보완 단백질을 사용하여 식물성 식품의 동화 작용 개선 (CompProtein)

1. 예비 테스트 준비: 참가자는 밤새 금식(~10시간 동안 칼로리가 있는 음식/음료 섭취 없음)하고 72시간 동안 운동을 자제한 후 예비 테스트 세션에 도착합니다. 대면 절차에 앞서 참가자는 동의서 검토를 통해 참여와 관련된 절차 및 위험에 대해 브리핑을 받게 됩니다. 참가자는 계속할 것인지 묻는 질문을 받기 전에 질문을 하고 질문에 대한 답변을 받도록 권장됩니다. 확인은 사전 동의 절차 양식에 서명을 통해 문서화됩니다.

   1.1 인체 측정: 동의가 제공되면 참가자의 키와 몸무게를 측정하여 체질량 지수(BMI)가 적격 한도(18.5 - 30kg/m^2) 내에 있는지 확인합니다. 참가자는 이미 다른 모든 포함 및 제외 기준에 대해 평가되었으므로 적격 BMI에 따라 연구에 포함되고 예비 테스트 세션이 계속됩니다. 연구 적격성을 확인한 후 훈련받은 연구팀 구성원이 혈압을 측정합니다. 그 후, 제조업체 권장사항에 따라 이중 에너지 X선 흡수계(DEXA)를 통해 신체 구성이 결정됩니다. 간략하게, 참가자들은 제지방량과 체지방량의 정확한 측정을 위해 숙련된 기술자가 위치를 정하기 전에 몸에서 모든 금속 물체를 제거하라는 요청을 받게 됩니다. 스캔은 참가자에게 움직이지 않도록 지시하는 동안 약 6-10분 동안 지속됩니다.

   1.2 안정시 대사율: 안정시 대사율(RMR)은 간접 열량측정법을 통해 평가됩니다. 이는 자동 가스 분석 시스템을 사용하여 RMR을 측정하는 비운동 테스트입니다. 이 장치는 흡기 가스 농도와 호기 가스 농도의 차이로 산소 소비량과 이산화탄소 생산량을 측정합니다. 테스트가 시작되기 전에 참가자는 테이블 위에 반듯하게 누워 투명하고 단단한 플라스틱 후드와 부드럽고 투명한 플라스틱 드레이프를 참가자의 목, 머리 및 어깨 위에 배치하여 호기된 가스를 포착합니다. 그러면 참가자는 호흡 가스 농도를 측정하는 동안 잠들지 않고 움직이지 않고 누워 있게 됩니다. RMR이 최소 20분(일반적으로 시작 후 ~30분) 동안 안정되면 테스트가 종료됩니다.

   1.3 최대 10회 반복(10RM) 테스트: 휴식 중 대사율 테스트 후 참가자는 다리 확장 및 다리 프레스에 대해 10RM 테스트를 받게 됩니다. 시작하려면 참가자는 최대 5분 동안 표준 사이클 에르고미터에서 자체 선택한 속도로 사이클링하게 됩니다. 그런 다음 참가자는 예상 10RM의 ~50%로 8~10회 반복하고 1~2분간 휴식을 취합니다. 그런 다음 부하는 예상 10RM의 ~90%로 설정됩니다. 부하가 2.5~5.0% 증가합니다. 실패할 때까지 각 성공적인 시도를 따릅니다(일반적으로 5번 시도 이내). 최대 시도 사이에는 2분의 휴식 시간이 할당되고 운동 사이에는 5분의 휴식 시간이 할당됩니다. 다리 확장을 먼저 테스트한 다음 다리 프레스를 테스트합니다. 실험실을 떠나기 전에 참가자는 세션을 마치기 전에 궁금한 사항을 질문할 수 있습니다.

