AMLにおけるM-FISH、FISHプローブパネル、および従来の細胞遺伝学的解析の診断率の比較

腫瘍性血液学は、個別化医療の最前線にあります。 世界保健機関 (WHO) の分類は、遺伝子データを顕微鏡、免疫表現型、および臨床所見に組み込み、血液腫瘍を臨床的および生物学的に異なるカテゴリに分類します。 このシステムは、診断、予後、および治療法の選択を導きます。これは、リンパ腫および白血病の新たな標的療法でますます重要になっています。 しかし、血液腫瘍の臨床検査は非常に複雑であり、一般に非常に費用がかかります。

多くの血液腫瘍の初期評価には、形態学的、組織学的、免疫表現型 (フローサイトメトリーおよび/または免疫組織化学)、および従来の細胞遺伝学的研究が含まれます。 細胞遺伝学的解析から得られたデータは、WHO 分類の特定の白血病 (例えば、再発性の細胞遺伝学的異常を伴う急性骨髄性白血病 (AML) および慢性骨髄性白血病 (CML)) の特徴である可能性があり、さらなる分類。

従来の細胞遺伝学的研究は、サイズが 10 Mb (メガ塩基対) を超える遺伝子変異を検出するためのゴールド スタンダードとして、50 年以上にわたって使用されてきました。 彼らは、血液腫瘍の臨床的および形態学的に決定的なサブセットに関連する特定の染色体異常を特定する道を開きました。

蛍光 in situ ハイブリダイゼーション (FISH) は、血液腫瘍の診断と予後に関連する重要な遺伝的事象を標的とする、信頼性が高く迅速な補完的検査となっています。 FISH は、中期細胞に加えて間期細胞を標的とすることにより、従来の細胞遺伝学的研究の問題に対処してきました。 特に異常が「不可解」である場合、つまり従来の細胞遺伝学的研究では明らかでない場合、FISH研究も診断評価の不可欠な要素である可能性があることが明らかになりました。

補完的な FISH 検査は異常の全体的な検出を増加させますが、その利点はすべてのタイプの血液腫瘍で均一ではありません。 これは、FISH プローブが特定の異常のみの検出に制限されており、FISH プローブの範囲を超える遺伝子変化が完全に見逃されるためです。

検査室では、FISH プローブ パネルを核型分析と組み合わせて、診断標本と治療に対する反応を監視するフォローアップの両方で使用するのが一般的です。 FISH は特定の異常を対象としており、結果は間期核で自動化された方法で評価できるため、従来の細胞遺伝学的研究よりも多くの細胞を調べることができます。 FISH は、従来の細胞遺伝学的研究と比較して、分析性が高く、特定の状況では臨床的感度が高くなります。 診断の補助や血液腫瘍の追跡サンプルのモニタリングにおける FISH プローブ パネルの使用は非常に重要です。

東部共同腫瘍学グループ (ECOG) は、従来の細胞遺伝学的研究と AML 患者の FISH を比較し、モノソミー 5/欠失 5q、モノソミー 7/欠失 7q、トリソミー 8、t(8;21)、t(9) を検出するプローブ パネルを発見しました。 ;22)、さまざまなパートナーとの MLL 再編成、t(15;17)、および inv(16)/t(16;16) は、98% から 100% の間で一致しました。 一方、He らの研究は、適切な核型分析研究の設定において、成人 AML における FISH 検査の価値が限られていることを示しています。

臨床遺伝子検査の分野で近年行われた多くの重要な技術的進歩にもかかわらず、従来の細胞遺伝学的研究とルーチンの FISH 研究は、血液腫瘍を評価するために利用できる重要な検査ツールであり続けています。 通常、これら 2 つの検査方法は互いに補完し合い、多くの場合、FISH は細胞遺伝学的結果を明確にし、より適切に定義するのに役立ちます。 したがって、例外のように見えるケースにもかかわらず、細胞遺伝学的およびFISHの結果が互いに確認されるはずであるという非常に強い期待があります. これら 2 つの検査方法で同じ検体に対して相反する結果が生じた場合、臨床検査室は、それが実験室のエラーによるものかそうでないかを単純に述べる以上に、経験的データに基づいた説明を提供するよう求められます。

マルチプレックス FISH (M-FISH) は、過去 10 年間の分子細胞遺伝学における最も重要な発展の 1 つです。 腫瘍および白血病の細胞遺伝学では、従来の細胞遺伝学的研究では検出できない不可解な染色体再構成を特定するために、M-FISH によって 2 つのグループが標的にされてきました。異常な核型 (異常の数が多いため、正確に核型を特定するのは困難です)。

張ら。スペクトル核型 (SKY) を使用して、G バンディングによって正常であると報告された AML 症例の核型を再評価しました。 これにより、t(11;19)(q23;p13) の 1 例、わずかではあるが認められた細胞遺伝学的異常、および別の例で 7 番染色体のモノソミーを含む小さなクローンが同定されました。 同様の研究で、Mohr 等。は、核型が正常な AML または MDS 患者における SKY を従来の核型分析と比較しました。 異常は認められませんでした。

エビデンスに基づく標準化されたアルゴリズム アプローチが欠如しているため、臨床検査の誤用や過剰利用が一般的であり、医療費の増加と患者ケアの複雑化をもたらしています。 価値と効率性がますます重視される現在のヘルスケア環境では、病理学者や臨床医にとって、非常に複雑で高価な技術を日常的な患者ケアに組み込むことが重要です。 従来の細胞遺伝学的研究はゲノムの包括的なビューを提供しますが、FISH プローブ パネルは潜在的または超顕微鏡的な遺伝子異常を検出し、非分裂細胞で再発する遺伝子異常を特定できます。 M-FISH は、従来の細胞遺伝学的研究では検出されない潜在的な染色体再編成を特定できます。 結果として、FISH は従来の細胞遺伝学的研究と比較して、すべての遺伝子異常を検出する感度を向上させることが一般的に推定されています。 この仮定は、その後、臨床医と病理学者が従来の細胞遺伝学的研究と血液腫瘍患者のFISH研究の両方を日常的に注文するように臨床現場に翻訳されました。 FISH プローブ パネルがどの程度包括的であるかによって、このテストの費用は非常に高くつく可能性があり、その付加価値は疑問のままです。