健康な人間の男性におけるオレンジジュース摂取後のグルコースおよびインスリン反応に対するフルーツマトリックスの影響 (ZULEMA)

プロジェクト提案: ヒトにおけるオレンジジュースからのグルコースの吸収におけるフルーツマトリックスの役割 (ZULEMA)

背景の仮定: 遊離糖の過剰摂取は健康に悪影響を与える可能性があり、食後の血糖コントロールが不十分な場合は、長期的な 2 型糖尿病リスクのマーカーとなる可能性があります。 砂糖は飲料の血糖指数 (GI) を左右しますが、予想に反して、フルーツジュースと砂糖入り飲料では、総糖分が同じであることが多いにもかかわらず、異なる GI 結果が得られます。 これは、天然糖と添加糖が血糖コントロールに異なる影響を及ぼしている可能性があること、またはジュースマトリックス内の糖の組み合わせが血糖コントロールに対する糖の影響を何らかの形で改善していることを意味します。

研究の質問: フルーツジュースや飲み物の総糖ではなくマトリックスと糖源を変えると、GI にどのような影響がありますか? 研究者らは遊離糖が胃腸炎の原因になると想定しているが、そうではない可能性もある。

仮説: ジュースや飲料に含まれる遊離糖類 (スクロース、グルコース、フルクトース) が同量の場合、フルーツ ジュースのマトリックス (すなわち、 繊維、複合炭水化物、クエン酸、ポリフェノール、その他の植物化学物質、ミネラル、ビタミンなど）は、グルコースの吸収を調節する効果があります。

目的: この研究の主な目的は、健康な被験者の食後血糖反応に対する、操作されたジュース飲料 (フルーツ マトリックスの割合を減らすため) に対する 100% オレンジ ジュース中のジュース マトリックスの存在の影響を評価することです。 第 2 の目的は、インスリン反応への影響を特徴付けることです。

実験計画: グルコース応答は、グルコース単独の応答 (血糖指数、GI) とも比較されます。

方法:

ジュースの準備と物流。 オレンジ色のドリンクは、AMC Natural Drinks (スペイン、ムルシア) によって製造および供給されます。 果汁 100% のジュース (オレンジ ジュース) を、果汁 50% および 0% を含む飲料と比較します。ただし、総糖の質的および量的組成 (スクロース、フルクトース、グルコース) は 100% ジュースと同じです。

化学分析:

研究者らは、糖の組成と主な果物の基質成分を特徴づけます。

可溶性および不溶性繊維の化学分析。

糖質分析。 ジュースは製造され、糖成分（スクロース、グルコース、フルクトース）が測定および調整され、保存期間中に糖分が変化しないことが確認されます。 分析は、適切な屈折率 (RI) 検出器を使用した高速液体クロマトグラフィー (HPLC) によって実行されます。

植物化学分析。 オレンジジュースに特徴的な個々のフェノール類およびその他の植物化学物質。 フラバノン、ポリメトキシフラボン、ヒドロキシ桂皮酸誘導体、フラボン、カロテノイドは、紫外ダイオード アレイ (UV-DAD) 検出器および質量分析 (MS) 検出器を備えた逆相 HPLC を使用して分析されます。

臨床試験:

この研究は、クロスオーバー、ランダム化、二重盲検、用量反応介入試験です。 すべての参加者は、（重複した結果を得るために）別々の時間に研究を繰り返します。 この研究プロトコールは、カトリック大学倫理委員会によってすでに承認されています。

参加者、包含基準および除外基準:

研究者らは、オンライン広告、ソーシャルメディア、口コミなどを通じて、18歳から45歳までの健康な成人男性を募集する。 月経周期が血糖コントロールに影響を与える可能性があるため、女性は対象外です。 対象基準を満たすために、参加者はBody a Mass Index（BMI）が18.5～29.9kg/m2であること、朝食を習慣的に摂取していること、そして研究飲料を喜んで摂取することが求められる。 ダイエット中、食物アレルギー、または研究の飲み物を嫌う場合、参加者は除外されます。 さらに、過去 6 か月以内に体重の大幅な変動があった場合、または以前に糖尿病、前糖尿病、胃腸疾患、肝疾患、腎疾患、代謝障害と診断されたことがある参加者は除外されます。