   1.4 습관적인 다이어트 기록: 현재 다이어트 섭취량은 온라인 자동 자가 관리(ASA24) 다이어트 기록 시스템을 통해 평가됩니다. 참가자는 개인 및 비공개 사용자 이름과 비밀번호를 받게 됩니다. 연속 3일(주중 2일, 주말 1일)을 녹음하라는 요청을 받습니다. 온라인 시스템이므로 여유 시간에 오프사이트에서 완료할 수 있습니다.

   1.5 계획: 실험실을 떠나기 전에 참가자와 연구팀은 첫 번째 주입 시험 날짜를 확인합니다(예비 테스트 후 최소 7일). 또한, 연구팀은 참가자들에게 첫 번째 주입 전날 밤에 섭취할 표준화된 식사와 첫 번째 실험까지 72시간 및 24시간 동안 격렬한 운동과 음주를 자제하라는 지침을 제공할 예정입니다. 참가자에게는 실험실을 떠나기 전에 간식도 제공됩니다.

2. 주입 시험

2.1 준비: 예비 테스트 또는 이전 주입 후 최소 7일 동안 참가자는 주입 시험을 위해 실험실로 돌아가도록 요청받게 됩니다. 각 주입 당일 아침에 참가자는 밤새(~10시간 동안 칼로리가 없는 음식/음료 섭취 없음) 금식하고 각각 72시간 및 24시간 동안 격렬한 운동과 음주를 자제한 후 아침에 실험실에 도착합니다. 각 시험 전 3일 동안 참가자는 온라인 자동 자가 관리(24시간) 식이 기록 시스템(ASA24)을 통해 식이 섭취량을 기록해야 합니다.

2.2 안정 동위원소 주입: 실험실에 도착하면 참가자는 정맥 카테터를 등쪽 손이나 팔 정맥에 배치하기 전에 클리닉 스타일의 침대에 바로 누울 것입니다. 카테터를 설치하기 위해 4번 이상 시도하지 마십시오. 기준선 혈액 샘플링 후, 보정된 주입 펌프를 사용하여 지속적인 주입(0.05μmol/kg/min)을 시작하기 전에 L-[ring-13C6]페닐알라닌(2μmol/kg)의 프라이밍 용량을 투여합니다. 본 실험에 적용된 안정동위원소 아미노산 추적자는 방사성이 아니며 완전히 안전합니다. 이러한 안정 동위원소는 신체의 아미노산 풀을 풍부하게 하여 아미노산이 조직에 통합되는 속도를 확인할 수 있습니다. 정맥 투여를 위한 추적자의 준비는 우수제조관리기준(Good Manufacturing Practices) 지침에 따라 추적자 준비 전용 층류 후드 아래 멸균 환경에서 이루어집니다.

2.3 혈액 수집: 주입 개시 후, 반복적인 혈액 샘플링을 위해 두 번째 정맥 카테터를 반대편 손 또는 팔 정맥에 배치합니다. 혈액 샘플은 첫 번째 주입 동안 12회, 두 번째 주입 동안 10회 수집됩니다. 생검 시간(-150, -30 및 300분)과 일치하는 시점에 ~16mL가 수집됩니다(7mL 혈장, 7mL 혈청 및 ~2mL 폐기물). 다른 모든 시점(-210, -90, 0, 30, 60, 90, 120, 180 및 240분)에서는 ~9mL가 수집됩니다(7mL 혈장 및 ~2mL 폐기물). 따라서 첫 번째 주입과 두 번째 주입 동안 수집된 총 부피는 각각 ~129mL 및 ~104mL가 됩니다. 4방향 마개에 연결된 Leur-Lok 접근 장치를 사용하여 혈액을 진공 튜브에 수집합니다. 추첨 사이에 카테터는 낮은 속도(~60cc/hr)의 식염수 드립을 사용하여 특허를 유지합니다.

