저항 운동 후 근육 회복에 대한 PEA의 효과

연구 설계 프로토콜은 비엘리트 남성 운동선수(훈련 부하 >5h/wk, n=14)가 등록된 이중 맹검, 위약 대조, 교차 시험 설계를 수반합니다. 참가자는 무작위 순서로 PEA 또는 위약을 받는 2개의 실험 세션을 거칩니다. 두 세션은 괴상한 운동 시합에서 완전히 회복할 수 있도록 3주간의 휴약 기간으로 구분됩니다. 개체 내 디자인을 사용하는 과학적 근거는 개체 간 디자인에 비해 데이터 가변성이 감소하고 통계적 검정력이 증가한다는 가정을 기반으로 합니다. 또한 이중 맹검 위약 대조 시험을 사용하여 치료 편향과 위약 효과를 방지합니다.

참가자는 총 6일 동안 하루에 두 번 PEA 또는 외모와 일치하는 위약 보충제를 받도록 무작위로 배정됩니다. 보충 시작 3일 전(D-3), 참가자가 금식 및 휴식 상태로 실험실에 보고하고 시각적 아날로그 척도(VAS)에서 인지된 근육 통증을 표시하는 동안 기준 측정이 수집됩니다. 다음으로, 혈액 샘플과 근육 생검을 수집한 후 최대 등척성, 편심 및 동심 수의 수축 및 점프 높이(카운터 무브먼트 점프 및 스쿼트 점프)를 평가합니다. 또한 참가자는 지난 달 수면의 질과 양을 평가하기 위해 피츠버그 수면 질 지수(PSQI)를 완료합니다. 기준선 측정(D0)을 수집한 지 3일 후 참가자는 휴식과 금식 상태로 실험실로 돌아갑니다. 공복 상태에서 혈액 샘플을 채취한 후 가벼운 표준 아침 식사(~500kcal, 60% 탄수화물, 20% 단백질, 20% 지방)와 함께 첫 번째 보충제를 받습니다. 그 후, 그들은 인지된 근육통을 평가하고 St. Mary's Hospital 설문지를 작성합니다(전날 밤의 수면의 질과 양을 평가하기 위해). 보충제 섭취 1시간 후, 참가자는 무릎 신근의 편심 수축 10회의 24세트로 구성된 편측 편심 운동(EE) 시합을 수행합니다. 최대 자발적 수축 및 점프 높이의 측정은 EE 다음 24, 48, 72 및 120시간에 반복됩니다. 또한 혈액 샘플은 EE 후 24, 48, 72, 96 및 120h에 수집되고 근육 생검은 EE 후 48h에 수집됩니다. 또한 참가자는 실험 프로토콜의 전체 기간 동안 인지된 근육통을 평가하고 음식 일기를 작성하며 St. Mary's Hospital 설문지(매일)를 작성합니다.

스크리닝 지원자는 포함 및 제외 기준에 따라 연구 참여 자격을 평가하기 위해 스크리닝됩니다. 검진 시 체중은 0.1kg의 정확도로 디지털 저울을 사용하여 측정하고 신장은 1cm의 정확도로 측정합니다. 또한 참가자의 일반 건강을 평가하기 위해 의료 설문지를 얻습니다. 지원자가 선별 결과와 포함 및 제외 기준에 따라 자격이 있다고 판단되면 연구에 포함됩니다.

친숙화 개입 시도 중 학습 효과를 방지하기 위해 모든 참가자는 시도 시작 최소 1주일 전에 테스트 장비에 익숙해집니다. 참가자는 아래에 자세히 설명된 대로 3개의 준최대 아이소메트릭, 편심 및 동심 수의 수축과 3개의 카운터 이동 점프 및 스쿼트 점프를 수행하도록 초대됩니다(12페이지의 단락 76.3 참조). 참가자는 동작의 적절한 기술에 대해 교육을 받고 항상 직원의 감독을 받습니다. 익숙해지는 동안 isokinetic 동력계의 개별 설정이 결정되고 모든 후속 측정에 사용됩니다. 또한 참가자들은 음식 일기를 작성하는 방법에 대해 교육을 받습니다.

