血管衰老和动脉粥样硬化斑块脆弱性 (VICTORIA)

背景-按时间顺序衰老的过程显着导致脉管系统内的结构和功能变化，成为动脉粥样硬化疾病和急性血栓事件的主要危险因素[1,2]。 此外，与年龄相关的血管恶化可能受到生活方式选择、环境因素和外部刺激的影响，导致血管完整性和功能逐渐下降[3,4]。

为了确定治疗干预的潜在目标，以延缓或逆转血管老化的有害后果，更好地了解血管老化的细胞和分子机制以及更好地定义环境因素如何加速这一过程至关重要[3 -5]。

在过去的几十年里，DNA 损伤（端粒和非端粒损伤以及线粒体损伤）已成为血管老化和动脉粥样硬化发展的关键触发因素[4-11]。 大量证据支持实验模型和人类斑块样本 [12-17] 以及动脉粥样硬化个体的外周细胞中存在氧化 DNA 损伤、端粒磨损和线粒体 DNA 损伤 [9,18-21 ]。

此外，越来越明显的是，基因组不稳定性可以通过触发导致多种病理生理变化的信号通路来直接影响血管细胞功能。 这些变化包括炎症、细胞凋亡、自噬以及最终的细胞衰老，其标志是“衰老相关分泌表型”（SASP）的分泌。 [4-11]。 DNA 损伤和细胞衰老之间强有力的机制关联强调 DNA 损伤是衰老主要原因的主要候选者 [22]。 针对 DNA 损伤及其机制相关性可能为制定旨在减轻与年龄相关的功能障碍和疾病的统一干预措施提供逻辑基础 [22]。

然而，DNA损伤与血管细胞中SASP的确切机制，以及它在动脉粥样硬化和易损性动脉粥样硬化发病机制中的作用，仍然难以捉摸。

最近的证据强调了细胞衰老过程中端粒功能障碍和线粒体代谢异常之间的相互影响[23-26]，强调需要进一步阐明这种复杂而错综复杂的联系，这可以为年龄相关疾病开辟新的潜在治疗策略[27] 。

需要进一步的研究来了解线粒体功能障碍影响端粒长度的潜在机制，反之亦然，以及它们的相互作用如何促进血管老化过程[26]。

我们推测，端粒功能障碍、线粒体 DNA 损伤和非编码 RNA 失调之间存在复杂的分子机制，这些机制参与了血管衰老的过程，促进了动脉粥样硬化的发生和进展。 因此，遗传损伤和非编码RNA的外周衰老标志物可能有助于表征罪魁祸首血管中易损斑块的发展，并改善患者的预后。

目的 - 本提案的具体目标是：1）研究细胞衰老的外周标志物[端粒长度（LTL）和线粒体DNA（mtDNAcn）含量]与非编码RNA失调（lncRNA TERRA，MitomiR）之间的关联心绞痛的不同谱系（稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、NSTEMI 和 STEMI）2) 评估其与入组后 12 个月内主要不良心血管事件 (MACE) 的关联。

患有心源性休克、充血性心力衰竭、终末期肾病和冠状动脉搭桥术的患者将被排除。 对接受光学相干断层扫描 (OCT) 检查或罪魁祸首动脉血管内超声 (IVUS) 筛查的患者，将获得斑块形态的准确评估。

研究设计 - 前瞻性、单中心非随机观察研究。 样本和数据收集 - 在进行诊断或治疗性血管造影手术之前，将收集每位患者的外周血样本（约 10 mL），并用于提取 DNA 和/或 RNA。 将建立其他生物样本（全血、血浆、血清、凝块、PBMC）的生物库。 入组后约 12 个月，将通过例行医疗访视或电话访谈对所有参与研究的患者进行临床随访，以评估不良心血管事件（MACE - 死亡、心肌梗塞或随后需要血运重建）。

生物标志物测定 - 从血液白细胞提取 DNA 后测量 LTL 和 mtDNAcn，而从血液白细胞提取 RNA 后测量 lnc-RNA TERRA 和 mitomiR，并使用实时 PCR 技术进行分析。

样本量 - 为了检测组间平均 LTL 值差异的中等效应大小 (f = 0.25)，我们估计需要至少 232 名患者的样本量，α 水平为 0.05，功效为90%或更高。 考虑10%的退出率，入组患者总数至少应为260人。

统计分析 - 将使用柯尔莫哥洛夫-斯米尔诺夫检验来测试数据的正态分布。

连续变量将表示为平均值、标准差、中位数、第一和第三四分位数。 分类变量将表示为数字和百分比。

两组之间的比较将使用学生 t 检验（对于连续变量的独立样本）以及卡方检验或费舍尔精确检验（对于分类变量）进行。 将使用单向方差分析 (ANOVA) 来测试两组以上之间的比较，然后使用 Bonferroni 事后测试进行两组比较。 如果不满足数据分布的正态性假设，则将使用等效的非参数检验。 将计算皮尔逊或斯皮尔曼系数，以单变量方式研究变量之间的相关性。 将使用 Kaplan-Meier 模型构建无事件生存曲线，并通过不同组之间的对数秩检验进行测试。 单变量和多变量 Cox 比例风险模型将用于确定每个变量对 MACE 事件的预测值；数据将用 HR 及其 95% 置信区间表示。

参考

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