Mikrobiom u obsedantně-kompulzivní poruchy (MIO)

Pozadí:

Obsedantně-kompulzivní porucha (OCD) je vysoce vysilující porucha s celoživotní prevalencí přibližně 2 % a je rovnoměrně distribuována mezi muže a ženy. OCD obecně začíná v raném věku a obvykle se rozvine do chronického průběhu, pokud se neléčí. Mnoho pacientů s OCD dostává léčbu po letech zpoždění kvůli faktorům jak pacienta, tak zdravotní péče; proto OCD ovlivňuje dosažené vzdělání, schopnost pracovat a mezilidské vztahy. Kromě toho představuje značnou zátěž a stres pro rodinné pečovatele [1] a představuje jeden z deseti nejvíce invalidizujících stavů duševního zdraví na světě [2].

Role mikrobiální komunity ve zdraví a nemoci byla až donedávna opomíjeným tématem v lidském výzkumu, a to navzdory skutečnosti, že lidské mikroby tvoří asi 1–3 % naší tělesné hmoty [3]. Střevní mikroby hrají důležitou roli v metabolismu živin, produkci vitamínů a prevenci patogenů v kolonizaci našeho střeva [4]. V poslední době si mikrobiota ve střevě získává stále větší zájem kvůli rozsáhlému spojení mezi střevem a mozkem [5]. Obousměrná komunikace prostřednictvím nervové, hormonální a imunologické signalizace zahrnující centrální, autonomní a enterální nervový systém tvoří osu mikrobiom-střevo-mozek [6]. V psychiatrii byly dysbiózy popsány u mentální anorexie, velké deprese, autismu a dalších závažných psychiatrických poruch [9, 10].

Souvislost mezi vznikem OCD a infekcí je již dlouho známa. PANS/PANDAS jsou akutní formy OCD spojené s autoimunitními reakcemi z patogenů, jako je streptokoková infekce [11, 12]. Spojení mezi bakteriálním patogenem a imunologickou odpovědí, která generuje symptomy OCD, je dalším důkazem důležitosti osy mikrobiom-střevo-mozek u OCD. V poslední době se objevily četné hypotézy týkající se důležitosti střevního mikrobiomu a symptomů OCD [13, 14].

Cíl: Charakterizovat složení a diverzitu střevního mikrobiomu u jedinců s OCD ve srovnání se zdravými kontrolami.

• Předpokládáme, že pacienti s OCD budou vykazovat známky střevní dysbiózy (nerovnováhy) vyznačující se nižší mikrobiální diverzitou a specifickými rozdíly v taxonomii a obsahu genů ve srovnání se zdravými kontrolami. Primárním výsledkem je α-diverzita, která se vztahuje k počtu druhů (bohatost) na jednom místě, β-diverzita, která odkazuje na rozdíly v druhovém složení mezi účastníky, a taxonomické množství bakteriálních skupin (ve kmeni, třídě, řádu úrovně čeledí, rodů a druhů). Tato měření poskytují informace o individuálním mikrobiálním složení na každém místě a homogenitě ve skupině lidí.
• Předpokládáme, že snížená diverzita α a β ve střevním mikrobiomu koreluje se závažností obsedantně-kompulzivních symptomů měřených pomocí Yale-Brown Obsessive-Compulsive Scale (Y-BOCS) a Obsessive-Compulsive Inventory Revised (OCI-R). Předpokládáme, že větší závažnost symptomů je spojena s nižší diverzitou. Významná negativní korelace bude podpůrným důkazem pro osu mikrobiom-střevo-mozek.
• Předpokládáme, že po úspěšné psychoterapii (změna skóre Y-BOCS) bude výrazně bohatší diverzita α ve složení střevního mikrobiomu.

Metoda:

Nábor: Zdravé kontroly budou získány prostřednictvím inzerátu nebo zahrnuty z předchozích studií s jejich souhlasem. K účasti budou pozváni muži a ženy ve věku 18-45 let z OCD kliniky v Huddinge Hospital s DSM-5 diagnózou OCD a strachem z kontaminace. Budou přijati věkově odpovídající kontroly, které nemají žádnou osobní nebo rodinnou anamnézu OCD. Kritéria vyloučení pro všechny skupiny zahrnují anamnézu operace GI traktu (jiné než apendektomie nebo cholecystektomie); anamnéza zánětlivého onemocnění střev, syndromu dráždivého tračníku, celiakie nebo jakékoli jiné diagnózy, která by mohla vysvětlit chronické nebo opakující se střevní příznaky, užívání antibiotik v posledních 3 měsících; užívání probiotik v posledních 4 týdnech; těhotenství. Intelektuální postižení, porucha autistického spektra a psychóza.

