한 효과는 ipi/nivo 코호트에 비해 certolizumab 코호트에서 크게 증폭되었습니다. 따라서 연구자들은 certolizumab 코호트에서 증가된 IFN-감마 혈장 농도를 관찰했습니다. Th2, Th17 및 Th1/17 T 세포의 비율은 세 가지 치료 요법에 의해 크게 영향을 받지 않았습니다. 또한 TNF와 ICI의 조합은 순환하는 MART-1 특이 CD8 T 세포의 비율 증가와 관련이 있습니다. 이들 세포는 주로 중앙/이펙터 기억 표현형을 나타내었고 CXCR3의 증가된 발현을 보였다(도 1D-F). 연구자들은 3개의 코호트 각각에 등록된 4명의 진행성 흑색종 환자로부터 이전(W0) 및 W6에 얻은 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)에 대해 CiteSeq 단일 세포 RNA 시퀀싱(scRNAseq)을 수행했습니다. 면역 반응의 활성화 및 성숙 징후는 TICIMEL의 모든 환자에서 명백했지만 W6에서는 한 명이었습니다. 이것은 TNF가 ipi/nivo로 치료받은 환자에서 관찰된 면역 증강을 손상시킬 가능성이 없음을 나타냅니다. 또한, 연구자들은 마우스 흑색종 모델(B16Ova)에서 치료 조건이 TICIMEL 및 MELANFalpha(alphaPD-1+alphaCTLA-4+/- TNFi[항-마우스 TNF, 클론 XT3.11])의 조건을 모방하여 3중 요법이 이중 요법과 비교하여 총 종양 퇴행 및 전체 생존의 빈도가 증가했습니다. 3중 요법으로 치유된 마우스는 재도전 실험에서 입증된 바와 같이 항흑색종 기억 반응을 발달시켰습니다. TNF 차단이 어떻게 ICI에 대한 환자의 항흑색종 면역 반응의 각성을 증가시키고 TNF의 특성이 이러한 반응을 차등적으로 조절할 수 있는지를 이해하는 것은 다음과 같은 데 중추적입니다.

• (i) ICI 내성의 원인이 되는 일부 메커니즘을 극복하기 위해 관여해야 하는 세포 및 분자 경로를 더 잘 이해합니다.
• (ii) 이러한 대응을 촉진하기 위한 새롭고 잠재적으로 더 나은 전략을 식별합니다.
• (iii) 그러한 요법으로부터 가장 많은 혜택을 받을 수 있는 환자를 식별합니다.

프로젝트의 가설, 주요 목표 및 종점

조사자들의 최근 발표 및 미발표 데이터를 고려하여 조사자들은 TNF 차단이 환자의 ICI 효능을 촉진할 수 있다는 가설을 세웠습니다. 그러나 이 효과는 사용되는 TNF 차단제의 구조적 특성에 의해 영향을 받을 수 있습니다. 이 가설을 평가하기 위해 연구자들은 TICIMEL(ipi+nivo+certo 또는 inflix) 및 MELANFalpha(ipi+nivo, TNFi 없음) 임상 시험에서 환자의 임상생물학적 반응을 비교할 것입니다. certo와 inflix가 면역 반응에 다르게 영향을 미치는 분자 메커니즘을 명확히 하기 위해 연구자들은 공동 배양 시스템과 고유한 마우스 흑색종 모델에서 각각 생체 외 및 생체 내 실험을 수행할 것입니다.

방법론 및 수행할 작업을 설명하는 프로젝트 계획 1차 및 2차 목표를 달성하기 위해 제안서는 세 가지 주요 WP로 나뉩니다.

WP1: 진행성 흑색종 환자에서 certolizumab 및 infliximab이 ICI 의존성 전신 면역 반응에 어떻게 영향을 미치는지 해독합니다.

WP2: TNF가 진행성 흑색종 환자의 종양에서 ICI 의존성 항흑색종 면역 반응에 미치는 영향을 분석하기 위해. 연구자들은 치료 전과 치료 중에 종양 침윤성 백혈구를 평가하기 위해 TICIMEL의 첫 번째 부분에 등록된 환자의 포르말린 고정 파라핀 포매(FFPE) 흑색종 생검에 대해 이미 면역조직화학(IHC)을 수행했습니다(CD3, CD8, CD4, FOXP3, CD68 ).

WP3: TNF가 공동 배양 실험 및 마우스에서 ICI 의존성 항흑색종 면역 반응에 미치는 영향을 분석하기 위해.