2.4 근육 수집: 총 5개의 근육 생검이 수집됩니다(1차 주입의 일부로 3개, 2차 주입 중 2개). 생검 절차에는 멸균된 속이 빈 바늘(Bergström 바늘)을 사용하여 근육 조직의 작은 조각을 제거하는 과정이 포함되며 Jared Willard 박사의 후원으로 Nicholas Burd 박사가 수행합니다. 참가자는 침대에 누워 휴식을 취하고 필요한 경우 생검 부위를 면도합니다. 그 후, 4% 클로르헥시딘 글루코네이트를 사용하여 해당 부위를 소독한 후 5mL의 국소 마취제(2% 자일로카인과 1:100,000 에피네프린)를 피하 주사하여 근육에 침투하지 않도록 특별한 주의를 기울입니다. 마취가 활성화되면(~10분) Burd 박사는 조직 수집을 위해 생검 바늘을 넣을 구멍을 만들기 위해 피부에 작은 절개(~4-5mm)를 만듭니다. Burd 박사는 신속하게 근육의 작은 조각(~50~100mg, 표준 연필 지우개 크기 정도)을 잘라내고 대상의 다리에서 바늘을 제거합니다. 샘플 수집(~30초) 동안 피험자는 다리에 깊은 압박감을 느낄 수 있습니다. 멸균 일회용 드레이프를 참가자의 허벅지 아래에 배치하고 모든 생검 절차에 멸균 장갑을 사용합니다.

생검이 완료되면 숙련된 연구팀 구성원이 출혈이 멈출 때까지(최소 10분) 멸균 거즈로 압력을 가합니다. 그 후, 절개 부위를 버터플라이 스티치(스테리 스트립)로 봉합한 후 붕대를 감습니다. 멍이 들 가능성을 최소화하기 위해 붕대 위에 탄력 있는 압력 랩을 씌울 것입니다. 그런 다음 참가자는 각각 96시간과 24시간 동안 나비 봉합과 압력 랩을 상처에 그대로 두도록 지시받습니다.

참가자에게는 실험실을 떠난 후 절개 부위를 적절하게 관리하기 위해 "생검 관리 키트"(섹션 10.1/생검 관리 키트에 설명됨)가 제공됩니다. 연구팀의 구성원은 임상시험 다음 날 참가자들에게 연락하여 치유 과정을 확인할 것입니다.

2.5 저항 운동 및 식사 섭취: 첫 번째 주입 실험에서 두 번째 생검이 종료된 직후와 두 번째 실험에서 첫 번째 생검이 종료된 후 참가자는 급성 저항 운동을 위해 워밍업을 시작합니다. 시작하려면 참가자는 표준 사이클 에르고미터에서 5분 동안 스스로 선택한 속도로 사이클링하게 됩니다. 그 후, 참가자들은 저항 운동을 시작합니다. 참가자는 예비 테스트에서 측정한 최대 10회 반복(10RM)의 ~60%로 워밍업 세트를 완료한 후 ~90% 10RM으로 10~12회 반복 4세트를 완료하고 양쪽 다리 확장과 세트 사이에 1~3분의 휴식을 취합니다. 다리 압박. 참가자는 두 번째 시험 동안 첫 번째 주입의 부하, 세트 및 반복을 일치시킵니다.

운동 완료 직후 참가자는 식사를 하기 위해 주입실로 돌아갑니다. 첫 번째 주입 동안 참가자는 시중에서 판매되는 쌀과 검은콩 246g(~610kcal, 단백질 ~20g, 탄수화물 ~127g) 또는 결정화된 아미노산과 말토덱스트린으로 구성된 등칼로리 및 등질소 음료를 섭취하도록 무작위로 배정됩니다. 두 번째 시험 기간 동안 참가자는 나머지 조건을 소비하도록 무작위로 배정됩니다.

시판되는 쌀과 검은콩은 수액시험 당일 섭취 직전에 별도로 조리하여 혼합한다. 식사는 식중독 예방을 위해 USDA의 최저 내부 온도에 따라 최소 160°F의 내부 온도로 조리됩니다.