Блокирование TNF для потенцирования ICI-зависимого иммунного пробуждения при меланоме (ATPIC)

Предыстория и оригинальность проекта относительно уровня техники

Несмотря на огромные прорывные ингибиторы иммунных контрольных точек (ICI), такие как анти-PD-1 и анти-CTLA-4, предназначенные для лечения пациентов с запущенной меланомой, 60% из них не реагируют или рецидивируют в течение 5 лет после начала лечения. Серьезные нежелательные явления, связанные с иммунитетом (IRAE), вызываются терапией ICI, такими как колит, который можно лечить ингибиторами (TNFi) фактора некроза опухоли альфа (TNF), такими как инфликсимаб. Фармакодинамическое влияние TNFi на иммунный и клинический ответы еще предстоит выяснить.

Хотя TNF был идентифицирован как растворимый фактор, способный вызывать некроз опухоли у мышей, было показано, что хроническая продукция TNF в микроокружении опухоли способствует прогрессированию рака. Исследователи и другие исследователи показали, что это свойство, способствующее развитию рака, зависит от нескольких механизмов, включая ускользание от иммунного ответа. Например, исследователи показали, что TNF запускает индуцированную активацией гибель клеток (AICD) в Т-клетках CD8, тем самым ограничивая инфильтрацию Т-клеток CD8 в опухолях меланомы мыши. В мышиных моделях меланомы, рака молочной железы и толстой кишки TNFi усиливают эффективность ICI (анти-PD-1, анти-CTLA-4) и снижают тяжесть irAE, таких как колит. Следовательно, сочетание антител, блокирующих ФНО, с ICI повышает эффективность терапии и переносимость in vivo.

Неопубликованные данные исследователей показывают, что все виды лечения способствовали дифференцировке циркулирующих Т-клеток в сторону фенотипа эффекторной памяти (данные не показаны) между исходным уровнем (до индукции лечения, неделя 0 [Н0]) и неделей 6 (Н6) после индукции лечения. Они также значительно 1- Фон и оригинальность проекта в отношении современного уровня техники Несмотря на огромный прорыв ингибиторов иммунных контрольных точек (ICI), таких как анти-PD-1 и анти-CTLA-4, предназначенные для лечения пациентов с прогрессирующей меланомой. 60% из них не отвечают или рецидивируют в течение 5 лет после начала лечения. Серьезные нежелательные явления, связанные с иммунитетом (IRAE), вызываются терапией ICI, такими как колит, который можно лечить ингибиторами (TNFi) фактора некроза опухоли альфа (TNF), такими как инфликсимаб. Фармакодинамическое влияние TNFi на иммунный и клинический ответы еще предстоит выяснить. Хотя TNF был идентифицирован как растворимый фактор, способный вызывать некроз опухоли у мышей, было показано, что хроническая продукция TNF в микроокружении опухоли способствует прогрессированию рака. Исследователи и другие исследователи показали, что это свойство, способствующее развитию рака, зависит от множества механизмов, включая ускользание от иммунного ответа. Например, исследователи показали, что TNF запускает индуцированную активацией гибель клеток (AICD) в Т-клетках CD8, тем самым ограничивая инфильтрацию Т-клеток CD8 в опухолях меланомы мыши. В мышиных моделях меланомы, рака молочной железы и толстой кишки TNFi усиливают эффективность ICI (анти-PD-1, анти-CTLA-4) и снижают тяжесть irAE, таких как колит. Следовательно, сочетание антител, блокирующих ФНО, с ICI повышает эффективность терапии и переносимость in vivo. Основываясь на доклинических исследованиях, исследователи провели два клинических испытания (TICIMEL и MELANFalpha) у пациентов с запущенной меланомой (стадия IIIc/IV), получавших ICI [анти-PD-1, ниволумаб (ниво) + анти-CTLA-4, ипилимумаб (ипи )] в комбинации (TICIMEL) или без нее (MELANFalpha) с TNFi [цертолизумаб (certo) или инфликсимаб (inflix)]. В то время как inflix представляет собой двухвалентное химерное моноклональное антитело IgG1 против TNF, certo представляет собой моновалентный пегилированный Fab'-фрагмент гуманизированного моноклонального антитела против TNF. Все пациенты (то есть 92) были зарегистрированы в период с 2018 по 2021 год. TICIMEL (n = 32) — это клиническое исследование фазы 1b, целью которого является оценка безопасности и переносимости одновременного введения ипи, ниво и TNFi (серто или инфликс). Первые данные исследователей, полученные от 14 пациентов, указывают на то, что обе тритерапии безопасны для человека с многообещающим высоким уровнем ответа в когорте certo. MELANFalpha (n=60) — пилотное исследование, направленное на выявление прогностических биомаркеров ответа/резистентности к ICI. В частности, он показывает, что высокие уровни TNF обнаруживаются при лечении ipi/nivo в плазме пациентов, не ответивших на лечение. Неопубликованные данные исследователей показывают, что все виды лечения способствовали дифференцировке циркулирующих Т-клеток в сторону фенотипа эффекторной памяти между исходным уровнем (до индукции лечения, неделя 0 [Н0]) и неделей 6 (Н6) после индукции лечения. Они также значительно увеличили долю Т-клеток Th1 в крови пациентов. Однако эти эффекты значительно усиливались в когорте цертолизумаба по сравнению с группой ипи/ниво. Соответственно, исследователи наблюдали повышение концентрации IFN-гамма в плазме в когорте цертолизумаба. Три схемы лечения существенно не повлияли на долю Т-клеток Th2, Th17 и Th1/17. Более того, комбинация TNFi с ICI была связана с увеличением доли циркулирующих MART-1-специфических CD8 T-клеток. Эти клетки в основном демонстрировали фенотип центральной/эффекторной памяти и повышенную экспрессию CXCR3 (рис. 1D-F). Исследователи выполнили секвенирование одноклеточной РНК CiteSeq (scRNAseq) на мононуклеарных клетках периферической крови (PBMC), полученных до (Н0) и на Н6 у 4 пациентов с прогрессирующей меланомой, включенных в каждую из 3 когорт. Признаки активации и созревания иммунных ответов были очевидны у всех пациентов с TICIMEL, кроме одного, на Н6. Это указывает на то, что TNFi вряд ли повлияет на усиление иммунитета, наблюдаемое у пациентов, получавших лечение ипи/ниво. Более того, исследователи показали на модели мышиной меланомы (B16Ova), где условия лечения имитируют условия TICIMEL и MELANFalpha (альфаPD-1+альфаCTLA-4+/- TNFi [анти-мышиный TNF, клон XT3.11]), что тритерапия увеличилась частота полной регрессии опухоли и общая выживаемость по сравнению с битерапией. У мышей, вылеченных тритерапией, развились антимеланомные реакции памяти, о чем свидетельствует повторный эксперимент. Понимание того, как блокада TNF увеличивает пробуждение антимеланомного иммунного ответа пациентов на ICI и как свойства TNFi могут по-разному модулировать эти ответы, имеет решающее значение для:

