M-FISH、FISH 探针组和常规细胞遗传学分析在 AML 中诊断率的比较

肿瘤血液学处于个性化医疗的前沿。 世界卫生组织 (WHO) 分类将遗传数据与显微、免疫表型和临床发现相结合，并将血液肿瘤分为临床和生物学上不同的类别。 该系统指导诊断、预后和治疗选择，这对于新兴的淋巴瘤和白血病靶向治疗变得越来越重要。 然而，血液肿瘤的实验室检测非常复杂，而且通常非常昂贵。

许多血液肿瘤的初步评估包括形态学、组织学、免疫表型（流式细胞术和/或免疫组织化学）和常规细胞遗传学研究。 从细胞遗传学分析中获得的数据对于 WHO 分类中的特定白血病（例如，具有复发性细胞遗传学异常的急性髓性白血病 (AML) 和慢性粒细胞性白血病 (CML)）可能具有特异性，并且可能在定义特定类别方面发挥更大作用进一步分类。

五年多来，传统的细胞遗传学研究一直是检测大小超过 10 Mb（兆碱基对）的遗传改变的黄金标准。 他们为识别与临床和形态学确定的血液肿瘤亚群相关的特定染色体畸变铺平了道路。

荧光原位杂交 (FISH) 已成为针对与血液肿瘤诊断和预后相关的关键遗传事件的可靠且快速的补充测试。 FISH 通过靶向间期细胞和中期细胞解决了传统细胞遗传学研究的问题。 很明显，FISH 研究也可能是诊断评估的一个组成部分，特别是在异常“隐蔽”的情况下，即常规细胞遗传学研究不明显的情况。

尽管补充性 FISH 检测提高了畸变的整体检出率，但它对所有类型的血液肿瘤的益处并不一致。 这是因为 FISH 探针仅限于检测特定异常，超出 FISH 探针范围的基因改变将因此被完全遗漏。

实验室的常见做法是在诊断标本和随访期间将 FISH 探针板与核型分析结合使用，以监测对治疗的反应。 FISH 以特定异常为目标，并且可以在间期细胞核上以自动化方式评估结果，从而允许检查比传统细胞遗传学研究更多的细胞。 与传统的细胞遗传学研究相比，FISH 具有更高的分析敏感性，在某些情况下还具有更高的临床敏感性。 使用 FISH 探针板帮助诊断或监测血液肿瘤的后续样本至关重要。

Eastern Collaborative Oncology Group (ECOG) 比较了 AML 患者的常规细胞遗传学研究和 FISH，发现用于检测单体 5/缺失 5q、单体 7/缺失 7q、三体 8、t(8;21)、t(9) 的探针组;22)，与不同合作伙伴的 MLL 重排 t(15;17) 和 inv(16)/t(16;16) 的一致性在 98% 和 100% 之间。 另一方面，He 等人的研究表明，在充分的核型分析研究的背景下，FISH 检测在成人 AML 中的价值有限。

尽管近年来在临床基因检测领域取得了许多重大技术进步，但传统的细胞遗传学研究和常规 FISH 研究仍然是可用于评估血液肿瘤的重要实验室检测工具。 通常这两种检测方法相互补充，通常 FISH 用于澄清和更好地定义细胞遗传学结果。 因此，人们强烈期望细胞遗传学和 FISH 结果应该相互证实，尽管有些情况似乎是例外。 当这两种测试方法在同一标本上出现相互矛盾的结果时，临床实验室面临着根据经验数据提供解释的挑战，而不仅仅是简单地说明这是或不是由于实验室错误造成的。

多重 FISH (M-FISH) 代表了过去十年中分子细胞遗传学最重要的发展之一。 在肿瘤和白血病细胞遗传学中，M-FISH 已将两个群体作为目标，以鉴定常规细胞遗传学研究无法检测到的隐蔽染色体重排：核型明显正常（怀疑含有常规细胞遗传学无法检测到的小重排）和复杂染色体重排的群体异常核型（由于畸变数量众多，很难准确核型）。

张等。使用光谱核型 (SKY) 重新评估 G 显带报告为正常的 AML 病例的核型。 这导致鉴定出一例 t(11;19)(q23;p13)，这是一种细微但公认的细胞遗传学异常，在另一例中鉴定出含有 7 号染色体单体的次要克隆。 在一项类似的研究中，Mohr 等人。将 SKY 与核型正常的 AML 或 MDS 患者的常规核型分析进行了比较。 没有发现异常。

由于缺乏基于证据的标准化算法方法，实验室测试的滥用和过度使用很常见，并导致医疗保健成本增加和患者护理的复杂性。 在越来越注重价值和效率的当前医疗保健环境中，病理学家和临床医生将高度复杂和昂贵的技术纳入常规患者护理中至关重要。 虽然传统的细胞遗传学研究提供了基因组的全面视图，但 FISH 探针板可以检测隐蔽或亚显微遗传异常，并识别非分裂细胞中反复出现的遗传异常。 M-FISH 可以识别传统细胞遗传学研究无法检测到的隐蔽染色体重排。 因此，通常推断与传统的细胞遗传学研究相比，FISH 将提高检测所有遗传异常的灵敏度。 这一假设随后在临床实践中被转化为让临床医生和病理学家定期对血液肿瘤患者进行常规细胞遗传学研究和 FISH 研究。 根据 FISH 探针面板的综合程度，此测试的成本可能非常昂贵，其附加值仍然值得怀疑。