サンプルサイズ:

研究者らは、健康な成人サンプル集団で介入（さまざまなテストオレンジ飲料）の効果をテストするランダム化クロスオーバー研究のサンプルサイズを推定した。 この目的のために、研究者らは、両側統計検出力が 90% (1-β=0.90) であると仮定して、無料で利用可能なソフトウェア G*Power 3.1.9.7 を使用しました。 統計的有意水準は 5% (α=0.05)、効果量は d=0.7 です。 これによると、研究への最小参加者数は N=24 である必要があります。 これらの参加者は、第 2 ラウンドのテストにも参加する必要があります (結果が重複します)。 参加者の最終的な数は、辞退の可能性を考慮して 30 名まで増加しました。

研究の同意:

電話によるスクリーニング面接により、最初の適格基準が示されます。 電話によるスクリーニングに合格した参加者は、研究プロトコールを確認し、書面によるインフォームドコンセントを得るために、研究室での対面説明会および最終スクリーニングセッションに参加する予定です。 研究者は人体計測的測定を行い、研究全体を通して参加者に介入と手順を説明します。 参加者はまた、食事とライフスタイルに関する一連の一般的な検証済みアンケートにも回答します。

介入設計:

資格のある参加者は、少なくとも 2 ～ 3 日の間隔をあけて 4 つのテスト セッション (+ 2 回の繰り返し) を完了します。 参加者は別の朝、10～12時間の絶食後、午前8時に研究室に到着します。ただし、少量の水分摂取は到着1時間前までに許可されます。 各テストセッションの前日に、参加者は食事日記を記入し、ポリフェノールフリーおよびクエン酸フルーツフリーの食事、絶食プロトコルの順守を確認し、摂取した栄養素（主に総炭水化物、遊離糖）の量を推定します。 、食物繊維、水）。

参加者は、3 つの飲み物のうち 1 つを素早く (5 分以内に) 飲みます: (1) 100% オレンジ ジュース、(2) 50% オレンジ ジュースと 50% 水を含むオレンジ飲料。100% ジュースの内容に合わせて砂糖を加えます。 、（3）100％ジュースの内容量に合わせて砂糖を加えた100％水。 標準的な分量（約 250 mL）は、遊離糖類の摂取量 25 g に達するために利用できる炭水化物の総量に基づいて計算されます。 さらに、参加者は、GI を推定するためにブドウ糖溶液 (25 g) も摂取します。 すべてのテストドリンクは、蓋付きの不透明な容器に入れて冷やして提供されます。 血糖反応は、ベースライン (0 分)、および飲料摂取後 15、30、45、60、90、および 120 分後に指を刺すことによって測定されます。

研究終了後、参加者は 2 ～ 3 週間の休息を取り、2 回目のテストセッションのために研究室に戻ります。 この繰り返しの目的は、結果をより堅牢に分析し、個人内および個人間の変動を評価することです。

食後の血糖反応:

研究者らは、使い捨て自動無効化ランセット (Softclix ランセット、Roche) を介して指先から毛細管血糖サンプルを収集し、グルコメーター (Accu-Check Guide Me、Roche) を使用して血糖値を直ちに測定します。

インスリン測定:

追加の血液サンプルが静脈から収集されます。 遠心分離 (1200 ～ 1500 ×g、10 分間、4 ℃) 後、血清サンプルは急速凍結され、インスリンレベルの分析まで -80 ℃で保存されます。 インスリンは、ELISA 試験システム (Accu Bind ELISA Microwells、Monobind Inc.、カリフォルニア州、米国) を使用して測定されます。

統計分析:

統計分析は SAS バージョン 9.4 を使用して実行されます。 PROC MIXED 手順を使用した反復測定二因子分散分析 (ANOVA) を使用して、血糖値に対する介入 (つまり、テスト飲料) の効果を決定します。 血糖増分曲線下面積 (iAUC) に対する治療の効果を判定するには、一因子反復測定 ANOVA が使用されます。 p 値 < 0.05 は、統計的に有意であるとみなされます。