• (i) лучше понять клеточные и молекулярные пути, которые необходимо задействовать для преодоления некоторых механизмов, ответственных за устойчивость к ICI.
• (ii) определить новые и потенциально лучшие стратегии для продвижения этих ответов.
• (iii) определить пациентов, которые могли бы получить наибольшую пользу от таких методов лечения.

Гипотеза, основная цель(и) и конечная(ые) цель(и) проекта

Принимая во внимание недавно опубликованные и неопубликованные данные исследователей, исследователи предполагают, что блокада ФНО может повышать эффективность ИКИ у пациентов. Однако на этот эффект могут влиять структурные свойства используемого агента, блокирующего ФНО. Чтобы оценить эту гипотезу, исследователи будут сравнивать клинико-биологические реакции пациентов из клинических испытаний TICIMEL (ipi+nivo+certo или inflix) и MELANFalpha (ipi+nivo, без TNFi). Чтобы прояснить молекулярные механизмы, с помощью которых certo и inflix по-разному влияют на иммунный ответ, исследователи проведут эксперименты ex vivo и in vivo в системах совместного культивирования, а также на уникальной мышиной модели меланомы соответственно.

План проекта с описанием методологии и работ, которые необходимо выполнить. Для достижения основных и второстепенных целей предложение разделено на три основных РП.

WP1: расшифровать, как цертолизумаб и инфликсимаб влияют на ICI-зависимый системный иммунный ответ у пациентов с запущенной меланомой.

WP2: Анализ влияния TNFi на ICI-зависимый иммунный ответ против меланомы в опухолях у пациентов с прогрессирующей меланомой. Исследователи уже проводили иммуногистохимию (ИГХ) фиксированных формалином и залитых парафином (FFPE) биоптатов меланомы пациентов, включенных в первую часть TICIMEL, для оценки инфильтрирующих опухоль лейкоцитов до и во время терапии (CD3, CD8, CD4, FOXP3, CD68). ).

WP3: Анализ влияния TNFi на ICI-зависимый иммунный ответ против меланомы в экспериментах по совместному культивированию и у мышей.