무작위화: 참가자는 첫 번째 세션 동안 보충 그룹(PEA 또는 위약) 중 하나에 무작위로 할당됩니다. 3주의 워시 아웃 기간 후 참가자는 다른 보충 그룹으로 넘어갑니다. 무작위화는 실험 절차에 관여하지 않는 실험실 내의 연구원이 수행합니다. 따라서 참가자와 측정을 수행하는 연구원은 참가자가 다른 보충제를 받는 순서를 알지 못합니다. 무작위 순서는 온라인 도구(RANDOM.ORG - Integer Set Generator)를 사용하여 현재 연구에 참여하지 않은 연구 그룹의 구성원이 생성합니다. 신원 은폐 코드는 현재 연구에 참여하지 않는 연구 그룹의 동일한 구성원이 안전하게 보관하는 무작위 목록에 사용됩니다.

맹검: 편견을 피하기 위해 다음과 같이 조사자/시험 직원/참가자에게 치료 부문을 맹검합니다. 위약과 구분할 수 있습니다. 보충 자료는 실험 절차나 분석에 관여하지 않는 연구 그룹의 구성원이 참가자에게 전달합니다. 또한 맹인을 유지하기 위해 보충제와 위약은 동일한 투여 경로와 과정을 따릅니다.

눈가림 해제: 모든 참가자가 평가판을 완료하고 모든 습식 실험실 분석이 완료되면 데이터베이스가 잠기고 수집된 평가판 데이터의 눈가림이 해제되어 평가판 데이터의 통계 분석이 가능합니다. PI는 데이터 분석을 완료한 후 지정된 연구원에게 모든 참가자에 대한 비맹검 치료 정보를 제공합니다.

맹검 시험에서 긴급한 경우 조사자는 참가자의 치료 할당에 대한 조기 맹검 해제가 필요한지 여부를 결정할 전적인 책임이 있습니다. 이러한 결정을 내릴 때 항상 참가자의 안전을 가장 먼저 고려해야 합니다. 적용 가능한 경우 눈가림 해제 날짜와 이유를 기록해야 합니다.

근육 손상 편심 운동(EE) 프로토콜 참가자는 사이클 에르고미터에서 100W로 5분간 워밍업을 수행합니다. 그 후 상체를 의자에 묶어 몸통을 안정시키고 오른쪽 다리를 레버 암에 묶는 등속 동력계에서 진행됩니다. EE 프로토콜은 -30⁰/s의 각속도와 180⁰에서 60⁰(여기서 180⁰은 완전 확장을 나타냄)의 동작 범위에서 무릎 신근의 10개의 등속성 일측성 편심 수축의 24세트로 구성됩니다. 세트 사이에는 60초의 휴식이 주어집니다. 참가자는 움직임의 편심 단계에서 레버 암의 하향 회전에 최대한 저항하도록 구두로 권장됩니다. 운동의 동심 단계 동안에는 저항이 적용되지 않습니다. 이 편심 운동 프로토콜은 이전 연구에서 표시된 대로 근육 손상을 효과적으로 유도하는 것으로 나타났습니다.

보충제 참가자는 무작위 순서로 두 차례에 걸쳐 PEA 및 위약 보충제를 받습니다. PEA 보충제에는 350mg의 Levagen+(PEA 315mg 및 부형제 35mg)가 포함되어 있고 위약 보충제에는 350mg의 말토덱스트린이 포함되어 있습니다. Levagen+는 90%의 팔미토일에탄올아미드와 10%의 코코넛 오일(분획), 폴리글리세롤 폴리리시놀리에이트, 시트러스 오일, 올리브 오일, 레시틴, dl-알파 토코페릴 아세테이트 및 이산화규소의 혼합물로 구성되어 PEA의 생체 이용률을 향상시킵니다. PEA와 플라시보 보조제 모두 모양이나 맛에 차이가 없도록 하기 위해 투명하지 않은 하드 캡슐에 포장되어 있습니다. 참가자는 기본 측정값 수집 후 시작하여 연속 6일 동안 하루에 두 번(아침 및 취침 전 1시간) 보충제를 섭취하도록 지시받습니다.

