AML에서 M-FISH, FISH Probe 패널 및 기존 세포유전학적 분석의 진단 수율 비교

신생물성 혈액학은 맞춤 의학의 최전선에 있습니다. 세계보건기구(WHO) 분류는 현미경적, 면역 표현형 및 임상 소견과 함께 유전 데이터를 통합하고 혈액 종양을 임상적 및 생물학적으로 구별되는 범주로 분류합니다. 이 시스템은 진단, 예후 및 치료 선택을 안내하며, 이는 림프종 및 백혈병에 대한 새로운 표적 치료법으로 점점 더 중요해지고 있습니다. 그러나 혈액학적 신생물에 대한 실험실 검사는 매우 복잡하고 일반적으로 비용이 많이 듭니다.

많은 혈액학적 신생물의 초기 평가에는 형태학적, 조직학적, 면역표현형(유세포 분석 및/또는 면역조직화학) 및 기존의 세포유전학적 연구가 포함됩니다. 세포유전학적 분석에서 얻은 데이터는 WHO 분류의 특정 백혈병(예: 재발성 세포유전학적 이상을 동반한 급성 골수성 백혈병(AML) 및 만성 골수성 백혈병(CML))에 대해 병인학적일 수 있으며 특정 범주를 정의하는 데 더 큰 역할을 할 가능성이 있습니다. 추가 분류.

기존의 세포유전학 연구는 크기가 10Mb(메가 염기쌍)보다 큰 유전적 변이를 검출하기 위한 50년 이상 동안 황금 표준이었습니다. 그들은 혈액 신생물의 임상적 및 형태학적 결정적인 하위 집합과 관련된 특정 염색체 이상을 식별하는 길을 열었습니다.

FISH(Fluorescent in situ hybridization)는 혈액 종양의 진단 및 예후와 관련된 중요한 유전적 사건을 표적으로 삼는 신뢰할 수 있고 신속한 보완 테스트가 되었습니다. FISH는 중기 이외에 간기 세포를 표적으로 하여 기존 세포유전학 연구의 문제를 해결했습니다. FISH 연구는 또한 진단 평가의 필수 구성 요소가 될 수 있으며, 특히 이상이 "비정상"인 경우, 즉 기존의 세포 유전학 연구에서는 분명하지 않을 수 있습니다.

보완적인 FISH 테스트가 전반적인 수차 감지를 증가시키지만 그 이점은 모든 유형의 혈액 종양에 걸쳐 균일하지 않습니다. 이는 FISH 프로브가 특정 이상만을 감지하는 것으로 제한되기 때문에 FISH 프로브의 범위를 벗어나는 유전적 변이는 완전히 놓칠 수 있기 때문입니다.

검사실에서는 치료에 대한 반응을 모니터링하기 위해 진단 표본과 후속 조치 모두에서 핵형 분석과 함께 FISH 프로브 패널을 사용하는 것이 일반적입니다. FISH는 특정 이상을 목표로 하며 결과는 간기 핵에서 자동화된 방식으로 평가될 수 있으므로 기존의 세포유전학 연구보다 더 많은 세포를 검사할 수 있습니다. FISH는 기존의 세포유전학적 연구에 비해 더 높은 분석 및 특정 상황에서 임상적 민감도가 더 높습니다. 진단을 보조하거나 혈액학적 신생물의 후속 샘플을 모니터링하는 데 FISH 프로브 패널을 사용하는 것이 중요합니다.

Eastern Collaborative Oncology Group(ECOG)은 AML 환자에 대한 기존의 세포유전학 연구와 FISH를 비교한 결과 단염색체 5/결실 5q, 단염색체 7/결실 7q, 삼염색체 8, t(8;21), t(9 ;22), 다양한 파트너와의 MLL 재배열, t(15;17) 및 inv(16)/t(16;16)은 98%에서 100% 사이의 일치성을 가졌습니다. 한편, He et al 연구는 적절한 핵형 분석 연구 환경에서 성인 AML에서 FISH 테스트의 제한된 가치를 보여줍니다.

임상 유전자 검사 분야에서 최근 몇 년 동안 이루어진 많은 중요한 기술 발전에도 불구하고 기존의 세포 유전학 연구와 일상적인 FISH 연구는 혈액 종양을 평가하는 데 사용할 수 있는 중요한 실험실 검사 도구로 남아 있습니다. 일반적으로 이 두 가지 검사 방법은 서로를 보완하며 종종 FISH는 세포유전학적 결과를 명확히 하고 더 잘 정의하는 역할을 합니다. 따라서 예외적으로 나타나는 경우에도 불구하고 세포유전학 및 FISH 결과가 서로를 확인해야 한다는 매우 강한 기대가 있습니다. 동일한 검체에서 이 두 가지 검사 방법에 의해 상충되는 결과가 발생하면 임상 검사실은 단순히 검사실 오류 때문인지 아닌지를 진술하는 것 이상으로 경험적 데이터를 기반으로 설명을 제공해야 합니다.

다중 FISH(M-FISH)는 지난 10년 동안 분자 세포 유전학에서 가장 중요한 발전 중 하나를 나타냅니다. 종양 및 백혈병 세포유전학에서 M-FISH는 기존의 세포유전학 연구로는 탐지할 수 없는 숨겨진 염색체 재배열을 식별하기 위해 두 그룹을 표적으로 삼았습니다. 비정상적인 핵형(순수한 수차로 인해 정확한 핵형 분석이 어려움).

장 외. G-밴딩에 의해 정상으로 보고된 AML 사례의 핵형을 재평가하기 위해 스펙트럼 핵형(SKY)을 사용했습니다. 그 결과 t(11;19)(q23;p13), 미묘하지만 인식된 세포유전학적 이상 및 다른 경우에서 염색체 7에 대한 단일염색체를 포함하는 작은 클론이 확인되었습니다. 유사한 연구에서 Mohr et al. 정상 핵형을 가진 AML 또는 MDS 환자에서 SKY를 기존 핵형 분석과 비교했습니다. 이상이 확인되지 않았습니다.

증거 기반의 표준화된 알고리즘 접근 방식이 없기 때문에 실험실 테스트의 오용 및 과잉 활용이 일반적이며 의료 비용이 증가하고 환자 치료가 복잡해집니다. 점점 더 가치와 효율성에 중점을 두는 현재의 의료 환경에서 병리학자와 임상의는 복잡하고 값비싼 기술을 일상적인 환자 치료에 통합하는 것이 중요합니다. 기존의 세포유전학 연구는 게놈에 대한 포괄적인 시야를 제공하는 반면, FISH 프로브 패널은 숨겨진 또는 현미경 이하의 유전적 이상을 감지하고 비분할 세포에서 재발하는 유전적 이상을 식별할 수 있습니다. M-FISH는 기존의 세포유전학적 연구로는 발견되지 않는 숨겨진 염색체 재배열을 식별할 수 있습니다. 결과적으로 FISH는 기존의 세포유전학 연구에 비해 모든 유전적 이상을 탐지하는 민감도를 향상시킬 것이라고 일반적으로 추정됩니다. 이 가정은 임상 실습에서 임상의와 병리학자가 혈액 신생물 환자에서 통상적인 세포유전학적 연구와 FISH 연구를 일상적으로 지시하도록 하는 것으로 해석되었습니다. FISH 프로브 패널이 얼마나 포괄적인지에 따라 이 테스트 비용이 상당히 비쌀 수 있으며 부가 가치는 여전히 의문입니다.