Bartter 综合征中的甲状旁腺激素 (PTH) 稳态

甲状旁腺通过将血钙水平，特别是血离子钙浓度维持在一个非常窄的范围内，发挥着关键的生理功能。 他们通过调节甲状旁腺激素 (PTH) 进入循环的每分钟释放量来实现这一点。 这种变化几乎对尿液中的钙排泄和骨骼中的钙流出产生直接影响，如果持续数小时或数天，则会影响肾脏维生素 D 代谢，并最终影响肠道钙的吸收效率。 甲状旁腺主细胞检测血液离子钙水平的微小变化、相应地改变 PTH 释放并启动这些适应性反应的能力是由位于细胞表面的钙敏感受体 (CaSR) 介导的。

CaSR 在甲状旁腺组织中的重要性超出了其作为钙调节 PTH 分泌调节剂的传统作用，涉及甲状旁腺功能的其他关键成分，这些成分在以甲状旁腺功能亢进等甲状旁腺活动过度为特征的临床疾病中经常出现异常。 这些包括 PTH 基因转录和激素合成控制的紊乱以及由于组织增生引起的甲状旁腺肿大的发展。

PTH 主要作用于肾近端小管磷 (Pi) 重吸收以及破骨细胞钙和 Pi 重吸收。 CASR 也在肾单位粗升肢 (TAL) 中表达，它与管腔钾 ROMK 通道相互作用。 几种 TAL 通道和蛋白质（包括 ROMK、NKCC2、ClCKb、Barttin 和 CASR）的突变导致 Bartter 综合征 (BS)，这是一种血压正常的低血钾性肾小管病。 尽管已经描述了 CASR 突变对肾脏 ROMK 功能的影响，但尚不清楚 ROMK 突变是否对 CASR 功能或 PTH 调节产生任何影响。 我们在此描述了一组患有 II 型 BS（由于 ROMK 突变）且 PTH 稳态异常的儿童和青少年。

初步数据：

我们比较了 12 名 II 型 BS（4M，8F）儿童和 17 名 IV 型 BS 儿童（7M，10F）的实验室数据（Barttin 基因的 d/t 突变，TAL 中 ClCKb 基底外侧氯离子通道的 β 亚基） ), 在过去的 10 年里，我们的中心一直在关注。 总共分析了 II 型和 IV 型 BS 的 86 和 105 个血液和尿液分析数据集（平均数据集/点：7.3±4.1 和 6.9±2.9）。盐补充，而 BS-IV 儿童通常有轻度低钾血症。 所有儿童的估计 GFR 均保持正常。 没有低镁血症。 BS-II 中的平均 PTH 值显着更高（102±39 VS BS-IV 中的 46±24 pg/ml，p<0.001）并且在 93% 的病例中高于正常上限，而 BS-IV 中为 13%（p <0.001)。 25(OH) 维生素 D 的水平没有差异。 在 BS-II 中，血清总钙轻度下降（在正常范围内），血清 Pi 增加，无论是绝对值还是针对年龄标准化 (PiSDS)。 磷酸盐排泄阈值 (TpGFR) 在 BS-II 中略高。 组间高钙尿症的程度没有差异。 基于这些初步数据，我们得出结论，仅在 II 型 BS 中升高的 PTH 水平与 GFR 或维生素 D 水平降低或血清钙降低或高钙尿症无关。 Pi 水平升高与磷酸盐排泄减少有关，但与 PTH 水平无关。 现在应该研究 ROMK 中的突变可能通过与 CASR 的可能相互作用导致 PTH 分泌失调的可能性。

方法：

调查协议已提交给当地的人体实验委员会。 将从受影响的儿童（或年轻人）及其父母那里获得知情同意。

我们希望从每个 BS 亚组中招募 5 名患者。 此外，我们将招募5名正常志愿者作为额外的对照组。

如前所述，将在普通儿科病房为期 2 天的住院期间对受试者进行评估。 在研究的第一天，2 小时 I.V.将输注柠檬酸钠以逐渐将血液离子钙浓度降低至比输注前值至少低 0.2 mmol/L 的水平；柠檬酸钠的剂量范围通常为 28-118 mg/kg/h。 在柠檬酸钠输注前 30、15 和 0 分钟以及在输注柠檬酸钠期间每 10 分钟获取用于测量离子钙和 PTH 的血样。 第二天，将进行 2 小时 10% 葡萄糖酸钙的 IV 输注，以逐渐将血液离子钙浓度升高至比输注前值至少 0.2 mmol/L 的水平。 葡萄糖酸钙的剂量范围通常为 2-8 mg/kg/h。 用于测量离子钙和 PTH 的血样将如前所述用于输注柠檬酸钠获得。 每次输注开始前 30、15 和 0 分钟获得的测量值的平均值将用于确定每天研究的血离子钙和血清 PTH 的基础值。

在钙输注期间使用钙特异性电极（Radiometer ICA-II，哥本哈根，丹麦）监测血液中的钙离子水平；将在厌氧条件下收集血样，然后立即进行测量。 用于 PTH 测定的血清样品将在收集后立即通过离心分离，在固体 CO2 上快速冷冻，并储存在 -70 oC 直至测定。 停止钙输注后将监测离子钙水平，直到值恢复到基线水平。

将使用在柠檬酸钠和葡萄糖酸钙输注过程中获得的综合结果为每个研究对象确定描述血离子钙和血清 PTH 水平之间关系的 S 形曲线。 根据四参数模型，钙调节 PTH 释放的设定点代表血清 PTH 水平处于低钙血症期间达到的最大值和高钙血症期间达到的最小值之间的中间值的离子钙浓度，如先前报道的那样。

将单独分析葡萄糖酸钙输注期间获得的结果，以评估增加血液离子钙浓度对 PTH 释放的抑制作用。 为了改进数据的线性拟合，血清 PTH 水平（表示为输注前百分比值的自然对数 (ln)）将按照每 10 分钟的时间间隔针对相应的血液离子钙浓度作图，如前所述。

统计分析：

将使用最小二乘法进行线性回归分析，并使用 t 统计量比较斜率和 y 截距值。 y = A e-2kt + B 形式的单指数曲线拟合算法也将用于检查 I.V. 期间血离子钙和血清 PTH 水平之间的曲线关系。钙输液；这些结果将以具有 95% 置信区间的平均值表示。