신체 활동 및 식이 조절 참가자는 습관적인 활동 패턴(예: 자전거로 수업). 그러나 그들은 실험 세션이 시작되기 72시간 전과 중등도에서 격렬한 운동을 수행하지 않도록 지시받습니다. 또한, 근육 생검을 수집하기 24시간 전에는 어떤 종류의 운동도 허용되지 않습니다.

참가자는 EE 전 저녁과 근육 생검 수집 전 저녁에 표준화된 식사(1200kcal, 180g CHO, 33g 지방, 45g 단백질)를 받습니다. 검사가 있는 날에는 공복 상태로 검사실에 입실해야 하는 경우 모든 측정이 완료된 후 아침 식사(500kcal)를 제공합니다. EE 시작 1시간 전에는 동일한 조식이 제공됩니다. 또한 참가자는 기준선 측정 후 시작하여 매일 음식 일기를 작성하여 조건 사이에 가능한 식이 변화를 확인합니다. 식이 분석은 식이 기록 및 다량 영양소 및 미량 영양소 구성 분석을 위한 웹 플랫폼을 사용하여 수행됩니다(https://mijn.voedingscentrum.nl/nl/eetmeter/). 참가자는 실험 세션 동안 알코올 또는 카페인 음료를 섭취할 수 없습니다.

혈액 샘플 혈액(2x10 mL)은 팔 정맥(Venoject 시스템)에서 샘플링되고 혈장 또는 혈청은 즉시 원심분리로 분리됩니다. 혈장 및 혈청 샘플은 나중에 생화학적 분석에 사용할 때까지 서로 다른 1mL 분취량으로 분배되고 -20°C에서 보관됩니다. 혈액 샘플은 금식 상태에서 기준선, EE 직전 및 EE 후 24, 48, 72, 96 및 120시간에 수집됩니다.

혈장 샘플은 CK(근육 손상에 대한 마커), IL-6 및 TNF알파(전신 염증의 두 마커)에 대해 적절한 특정 효소 결합 면역흡착 검정(ELISA)에 의해 분석됩니다. PEA 농도는 고성능 액체 크로마토그래피와 탠덤 질량 분석기로 평가됩니다. 1차 분석을 수행한 후 관련성이 있다고 판단되는 경우 혈액 샘플에 대한 추가 분석을 수행할 수 있습니다. 모든 분석이 수행된 후 잔류 샘플은 영구적으로 폐기되기 전에 추가 3년 동안 보관됩니다.

근육 생검 근육 생검은 금식 상태의 우세한 다리로부터 기준선 및 EE 후 48시간에 수집됩니다. 따라서, 대상자당 총 4개의 생검이 연구 전반에 걸쳐 취해진다. 생검은 숙련된 의사(Dr. Ruud Van Thienen)에서 m. 앞에서 설명한 대로 5mm 직경의 Bergström 바늘을 사용하여 훈련된 다리의 외측광근(29). 요컨대, 국소 마취(리도카인, 1ml) 하에 피부와 근막을 통해 작은 절개(~5mm)를 만들어 바늘이 근육 속으로 원활하게 침투할 수 있도록 합니다. 바늘을 근육 속으로 삽입하면 튜브와 주사기가 바늘의 상지에 부착되어 근육이 바늘 안으로 빨려 들어가는 진공을 만드는 데 사용됩니다. 이 시점에서 바늘 안쪽 부분을 부드럽게 비틀어 아래쪽으로 움직여 조직을 절단하여 근육 샘플을 얻습니다. 조직(~150-300mg의 근육)을 절단한 후 샘플은 액체 질소에서 동결되기 전에 육안 혈액 및 결합 조직에서 제거됩니다. 피부를 통해 절개한 부분은 접착 스트립(스테리스트립)을 사용하여 봉합하고 방수 반창고로 붕대를 감습니다. 참가자는 석고를 벗을 수 있기 전에 5일 동안 석고를 착용하게 됩니다. 이 5일 동안 참가자는 샤워를 할 수 있지만 석고를 담그거나 담그지 않도록 지시받습니다(예: 나쁜 또는 수영을 복용). 참가자들은 근육 생검 절차가 ~5mm의 작은 흉터를 남기고 1~2년 후에 거의 보이지 않을 것이라는 사실에 대해 경고를 받을 것입니다. 또한, 국소 마취는 시술 중에 통증 감각이 없도록 보장하지만 근육의 기계적 센서는 민감하게 유지됩니다. 따라서 참가자는 고통이 아닌 압박감을 경험할 수 있습니다. 시술 후 하루나 이틀 동안 근육이 뻣뻣하게 느껴질 수 있습니다.