Hodnocení: Všichni účastníci se setkají se zkušeným psychiatrem pro diagnostická hodnocení včetně M.I.N.I. rozhovor. Účastníci budou požádáni, aby vyplnili formuláře sebehodnocení na internetu a odpověděli na otázky týkající se jejich stravovacích návyků za poslední tři měsíce. Změří se hmotnost a výška pro výpočet indexu tělesné hmotnosti (BMI). Všechny posudkové formuláře, informace z pohovorů a lékařské prohlídky budou zdokumentovány v jejich zdravotní dokumentaci. Další informace (např. antibiotika a předchozí terapie) budou shromážděny z jejich zdravotní dokumentace se souhlasem účastníků.

Vyšetřovatelé zvolili následující dotazníkovou baterii k zachycení všech relevantních výstupních proměnných (symptomy OCD), výživy a charakteristik a frekvence stolice.

• Yale-Brown Obsessive Compulsive Scale (Y-BOCS): Běžně používaný klinický, polostrukturovaný rozhovor hodnotící závažnost symptomů OCD.
• Revidovaný obsedantně-kompulzivní inventář (OCI-R -): 18 položkový dotazník s vlastní zprávou, který odhaduje rozměry symptomů OCD. OCI-R poskytuje celkové skóre a 5 subškál: kontrola, hromadění, neutralizace, posedlost, řazení a mytí.
• EDE-Q pro zachycení stravovacího chování.
• Dotazník Q o jídle: Webový dotazník o frekvenci jídla, který je standardem ve Švédsku, potvrdí příjem energie a makroživin, který ovlivňuje mikrobiální složení.
• Bristol Stool Scale: Lékařská diagnostická škála určená ke klasifikaci forem lidských výkalů do sedmi kategorií.

Kromě toho budou vyšetřovatelé shromažďovat demografické informace o všech pacientech: věk, pohlaví, věk při nástupu, stav povolání, somatické zdraví a psychiatrické komorbidity.

Postup odběru vzorků stolice: Pacientům a kontrolám budou poskytnuty jasné instrukce pro domácí odběr vzorků stolice. Pacienti odeberou jeden vzorek stolice na začátku léčby a jeden na konci léčby. Kontroly odeberou pouze jeden vzorek v jednom časovém bodě. Účastníci budou sbírat stolici doma pomocí souprav OMNIgene, které budou zaslány do biobanky KI.

Exposure and Respons Prevention therapy (ERP): psychoterapie založená na důkazech podávaná zkušenými psychology, buď individuálně, ve skupinách, tváří v tvář nebo přes internet. Aby mohla být považována za léčbu ERP, je vyžadováno minimálně pět sezení prevence expozice a reakcí.

Uložení vzorků v biobance: Všechny vzorky budou uloženy v biobance Karolinska Institutets (KI). Aplikace pro ukládání vzorků do biobanky je založena v souladu s pravidly a předpisy.

Metagenomické sekvenování: Vyšetřovatelé použijí brokovnicové metagenomické sekvenační metody. Sekvenování celogenomové brokovnice může poskytnout funkční informace o tom, které geny jsou přítomny ve střevním mikrobiomu pacientů. Tato metoda může také poskytnout podrobnější taxonomické rozlišení než sekvenování 16S rRNA.

Metagenomické sekvenování brokovnice: bude připraveno a sekvenováno. Pro efektivní využití průtokových kyvet bude asi deset vzorků multiplexováno s duálními indexy na dráhu průtokové kyvety. Před následnou bioinformatickou analýzou budou nezpracovaná sekvenční data kvalitativně filtrována a upravena tak, aby byly odstraněny báze se skóre kvality Phred menším než 20. Získaná data budou zpracována konceptem metagenomových druhů. Sekvence jsou seskupeny do metagenomických druhů (MGS) na základě jejich sekvenční podobnosti.

Určení velikosti vzorku: dvě předchozí studie s menším nebo podobným počtem účastníků ukázaly, že tato studie bude dostatečně výkonná. Dále se jedná o pilotní studii založenou na nové technologii sekvenování.

Časová osa: Etická žádost byla schválena a byly odebrány všechny vzorky.