근육 생검은 근육 염증, 스트레스, 재생 및 동화작용의 매개변수에 대해 실험실(운동 생리학 연구실, KU Leuven) 내에서 생화학적으로 분석됩니다.

무릎 폄근의 최대 자발적 수축(MVC) 훈련된 다리의 등척성, 편심 및 동심 무릎 폄근 토크는 등속 동력계를 사용하여 측정됩니다(cfr. (28)) 기준선 및 EE 후 24, 48, 72 및 120h. 요컨대, 참가자는 몸통을 안정시키기 위해 상체를 의자에 묶고 훈련된 다리를 레버 암에 묶은 상태로 앉습니다. 최대 아이소메트릭 자발적 수축 피크를 위해 무릎 관절은 90⁰의 각도로 배치됩니다. 참가자는 무릎 신근을 최대한 수축하고 3초 동안 유지하도록 지시받습니다. 최대 편심 및 동심 수의 수축은 30⁰/s의 각속도와 180-60⁰ 사이의 운동 범위에서 측정됩니다(여기서 180⁰은 완전 확장을 나타냄). 각 움직임은 시도 사이에 60초의 휴식과 함께 세 번 수행됩니다. 시도 사이에 얻은 최대 피크 토크 값은 분석에 사용됩니다.

카운터 이동 점프 참가자는 기준선과 EE 다음 24, 48, 72 및 120시간에 포스 플랫폼(SMARTJUMP, 퓨전 스포츠, 영국 노팅엄)에서 카운터 이동 점프(CMJ)를 수행합니다. 참가자는 스쿼트 자세(무릎 각도 90⁰)로 하향 이동을 시작하기 전에 엉덩이 너비에 발을 두고 직립 자세(무릎 각도 180⁰)를 취한 후 최대 높이까지 수직으로 점프해야 합니다. 참가자는 점프하는 동안 손을 엉덩이에 대고 몸을 똑바로 유지하도록 지시받습니다. CMJ는 시도 사이에 60초의 휴식으로 3회 수행됩니다. 기록된 가장 높은 점프가 분석에 사용됩니다.

스쿼트 점프 참가자는 기준선과 EE 다음 24, 48, 72 및 120시간에 힘 플랫폼에서 스쿼트 점프(SJ)를 수행합니다. 참가자는 스쿼트 자세(무릎 각도 90⁰)에서 시작하여 최대 높이까지 수직으로 점프하기 전에 3초 동안 이 자세를 유지해야 합니다. 참가자는 점프하는 동안 손을 엉덩이에 대고 몸을 똑바로 유지하도록 지시받습니다. SJ는 시도 사이에 60초 휴식으로 3회 수행됩니다. 기록된 가장 높은 점프가 분석에 사용됩니다.

근육통 훈련된 다리의 근육통은 시각적 아날로그 척도(VAS)를 사용하여 기준선, EE 직전 및 EE 후 24, 48, 72, 96 및 120시간에 평가됩니다. 참가자들은 엉덩이에 손을 대고 3초 동안 스쿼트 자세를 유지하고 맨 왼쪽은 '통증 없음'을 나타내고 맨 오른쪽은 100mm 선으로 표시되는 척도에 자신이 인지한 근육통을 표시하도록 요청받습니다. '극심한 고통'을 나타냅니다.

수면의 질과 양 기준선에서 참가자의 습관적인 수면 위생은 Pittsburgh Sleep Quality Index를 사용하여 평가됩니다. 또한 참가자는 기준선 측정 전날 밤부터 시작하여 전날 밤부터 수면의 질과 수면량을 평가하기 위해 매일 St. Mary's Hospital 설문지를 작성합니다. St. Mary's Hospital 설문지는 피험자의 전날 밤 수면을 평가하기 위한 신뢰할 수 있는 도구인 것으로 나타났습니다.